| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第13-31页 |
| 1.1 色氨酸的理化性质 | 第13页 |
| 1.2 L-色氨酸的应用 | 第13-15页 |
| 1.2.1 L-色氨酸在饲料中的应用 | 第13-14页 |
| 1.2.2 L-色氨酸在医药方面的应用 | 第14页 |
| 1.2.3 L-色氨酸在食品方面的应用 | 第14-15页 |
| 1.2.4 L-色氨酸在农业及环境监测上的应用 | 第15页 |
| 1.3 L-色氨酸的生产方法 | 第15-18页 |
| 1.3.1 化学合成法 | 第15页 |
| 1.3.2 蛋白质水解法 | 第15页 |
| 1.3.3 酶法 | 第15-17页 |
| 1.3.4 微生物法 | 第17-18页 |
| 1.4 L-色氨酸的测定方法 | 第18-20页 |
| 1.4.1 比色测定方法 | 第18-19页 |
| 1.4.2 高效液相（HPLC）测定方法 | 第19页 |
| 1.4.3 毛细管电泳测定方法 | 第19-20页 |
| 1.4.4 其它测定方法 | 第20页 |
| 1.5 大肠杆菌中 L-色氨酸微生物合成机制 | 第20-23页 |
| 1.5.1 共同途径 | 第21-22页 |
| 1.5.2 分支途径 | 第22-23页 |
| 1.6 代谢控制育种思路 | 第23-24页 |
| 1.6.1 切断支路代谢 | 第23-24页 |
| 1.6.2 解除菌体自身反馈调节 | 第24页 |
| 1.6.3 增加前体物的合成 | 第24页 |
| 1.7 基因敲除方法 | 第24-28页 |
| 1.7.1 Red 同源重组法敲除基因 | 第25页 |
| 1.7.2 λ噬菌体 Red 重组转染 | 第25-28页 |
| 1.8 论文的立题背景及主要研究内容 | 第28-31页 |
| 第2章 大肠杆菌基因缺失菌株的构建与摇瓶发酵 | 第31-53页 |
| 2.1 前言 | 第31页 |
| 2.2 实验材料 | 第31-35页 |
| 2.2.1 菌种及质粒 | 第31页 |
| 2.2.2 主要仪器与设备 | 第31-32页 |
| 2.2.3 主要试剂 | 第32页 |
| 2.2.4 培养基及试剂配制 | 第32-34页 |
| 2.2.5 引物 | 第34页 |
| 2.2.6 其他 | 第34-35页 |
| 2.3 实验方法 | 第35-42页 |
| 2.3.1 菌种培养 | 第35页 |
| 2.3.2 菌种的保藏 | 第35页 |
| 2.3.3 原始噬菌体的制备 | 第35-36页 |
| 2.3.4 质粒的提取 | 第36-37页 |
| 2.3.5 poxB 基因的敲除 | 第37-39页 |
| 2.3.6 pta 基因的敲除 | 第39-40页 |
| 2.3.7 ldh 基因的敲除 | 第40页 |
| 2.3.8 琼脂糖凝胶电泳 | 第40-41页 |
| 2.3.9 菌株筛选 | 第41-42页 |
| 2.4 结果与分析 | 第42-51页 |
| 2.4.1 poxB 基因的敲除 | 第42-44页 |
| 2.4.2 pta 基因的敲除 | 第44-46页 |
| 2.4.3 ldh 基因的敲除 | 第46-48页 |
| 2.4.4 E. coli JLTRP 生长曲线测定 | 第48页 |
| 2.4.5 标准曲线的测定 | 第48-49页 |
| 2.4.6 E.coli BZ007 菌株筛选 | 第49-50页 |
| 2.4.7 E.coli BZ010 菌株筛选 | 第50-51页 |
| 2.5 讨论 | 第51-52页 |
| 2.6 本章小结 | 第52-53页 |
| 第3章 发酵罐 L-色氨酸分批发酵研究 | 第53-69页 |
| 3.1 前言 | 第53页 |
| 3.2 材料 | 第53-54页 |
| 3.2.1 菌种 | 第53页 |
| 3.2.2 仪器与试剂 | 第53-54页 |
| 3.2.3 培养基及试剂配制 | 第54页 |
| 3.3 实验方法 | 第54-56页 |
| 3.3.1 5L 发酵罐种子培养 | 第54-55页 |
| 3.3.2 30L 发酵罐发酵 | 第55页 |
| 3.3.3 pH 测定 | 第55页 |
| 3.3.4 葡萄糖的测定 | 第55页 |
| 3.3.5 工程菌生长 OD 值测定 | 第55页 |
| 3.3.6 溶氧的测定 | 第55页 |
| 3.3.7 发酵液中离子浓度分析 | 第55-56页 |
| 3.3.8 发酵产物色氨酸产量的检测 | 第56页 |
| 3.4 实验结果与分析 | 第56-65页 |
| 3.4.1 标准曲线测定 | 第56-59页 |
| 3.4.2 基因敲除对菌体浓度的影响 | 第59页 |
| 3.4.3 基因敲除对 L-色氨酸产量的影响 | 第59-60页 |
| 3.4.4 基因敲除对发酵液中离子浓度的影响 | 第60-62页 |
| 3.4.5 基因敲除对有机酸含量的影响 | 第62-64页 |
| 3.4.6 基因敲除对耗糖量的影响 | 第64-65页 |
| 3.5 讨论 | 第65页 |
| 3.6 本章小结 | 第65-69页 |
| 第4章 结论与展望 | 第69-73页 |
| 4.1 结论 | 第69-71页 |
| 4.2 展望 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-80页 |
| 攻读学位期间所取得的科研成果 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81页 |