摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
前言 | 第12页 |
第一部分 | 第12-15页 |
材料与方法 | 第12-13页 |
结果 | 第13-14页 |
结论 | 第14页 |
参考文献 | 第14-15页 |
第二部分 | 第15-44页 |
材料与方法 | 第15-28页 |
1.实验材料 | 第15-17页 |
2. 实验方法 | 第17-28页 |
2.1 质粒的扩增及纯化鉴定 | 第17-18页 |
2.2 敲除质粒的构建 | 第18-19页 |
2.3 稳转细胞株的建立 | 第19-20页 |
2.4 RT-PCR 及实时荧光定量 PCR(q PCR) | 第20-21页 |
2.5 蛋白免疫印迹实验 | 第21-23页 |
2.6 细胞增殖实验 | 第23页 |
2.7 细胞周期实验 | 第23-24页 |
2.8 划痕实验 | 第24页 |
2.9 Transwell细胞迁移实验 | 第24-25页 |
2.10 Transwell细胞侵袭实验 | 第25页 |
2.11 吖啶橙染色 | 第25-26页 |
2.12 裸鼠门静脉肝转移模型的建立 | 第26页 |
2.13 组织石蜡包埋 | 第26页 |
2.14 组织切片 | 第26页 |
2.15 苏木素(Hematoxylin)-伊红(Eosin)染色 | 第26-27页 |
2.16 免疫组织化学染色 | 第27-28页 |
2.17 数据统计 | 第28页 |
实验结果 | 第28-39页 |
1.胰腺癌细胞株的筛选 | 第28-29页 |
2.成功构建 PTEN 过表达稳转细胞株 | 第29页 |
3.成功构建 PTEN 敲除稳转细胞株 | 第29-31页 |
4.PTEN 抑制胰腺癌细胞的增殖 | 第31-32页 |
5.PTEN 对细胞周期 G1 期有抑制作用 | 第32-33页 |
6.PTEN 的缺失对胰腺癌细胞的迁移有促进作用 | 第33-34页 |
7.PTEN 的缺失促进胰腺癌细胞的侵袭 | 第34-35页 |
8.PTEN 促进细胞自噬 | 第35-37页 |
9.PTEN 的缺失促进细胞 EMT 的发生 | 第37-38页 |
10.动物实验 | 第38-39页 |
讨论 | 第39-41页 |
结论 | 第41页 |
参考文献 | 第41-44页 |
综述 | 第44-54页 |
参考文献 | 第49-54页 |
致谢 | 第54-56页 |