| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-27页 |
| 1.1 引言 | 第15页 |
| 1.2 葡萄抗白粉病和抗灰霉病的研究 | 第15-18页 |
| 1.2.1 葡萄抗白粉病研究 | 第15-16页 |
| 1.2.2 葡萄抗灰霉病研究 | 第16-18页 |
| 1.3 JAZ转录因子 | 第18-22页 |
| 1.3.1 茉莉酸信号途径研究进展 | 第18页 |
| 1.3.2 JAZ的结构功能分析 | 第18-19页 |
| 1.3.3 JAZ基因家族的抗性功能研究进展 | 第19-22页 |
| 1.4 Thaumatin-like基因 | 第22-26页 |
| 1.4.1 TLPs基因的结构特征 | 第22页 |
| 1.4.2 葡萄TLPs基因的研究进展 | 第22-23页 |
| 1.4.3 TLPs基因在不同物种全基因组范围内的研究进展 | 第23-25页 |
| 1.4.4 TLPs蛋白的生产和利用 | 第25-26页 |
| 1.5 本研究目的意义 | 第26-27页 |
| 第二章 中国野生毛葡萄VqJAZ4及其启动子功能研究 | 第27-59页 |
| 2.1 材料 | 第27-30页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第27页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第27页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第27-28页 |
| 2.1.4 载体与菌株 | 第28页 |
| 2.1.5 引物 | 第28-30页 |
| 2.2 方法 | 第30-36页 |
| 2.2.1 病原菌接种处理 | 第30页 |
| 2.2.2 RNA提取纯化及反转录合成cDNA第一链 | 第30-31页 |
| 2.2.3 实时荧光定量RT-PCR | 第31页 |
| 2.2.4 中国野生毛葡萄JAZ4生物信息学分析 | 第31页 |
| 2.2.5 JAZ4克隆与序列分析 | 第31页 |
| 2.2.6 JAZ4过量表达载体的构建 | 第31-32页 |
| 2.2.7 VqJAZ4转基因拟南芥株系抗病性鉴定 | 第32页 |
| 2.2.8 拟南芥台盼蓝染色 | 第32页 |
| 2.2.9 拟南芥NBT染色 | 第32-33页 |
| 2.2.10 拟南芥苯胺蓝染色 | 第33页 |
| 2.2.11 拟南芥病原菌孢子计数 | 第33页 |
| 2.2.12 拟南芥病原菌病斑统计 | 第33页 |
| 2.2.13 VqJAZ4启动子克隆及生物信息学分析 | 第33页 |
| 2.2.14 VqJAZ4启动子瞬时表达载体的构建 | 第33页 |
| 2.2.15 VqJAZ4启动子瞬时转化及GUS染色 | 第33-34页 |
| 2.2.16 VqJAZ4酵母双杂交BD载体的构建 | 第34页 |
| 2.2.17 VqJAZ4自激活检测和蛋白毒性检测 | 第34页 |
| 2.2.18 VqJAZ4与葡萄白粉病酵母文库的互作分析 | 第34页 |
| 2.2.19 VqJAZ4转化无核白葡萄 | 第34-35页 |
| 2.2.20 数据整理与分析 | 第35-36页 |
| 2.3 结果与分析 | 第36-54页 |
| 2.3.1 中国野生毛葡萄JAZ4生物信息学分析 | 第36-38页 |
| 2.3.2 JAZ4克隆和过量表达载体的构建 | 第38-39页 |
| 2.3.3 VqJAZ4转基因拟南芥株系的筛选和鉴定 | 第39-40页 |
| 2.3.4 VqJAZ4转基因拟南芥株系对白粉病的抗性分析 | 第40-42页 |
| 2.3.5 VqJAZ4转基因拟南芥株系对灰霉病的抗性分析 | 第42-43页 |
| 2.3.6 VqJAZ4启动子克隆与序列分析 | 第43-45页 |
| 2.3.7 VqJAZ4启动子瞬时表达载体的构建 | 第45-47页 |
| 2.3.8 VqJAZ4启动子活性分析及对白粉病接种后的响应 | 第47-49页 |
| 2.3.9 VqJAZ4酵母双杂交BD载体的构建 | 第49页 |
