| 中文摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 英文名称缩略语 | 第10-12页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 第一部分：小鼠圆形精子细胞蛋白质组学鉴定 | 第14-30页 |
| 一、实验材料 | 第14-15页 |
| 二、实验步骤和方法 | 第15-18页 |
| 2.1 利用重力沉降法分离纯化圆形精子细胞 | 第15-16页 |
| 2.2 圆形生精细胞的总蛋白提取及定量 | 第16页 |
| 2.3 质谱样品制备 | 第16-17页 |
| 2.4 全自动2D-Nano-LC-ESI-MS/MS分析肽段 | 第17页 |
| 2.5 数据库检索[18] | 第17页 |
| 2.6 生物信息学分析 | 第17-18页 |
| 三、实验结果 | 第18-28页 |
| 3.1 小鼠圆形精子细胞的分离纯化 | 第18页 |
| 3.2 小鼠圆形精子细胞蛋白表达谱的gene ontology注释 | 第18-21页 |
| 3.4 小鼠圆形精子细胞蛋白组参与的通路分析 | 第21-28页 |
| 四、结论 | 第28页 |
| 五、讨论 | 第28-30页 |
| 第二部分：小鼠睾丸高表达基因INCA1真核表达载体的构建及干扰靶点筛选 | 第30-55页 |
| 一、实验材料 | 第30-37页 |
| 1.1 实验动物 | 第30页 |
| 1.2 细胞和菌株 | 第30页 |
| 1.3 质粒 | 第30-32页 |
| 1.4 工具酶及主要试剂 | 第32-33页 |
| 1.5 实验所用引物 | 第33-34页 |
| 1.6 主要仪器及器材 | 第34页 |
| 1.7 试剂配制方法 | 第34-37页 |
| 二 实验方法 | 第37-47页 |
| 2.1 小鼠组织总RNA的提取 | 第37页 |
| 2.2 RT-PCR扩增mINCA1 | 第37-38页 |
| 2.3 目的基因与载体pMD(?)-19T连接及序列测定 | 第38-41页 |
| 2.4 重组表达载体pMSCVpuro-mINCA1的构建及鉴定 | 第41-43页 |
| 2.5. 重组质粒pMSCVpuro-mINCA1转染HEK293T细胞 | 第43-44页 |
| 2.6 利用RT-PCR和Western blotting检测mINCA1基因的表达 | 第44-45页 |
| 2.7 小鼠mINCA1基因RNA干扰质粒的设计、合成 | 第45-46页 |
| 2.8 真核表达载体与干扰载体细胞共转染与nINCA1干扰靶点的鉴定 | 第46-47页 |
| 三、实验结果 | 第47-53页 |
| 3.1 组织样品总RNA纯度和浓度的分析及完整性检测 | 第47页 |
| 3.2 RT-PCR扩增mINCA1基因 | 第47-48页 |
| 3.3 pMD(?)19-T-mINCA1质粒构建 | 第48-49页 |
| 3.4 pMSCVpuro-mINCA1真核表达载体的构建与鉴定 | 第49页 |
| 3.5 真核表达质粒pMSCVpuro-mINCA1在真核细胞中的表达 | 第49-51页 |
| 3.6 小鼠mINCA1干扰靶点的鉴定 | 第51-53页 |
| 四. 讨论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 附表 | 第60-68页 |
| 综述 | 第68-79页 |
| 参考文献 | 第77-79页 |
| 个人简介 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
