| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-18页 |
| 1.1 轮纹病 | 第11-13页 |
| 1.1.1 轮纹病的种类 | 第11-12页 |
| 1.1.2 苹果轮纹病的发生及危害情况 | 第12-13页 |
| 1.2 苹果轮纹病菌致病机理的研究概况 | 第13-14页 |
| 1.3 丝状真菌的遗传转化的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.4 接种方法及致病性分化的研究 | 第15-16页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| 1.6 本研究的技术路线 | 第17-18页 |
| 第二章 PEG 介导的 B. DOTHIDEA 的遗传转化 | 第18-33页 |
| 2.1 材料、试剂和仪器 | 第18页 |
| 2.1.1 材料 | 第18页 |
| 2.1.2 主要仪器、试剂及培养基配方 | 第18页 |
| 2.2 试验方法 | 第18-27页 |
| 2.2.1 酶解液的配制 | 第18页 |
| 2.2.2 原生质体的制备 | 第18-19页 |
| 2.2.3 原生质体的再生 | 第19页 |
| 2.2.4 质粒的提取 | 第19页 |
| 2.2.5 质粒线性化 | 第19-20页 |
| 2.2.6 PEG 介导的 B. dothidea 的遗传转化 | 第20页 |
| 2.2.7 转化子的永久保存 | 第20页 |
| 2.2.8 B. dothidea 转化子的初筛 | 第20页 |
| 2.2.9 B. dothidea 转化子的遗传稳定性分析 | 第20页 |
| 2.2.10 B. dothidea 转化子的表型分析 | 第20-21页 |
| 2.2.11 B. dothidea 转化子的分子检测 | 第21-26页 |
| 2.2.12 基因组 RNA 的提取及 RNA 反转录 | 第26-27页 |
| 2.3 结果与分析 | 第27-31页 |
| 2.3.1 转化子的遗传稳定性分析 | 第27-28页 |
| 2.3.2 基因组 DNA 的提取 | 第28页 |
| 2.3.3 转化子的 ITS 序列检测 | 第28页 |
| 2.3.4 转化子的 PFL2 插入的 PCR 检测 | 第28-29页 |
| 2.3.5 转化子的 gfp 插入的 PCR 检测 | 第29页 |
| 2.3.6 B. dothidea 转化子载体插入的 Southern blotting 分析 | 第29-30页 |
| 2.3.7 转化子的荧光观察 | 第30页 |
| 2.3.8 基因组 RNA 的分析及 RT-PCR 的分析 | 第30-31页 |
| 2.4 结论与分析 | 第31-33页 |
| 第三章 突变体的表型分析 | 第33-39页 |
| 3.1 材料与方法 | 第33-34页 |
| 3.1.1 材料 | 第33页 |
| 3.1.2 方法 | 第33-34页 |
| 3.2 结果与分析 | 第34-37页 |
| 3.2.1 突变体的菌落形态观察 | 第34页 |
| 3.2.2 突变体的生长速率测定 | 第34-37页 |
| 3.3 结论与讨论 | 第37-39页 |
| 第四章 致病突变体的筛选 | 第39-43页 |
| 4.1 实验材料 | 第39页 |
| 4.1.1 菌株 | 第39页 |
| 4.1.2 接种材料 | 第39页 |
| 4.1.3 培养基 | 第39页 |
| 4.2 实验方法 | 第39-40页 |
| 4.2.1 菌株的培养 | 第39页 |
| 4.2.2 离体枝条及叶片接种前处理 | 第39-40页 |
| 4.2.3 离体接种--突变体的致病性测定 | 第40页 |
| 4.2.4 数据分析 | 第40页 |
| 4.3 结果与分析 | 第40-42页 |
| 4.4 结果与分析 | 第42-43页 |
| 第五章 讨论与结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 附录 1 实验所用试剂及培养基配制 | 第49-52页 |
| 附录 2 实验所用仪器 | 第52-53页 |
| 英文缩略表 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 作者简介 | 第55页 |
