中文摘要 | 第10-12页 |
ABSTRACT | 第12-13页 |
符号与缩写 | 第14-15页 |
第一章 绪论 | 第15-37页 |
1.1 单分子检测介绍 | 第15-18页 |
1.1.1 单分子检测 | 第15页 |
1.1.2 单分子定量检测 | 第15-16页 |
1.1.3 单分子计数的检测环境 | 第16-18页 |
1.2 荧光成像技术在单分子检测中的应用 | 第18-21页 |
1.3 单分子检测中荧光探针的选择 | 第21-24页 |
1.4 miRNA常用检测方法介绍 | 第24-25页 |
1.5 结构DNA纳米材料介绍 | 第25-28页 |
1.6 本论文的研究目的和研究内容 | 第28-29页 |
1.6.1 研究目的 | 第28-29页 |
1.6.2 研究内容 | 第29页 |
1.7 参考文献 | 第29-37页 |
第二章 基于DNA四面体的荧光纳米探针单分子定量检测蛋白质 | 第37-56页 |
2.1 引言 | 第37-38页 |
2.2 实验部分 | 第38-40页 |
2.2.1 材料与试剂 | 第38-40页 |
2.2.2 仪器与装置 | 第40页 |
2.3 实验步骤 | 第40-44页 |
2.3.1 玻片的预处理及硅烷化 | 第40页 |
2.3.2 微池的制作 | 第40-41页 |
2.3.3 高温高压灭菌 | 第41页 |
2.3.4 DNA四面体的合成 | 第41页 |
2.3.5 DNA四面体的凝胶电泳表征 | 第41-42页 |
2.3.6 免疫反应过程 | 第42页 |
2.3.7 落射荧光显微镜成像 | 第42-43页 |
2.3.8 荧光图片的处理及计数 | 第43-44页 |
2.4 结果与讨论 | 第44-52页 |
2.4.1 荧光染料的选择 | 第44-45页 |
2.4.2 DNA纳米探针的组装和表征 | 第45-46页 |
2.4.3 BSA封闭条件的优化 | 第46-47页 |
2.4.4 抗体与抗原浓度比例关系的优化 | 第47-48页 |
2.4.5 DNA四面体浓度的优化 | 第48页 |
2.4.6 DNA四面体孵育时间的优化 | 第48-49页 |
2.4.7 目标抗原的定量检测 | 第49-51页 |
2.4.8 特异性实验 | 第51页 |
2.4.9 基质效应实验 | 第51-52页 |
2.5 结论 | 第52页 |
2.6 参考文献 | 第52-56页 |
第三章 基于DNA四面体修饰基底和toehold链置换的特异性单分子检测microRNA | 第56-69页 |
3.1 引言 | 第56-57页 |
3.2 实验部分 | 第57-58页 |
3.2.1 实验材料 | 第57-58页 |
3.2.2 实验装置 | 第58页 |
3.3 实验步骤 | 第58-60页 |
3.3.1 玻片的预处理及硅烷化 | 第58页 |
3.3.2 微池的制作 | 第58页 |
3.3.3 高压灭菌 | 第58页 |
3.3.4 DNA四面体的自组装及电泳表征 | 第58-59页 |
3.3.5 DNA四面体修饰基底的构建及接触角表征 | 第59页 |
3.3.6 DNA四面体修饰基底抑制非特异性吸附实验 | 第59页 |
3.3.7 DNA四面体修饰基底表面探针密度的测定 | 第59页 |
3.3.8 单个miRNA分子的特异性检测 | 第59-60页 |
3.3.9 荧光显微镜成像及荧光图片处理 | 第60页 |
3.4 结果与讨论 | 第60-65页 |
3.4.1 DNA四面体的组装及凝胶电泳表征 | 第60-61页 |
3.4.2 DNA四面体基底的接触角表征 | 第61-62页 |
3.4.3 DNA四面体基底对量子点非特异性吸附的抑制 | 第62-63页 |
3.4.4 DNA四面体基底表面探针密度的计算 | 第63页 |
3.4.5 目标miRNA的测定 | 第63-64页 |
3.4.6 反应时间的优化 | 第64-65页 |
3.4.7 toehold碱基数的优化 | 第65页 |
3.5 结论 | 第65-66页 |
3.6 参考文献 | 第66-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
硕士期间发表论文 | 第70-71页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第71页 |