摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-8页 |
中英文对照缩略词表 | 第9-12页 |
第1章 绪论 | 第12-24页 |
1.1 血管新生 | 第12-18页 |
1.1.1 血管壁结构 | 第13-14页 |
1.1.2 血管内皮生长因子(VEGF) | 第14-15页 |
1.1.3 成纤维生长因子(Fgf) | 第15-16页 |
1.1.4 血小板内皮细胞黏附分子-1(CD31) | 第16-17页 |
1.1.5 血管平滑肌细胞因子(α-SMA) | 第17-18页 |
1.2 间充质干细胞向血管分化的研究 | 第18-20页 |
1.2.1 间充质干细胞(MSCs) | 第18-19页 |
1.2.2 MSCs向血管分化的研究 | 第19-20页 |
1.3 化合物促进血管新生的研究 | 第20-21页 |
1.4 三个藏药概述 | 第21-22页 |
1.5 本文研究的主要内容、目标及方法 | 第22-24页 |
第2章 中药单体化合物的活性筛选 | 第24-33页 |
2.1 实验材料 | 第24-25页 |
2.2 实验方法 | 第25-28页 |
2.2.1 细胞复苏、培养、传代及冻存 | 第25-26页 |
2.2.2 稳转细胞株的阳性刺激物的筛选 | 第26页 |
2.2.3 药物单体化合物对稳转细胞株的增殖—毒性检测 | 第26页 |
2.2.4 药物单体化合物对稳转细胞株表达相对荧光素酶活性的检测 | 第26-28页 |
2.3 实验结果 | 第28-31页 |
2.3.1 筛选稳转细胞株的阳性对照 | 第28-29页 |
2.3.2 药物单体化合物的体外安全性评价 | 第29页 |
2.3.3 药物单体化合物对稳转细胞株表达相对荧光素酶活性的影响 | 第29-31页 |
2.4 讨论 | 第31-33页 |
第3章 药物单体诱导rMSCs表达血管标记基因研究 | 第33-51页 |
3.1 实验材料 | 第33页 |
3.2 实验方法 | 第33-39页 |
3.2.1 rMSCs的体外分离、原代培养与冻存和传代培养 | 第33-35页 |
3.2.2 rMSCs的加药诱导培养和样品总RNA的提取 | 第35-36页 |
3.2.3 反转录合成cDNA第一条链及RT-PCR扩增 | 第36-38页 |
3.2.4 各基因扩增引物的特异性检测 | 第38页 |
3.2.5 血管标记基因的mRNA相对表达量检测 | 第38-39页 |
3.3 实验结果 | 第39-49页 |
3.3.1 rMSCs的体外分离及形态学观察 | 第39-40页 |
3.3.2 样品总RNA的检测 | 第40-42页 |
3.3.3 样品cDNA的RT-PCR扩增检测 | 第42-43页 |
3.3.4 绘制各基因的标准曲线并检测其扩增引物的特异性 | 第43-47页 |
3.3.5 测定血管标记分子的mRNA相对表达量 | 第47-49页 |
3.4 讨论 | 第49-51页 |
第4章 药物单体诱导rMSCs表达血管标记蛋白研究 | 第51-60页 |
4.1 实验材料 | 第51页 |
4.2 实验方法 | 第51-53页 |
4.2.1 试剂的配制 | 第51-52页 |
4.2.2 药物单体诱导rMSCs原位表达血管标记蛋白的检测 | 第52-53页 |
4.3 实验结果 | 第53-58页 |
4.3.1 药物单体诱导rMSCs原位表达α-SMA蛋白情况 | 第53-54页 |
4.3.2 药物单体诱导rMSCs原位表达VEGF蛋白情况 | 第54-56页 |
4.3.3 药物单体诱导rMSCs原位表达CD31蛋白情况 | 第56-58页 |
4.4 讨论 | 第58-60页 |
结论 | 第60-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-75页 |
攻读硕士学位期间发表的论文及科研成果 | 第75页 |