| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第13-21页 |
| 1.1 烟曲霉和烟曲霉感染 | 第13-14页 |
| 1.1.1 烟曲霉的分类学地位和生物学特性 | 第13-14页 |
| 1.1.2 烟曲霉引起的机体感染 | 第14页 |
| 1.2 烟曲霉致病因子和致病机制的研究现状 | 第14-16页 |
| 1.2.1 烟曲霉致病因子的研究现状 | 第15-16页 |
| 1.2.2 烟曲霉致病机制的研究进展 | 第16页 |
| 1.3 渗透压应激在烟曲霉感染中的作用机制 | 第16-20页 |
| 1.3.1 烟曲霉感染机体时面临的应激反应 | 第16-17页 |
| 1.3.2 高渗透压应激的研究进展 | 第17-20页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 第2章 利用根癌农杆菌介导的遗传转化体系（ATMT）获得烟曲霉T-DNA 插入突变体 | 第21-27页 |
| 2.1 材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1 菌株 | 第21页 |
| 2.1.2 培养基 | 第21-22页 |
| 2.1.3 试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.4 仪器设备 | 第23页 |
| 2.2 方法 | 第23-25页 |
| 2.2.1 烟曲霉 IFM40808 分生孢子悬浊液的制备 | 第23-24页 |
| 2.2.2 根癌农杆菌 AGL-1 的活化和诱导培养 | 第24页 |
| 2.2.3 烟曲霉 IFM40808 与根癌农杆菌 AGL-1 共培养 | 第24页 |
| 2.2.4 转化获得烟曲霉 T-DNA 插入突变体 | 第24-25页 |
| 2.3 结果 | 第25页 |
| 2.4 讨论 | 第25-27页 |
| 第3章 建立高渗敏感烟曲霉 T-DNA 插入突变体亚库 | 第27-30页 |
| 3.1 材料 | 第27-28页 |
| 3.1.1 菌株 | 第27页 |
| 3.1.2 试剂 | 第27页 |
| 3.1.3 仪器设备 | 第27-28页 |
| 3.2 方法 | 第28页 |
| 3.2.1 烟曲霉 IFM40808 在不同 NaCl 浓度构成的高渗透压条件下的生长状态 | 第28页 |
| 3.2.2 高渗透压培养基筛选敏感烟曲霉 T-DNA 插入突变体 | 第28页 |
| 3.2.3 高渗敏感烟曲霉 T-DNA 插入突变体的形态学观察 | 第28页 |
| 3.3 结果 | 第28-29页 |
| 3.4 讨论 | 第29-30页 |
| 第4章 高渗敏感烟曲霉 T-DNA 插入突变体的分子分析 | 第30-42页 |
| 4.1 材料 | 第30-31页 |
| 4.1.1 菌株 | 第30页 |
| 4.1.2 试剂 | 第30页 |
| 4.1.3 仪器设备 | 第30-31页 |
| 4.2 方法 | 第31-35页 |
| 4.2.1 高渗透压敏感烟曲霉 T-DNA 插入突变体基因组 DNA 的提取 | 第31-32页 |
| 4.2.2 HI-TAIL PCR 扩增烟曲霉 T-DNA 突变体的侧翼序列 | 第32-35页 |
| 4.2.3 HI-TAIL-PCR 产物测序 | 第35页 |
| 4.3 结果 | 第35-39页 |
| 4.3.1 烟曲霉 T-DNA 插入突变体 PCR 检测 hph | 第35-36页 |
| 4.3.2 HI-TAIL PCR 扩增 T-DNA 插入突变体侧翼序列 | 第36页 |
| 4.3.3 高渗敏感烟曲霉 T-DNA 插入突变体 | 第36-38页 |
| 4.3.4 功能基因分析 | 第38-39页 |
| 4.4 讨论 | 第39-42页 |
| 第5章 构建烟曲霉 BSD2 基因敲除株和回复突变株 | 第42-61页 |
| 5.1 材料 | 第42页 |
| 5.1.1 菌株 | 第42页 |
| 5.1.2 试剂 | 第42页 |
| 5.1.3 培养基 | 第42页 |
| 5.1.4 仪器设备 | 第42页 |
| 5.2 生物信息学分析 AFM3217 的插入突变位点 | 第42-43页 |
| 5.3 RT- PCR 验证 BSD2 的转录水平 | 第43-45页 |
| 5.3.1 设计特异性引物 | 第43页 |
| 5.3.2 提取 IFM40808 和 AFM3217 的总 RNA | 第43-44页 |
| 5.3.3 逆转录反应合成 cDNA | 第44-45页 |
| 5.3.4 RT-PCR 反应 | 第45页 |
| 5.4 构建 BSD2 的基因缺失株和回复突变株 | 第45-57页 |
| 5.4.1 构建 bsd2 基因敲除株 | 第45-52页 |
| 5.4.2 构建 bsd2 基因回复突变株 | 第52-57页 |
| 5.5 野生型，AFM3217，BSD2 基因敲除株和回复突变株生物学性状比较 | 第57页 |
| 5.6 结果 | 第57-60页 |
| 5.7 讨论 | 第60-61页 |
| 第6章 烟曲霉秀丽隐杆线虫感染实验和药物敏感性实验 | 第61-65页 |
| 6.1 材料 | 第61-62页 |
| 6.1.1 菌株 | 第61页 |
| 6.1.2 培养基 | 第61-62页 |
| 6.2 仪器设备 | 第62页 |
| 6.3 方法 | 第62页 |
| 6.3.1 大肠杆菌 OP50 菌液的制备： | 第62页 |
| 6.3.2 秀丽隐杆线虫的培养： | 第62页 |
| 6.4 烟曲霉秀丽隐杆线虫感染模型的建立 | 第62页 |
| 6.5 药物敏感性实验 | 第62-63页 |
| 6.5.1 菌悬液制备 | 第62页 |
| 6.5.2 微量稀释法检测待测 IFM40808 和 AFM3217 对抗真菌药物的敏感性 | 第62-63页 |
| 6.6 结果 | 第63-64页 |
| 6.6.1 秀丽隐杆线虫致病模型 | 第63页 |
| 6.6.2 最低抑菌浓度（MIC）的判定 | 第63-64页 |
| 6.7 讨论 | 第64-65页 |
| 第7章 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-78页 |
| 在学期间取得的科研成果 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
