摘要 | 第11-14页 |
ABSTRACT | 第14-17页 |
英文缩略语表 | 第18-21页 |
第1章 前言 | 第21-25页 |
第2章 雌激素和氧化应激对成骨细胞功能以及过氧化物还原酶1型表达的影响 | 第25-57页 |
2.1 材料和方法 | 第26-43页 |
2.1.1 主要试剂和仪器 | 第26-31页 |
2.1.2 实验方法 | 第31-43页 |
2.2 结果 | 第43-49页 |
2.2.1 雌激素缺乏导致小鼠胫骨近端骨小梁表现为骨质疏松 | 第43-44页 |
2.2.2 雌激素缺乏导致小鼠胫骨近端骨小梁骨改建活跃 | 第44-45页 |
2.2.3 雌激素缺乏导致小鼠胫骨近端过氧化物还原酶表达增加 | 第45页 |
2.2.4 小鼠MC3T3-E1前成骨细胞系的体外培养的形态及功能鉴定 | 第45-46页 |
2.2.5 氧化应激导致成骨细胞凋亡增加并降低细胞活力 | 第46-47页 |
2.2.6 雌激素抑制氧化应激诱导的成骨细胞凋亡和PRX1表达的增加 | 第47-48页 |
2.2.7 氧化应激导致成骨细胞的分化功能降低以及雌激素的保护作用 | 第48-49页 |
2.3 讨论 | 第49-55页 |
2.3.1 雌激素缺乏导致高转化型骨质疏松 | 第49-51页 |
2.3.2 雌激素缺乏导致小鼠胫骨成骨细胞内PRXs表达水平升高 | 第51-53页 |
2.3.3 ROS促进成骨细胞PRX1表达和凋亡并抑制分化 | 第53-54页 |
2.3.4 雌激素通过降低PRX1表达抑制ROS诱导的成骨细胞凋亡并促进分化 | 第54-55页 |
2.4 结论 | 第55-57页 |
第3章 过氧化物还原酶1型敲除和过表达细胞系的制备 | 第57-72页 |
3.1 材料和方法 | 第58-66页 |
3.1.1 主要试剂和仪器 | 第58-60页 |
3.1.2 实验方法 | 第60-66页 |
3.2 结果 | 第66-69页 |
3.2.1 MC3T3-E1细胞电转条件检测结果 | 第66页 |
3.2.2 MC3T3-E1细胞药筛浓度检测及单克隆生长验证结果 | 第66页 |
3.2.3 敲除靶位点设计及引物合成 | 第66-67页 |
3.2.3 PRX1敲除载体构建结果 | 第67-68页 |
3.2.4 质粒电转后pool细胞的敲除效率检测结果 | 第68页 |
3.2.5 CRISPR/Cas9敲除结果分析 | 第68页 |
3.2.6 PRX1过表达载体构建结果 | 第68-69页 |
3.2.7 PRX1敲除和过表达AMC3T3-E1细胞株PRX1表达检测 | 第69页 |
3.3 讨论 | 第69-71页 |
3.4 结论 | 第71-72页 |
第4章 过氧化物还原酶1型对成骨细胞凋亡、增殖和分化功能的影响 | 第72-86页 |
4.1 材料和方法 | 第72-77页 |
4.1.1 主要试剂和仪器 | 第72-74页 |
4.1.2 实验方法 | 第74-77页 |
4.2 结果 | 第77-81页 |
4.2.1 PRX1维持成骨细胞的增殖并促进其凋亡 | 第77-78页 |
4.2.2 雌激素抑制过氧化氢诱导的成骨细胞凋亡 | 第78-79页 |
4.2.3 PRX1抑制成骨细胞的分化功能 | 第79-80页 |
4.2.4 雌激素逆转过氧化氢诱导的成骨细胞分化功能障碍 | 第80-81页 |
4.3 讨论 | 第81-85页 |
4.3.1 PRX1抑制成骨细胞ROS水平并促进其凋亡 | 第81-83页 |
4.3.2 PRX1抑制成骨细胞分化功能 | 第83-85页 |
4.4 结论 | 第85-86页 |
第5章 雌激素和氧化应激通过过氧化物还原酶1型影响成骨细胞功能的信号通路研究 | 第86-100页 |
5.1 材料和方法 | 第87-90页 |
5.1.1 主要试剂和仪器 | 第87-88页 |
5.1.2 实验方法 | 第88-90页 |
5.2 结果 | 第90-92页 |
5.2.1 PRX1参与TRX、MAPK、AKT1、NF-κB信号通路的调节 | 第90-91页 |
5.2.2 PRX1通过细胞色素C调节成骨细胞凋亡 | 第91页 |
5.2.3 PRX1通过硫氧还蛋白促进细胞凋亡信号调节激酶1活化 | 第91-92页 |
5.2.4 雌激素和氧化应激通过PRX1-AKT1/NF-κB信号通路影响成骨细胞分化功能 | 第92页 |
5.3 讨论 | 第92-99页 |
5.3.1 PRX1分别通过Cyto-c和ASK1途径影响成骨细胞凋亡 | 第93-95页 |
5.3.2 雌激素在氧化应激环境下通过AKT1/PRX1/NF-κB途径调控成骨细胞增殖和分化 | 第95-99页 |
5.4 结论 | 第99-100页 |
第6章 全文结论 | 第100-101页 |
图片附录 | 第101-133页 |
参考文献 | 第133-143页 |
综述 | 第143-156页 |
参考文献 | 第152-156页 |
致谢 | 第156-157页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第157-159页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第159-160页 |
附录 | 第160-170页 |