| 2.3.10 VqJAZ4转化酵母感受态细胞 | 第49-50页 |
| 2.3.11 VqJAZ4自激活检测和蛋白毒性检测 | 第50-52页 |
| 2.3.12 VqJAZ4与葡萄白粉病诱导文库的互作分析 | 第52-53页 |
| 2.3.13 VqJAZ4转基因葡萄株系的筛选和鉴定 | 第53-54页 |
| 2.4 讨论 | 第54-58页 |
| 2.5 小结 | 第58-59页 |
| 第三章 中国野生毛葡萄VqJAZ9功能研究 | 第59-73页 |
| 3.1 材料 | 第59-60页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第59页 |
| 3.1.2 主要仪器设备 | 第59页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第59页 |
| 3.1.4 载体与菌株 | 第59页 |
| 3.1.5 引物 | 第59-60页 |
| 3.2 方法 | 第60-61页 |
| 3.2.1 病原菌接种处理 | 第60页 |
| 3.2.2 RNA提取纯化及反转录合成cDNA第一链 | 第60页 |
| 3.2.3 实时荧光定量RT-PCR | 第60页 |
| 3.2.4 中国野生毛葡萄JAZ9生物信息学分析 | 第60页 |
| 3.2.5 JAZ9克隆及序列分析 | 第60页 |
| 3.2.6 JAZ9过量表达载体的构建 | 第60页 |
| 3.2.7 VqJAZ9转基因拟南芥株系抗病性鉴定 | 第60页 |
| 3.2.8 拟南芥台盼蓝染色 | 第60-61页 |
| 3.2.9 拟南芥NBT染色 | 第61页 |
| 3.2.10 拟南芥苯胺蓝染色 | 第61页 |
| 3.2.11 拟南芥病原菌孢子计数 | 第61页 |
| 3.2.12 拟南芥病原菌病斑统计 | 第61页 |
| 3.2.13 VqJAZ9酵母双杂交BD载体的构建 | 第61页 |
| 3.2.14 VqJAZ9自激活检测和蛋白毒性检测 | 第61页 |
| 3.2.15 数据整理与分析 | 第61页 |
| 3.3 结果与分析 | 第61-70页 |
| 3.3.1 中国野生毛葡萄JAZ9生物信息学分析 | 第61-63页 |
| 3.3.2 JAZ9克隆和过量表达载体的构建 | 第63页 |
| 3.3.3 VqJAZ9转基因拟南芥株系的筛选和鉴定 | 第63-64页 |
| 3.3.4 VqJAZ9转基因拟南芥株系对白粉病的抗性分析 | 第64-66页 |
| 3.3.5 VqJAZ9拟南芥株系对灰霉病的抗性分析 | 第66-68页 |
| 3.3.6 VqJAZ9酵母双杂交BD载体的构建 | 第68-69页 |
| 3.3.7 VqJAZ9转化酵母感受态细胞 | 第69页 |
| 3.3.8 VqJAZ9自激活检测和蛋白毒性检测 | 第69-70页 |
| 3.4 讨论 | 第70-72页 |
| 3.5 小结 | 第72-73页 |
| 第四章 葡萄TLPs基因家族的鉴定和表达分析 | 第73-87页 |
| 4.1 材料 | 第73-75页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第73页 |
| 4.1.2 主要仪器设备 | 第73页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第73页 |
| 4.1.4 引物 | 第73-75页 |
| 4.2 方法 | 第75-77页 |
| 4.2.1 病原菌接种处理 | 第75-76页 |
| 4.2.2 葡萄RNA提取纯化及反转录合成cDNA第一链 | 第76页 |
| 4.2.3 实时荧光定量RT-PCR | 第76页 |
| 4.2.4 葡萄TLPs生物信息学分析 | 第76页 |
| 4.2.5 数据整理与分析 | 第76-77页 |
| 4.3 结果与分析 | 第77-84页 |
| 4.3.1 葡萄TLPs鉴定 | 第77-78页 |
| 4.3.2 葡萄TLPs进化树分析 | 第78-79页 |
| 4.3.3 葡萄TLPs基因结构分析 | 第79页 |
| 4.3.4 葡萄TLPs蛋白结构分析 | 第79页 |
| 4.3.5 葡萄TLPs基因家族同线性分析 | 第79-80页 |
| 4.3.6 葡萄VvTLP与拟南芥AtTLP同线性分析 | 第80-81页 |
| 4.3.7 葡萄TLPs在不同器官中的表达分析 | 第81-82页 |
| 4.3.8 葡萄TLPs在病原菌诱导下的表达分析 | 第82-84页 |
| 4.4 讨论 | 第84-86页 |
| 4.5 小结 | 第86-87页 |
| 第五章 中国野生毛葡萄VqTLP15和VqTLP29功能研究 | 第87-114页 |
| 5.1 材料 | 第87-89页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第87页 |
| 5.1.2 主要仪器设备 | 第87页 |
| 5.1.3 主要试剂 | 第87页 |
| 5.1.4 载体与菌株 | 第87页 |
| 5.1.5 引物 | 第87-89页 |
| 5.2 方法 | 第89-91页 |
| 5.2.1 拟南芥病原菌接种处理 | 第89页 |
| 5.2.2 RNA提取纯化及反转录合成cDNA第一链 | 第89页 |
| 5.2.3 实时荧光定量RT-PCR | 第89页 |
| 5.2.4 中国野生毛葡萄TLP15和TLP29克隆与序列分析 | 第89页 |
| 5.2.5 VqTLP15和VqTLP29过量表达载体的构建 | 第89页 |
| 5.2.6 VqTLP15和VqTLP29亚细胞定位载体的构建 | 第89-90页 |
| 5.2.7 葡萄原生质体亚细胞定位试验 | 第90页 |
| 5.2.8 VqTLP15和VqTLP29转基因拟南芥株系抗病性鉴定 | 第90页 |
| 5.2.9 拟南芥台盼蓝染色 | 第90页 |
| 5.2.10 拟南芥NBT染色 | 第90页 |
| 5.2.11 拟南芥苯胺蓝染色 | 第90页 |
| 5.2.12 拟南芥病原菌孢子计数 | 第90页 |
| 5.2.13 拟南芥病原菌病斑统计 | 第90页 |
| 5.2.14 拟南芥细菌菌落数的统计 | 第90页 |
| 5.2.15 拟南芥气孔观察试验 | 第90-91页 |
| 5.2.16 数据整理与分析 | 第91页 |
| 5.3 结果与分析 | 第91-110页 |
| 5.3.1 中国野生毛葡萄TLP15克隆、序列分析和过量表达载体的构建 | 第91-93页 |
| 5.3.2 中国野生毛葡萄TLP29克隆、序列分析和过量表达载体的构建 | 第93-95页 |
| 5.3.3 VqTLP15和VqTLP29亚细胞定位载体的构建 | 第95-97页 |
| 5.3.4 VqTLP15和VqTLP29亚细胞定位 | 第97-98页 |
| 5.3.5 VqTLP15转基因拟南芥株系的筛选和鉴定 | 第98-99页 |
| 5.3.6 VqTLP15转基因拟南芥株系对白粉病的抗性分析 | 第99-100页 |
| 5.3.7 VqTLP15转基因拟南芥株系对灰霉病的抗性分析 | 第100-101页 |
| 5.3.8 VqTLP15转基因拟南芥株系对DC3000的抗性分析 | 第101-103页 |
| 5.3.9 VqTLP15转基因拟南芥株系对PTI的免疫应答分析 | 第103-104页 |
| 5.3.10 VqTLP29转基因拟南芥株系的筛选和鉴定 | 第104页 |
| 5.3.11 VqTLP29转基因拟南芥株系对白粉病的抗性分析 | 第104-106页 |
| 5.3.12 VqTLP29转基因拟南芥株系对灰霉病的抗性分析 | 第106-107页 |
| 5.3.13 VqTLP29转基因拟南芥株系对DC3000的抗性分析 | 第107-109页 |
| 5.3.14 VqTLP29转基因拟南芥株系对PTI的免疫应答分析 | 第109-110页 |
| 5.4 讨论 | 第110-113页 |
| 5.5 小结 | 第113-114页 |
| 第六章 结论和创新点 | 第114-116页 |
| 6.1 结论 | 第114-115页 |
| 6.2 创新点 | 第115-116页 |
| 参考文献 | 第116-132页 |
| 附录 | 第132-141页 |
| 致谢 | 第141-143页 |
| 作者简介 | 第143-144页 |
