| 摘要 | 第11-13页 |
| Abstract | 第13-15页 |
| 中英文縮写对照 | 第16-18页 |
| 引言 | 第18-20页 |
| 第一章 文献综述 | 第20-81页 |
| 1.1 基本概念 | 第20-23页 |
| 1.1.1 毛细管电泳 | 第20-21页 |
| 1.1.2 毛细管区带电泳 | 第21-22页 |
| 1.1.3 胶束电动毛细管色谱 | 第22页 |
| 1.1.4 激光诱导荧光检测 | 第22页 |
| 1.1.5 PDMS芯片 | 第22-23页 |
| 1.2 CE应用于单细胞分析研究 | 第23-35页 |
| 1.2.1 单细胞进样技术 | 第23-25页 |
| 1.2.2 单细胞裂解技术 | 第25-26页 |
| 1.2.3 单细胞内容物分离技术 | 第26-27页 |
| 1.2.4 单细胞内容物检测技术 | 第27-31页 |
| 1.2.4.1 光吸收法 | 第27页 |
| 1.2.4.2 荧光检测法 | 第27-29页 |
| 1.2.4.3 化学发光和电化学发光法 | 第29-30页 |
| 1.2.4.4 电化学法 | 第30页 |
| 1.2.4.5 质谱法 | 第30-31页 |
| 1.2.5 CE在单细胞分析中的应用 | 第31-34页 |
| 1.2.6 CE单细胞研究文献分析 | 第34-35页 |
| 1.3 微流控芯片应用于单细胞分析研究 | 第35-50页 |
| 1.3.1 芯片上单细胞获取 | 第35-41页 |
| 1.3.1.1 单细胞被动捕获 | 第35-39页 |
| 1.3.1.2 单细胞主动操纵 | 第39-41页 |
| 1.3.2 片上单细胞裂解 | 第41页 |
| 1.3.3 片上单细胞检测 | 第41-45页 |
| 1.3.3.1 芯片流式细胞术 | 第42页 |
| 1.3.3.2 显微镜技术 | 第42页 |
| 1.3.3.3 成像系统 | 第42-43页 |
| 1.3.3.4 光信号 | 第43-44页 |
| 1.3.3.5 电信号 | 第44-45页 |
| 1.3.3.6 质谱检测 | 第45页 |
| 1.3.4 微流控芯片在单细胞分析中的应用 | 第45-49页 |
| 1.3.5 微流控芯片单细胞研究文献分析 | 第49-50页 |
| 1.4 论文选题思想与研究内容 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-81页 |
| 第二章 毛细管电泳-激光诱导荧光检测分析系统的构建、评价及阿霉素分析方法的建立 | 第81-99页 |
| 2.1 引言 | 第81-82页 |
| 2.2 实验部分 | 第82-85页 |
| 2.2.1 化学试剂 | 第82页 |
| 2.2.2 溶液配制 | 第82页 |
| 2.2.3 CE-LIF光学系统的组建 | 第82-84页 |
| 2.2.4 CE-LIF光学系统的调试 | 第84页 |
| 2.2.5 荧光素钠标准品的CE-LIF分析 | 第84-85页 |
| 2.2.6 阿霉素标准品的CE-LIF分析 | 第85页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第85-95页 |
| 2.3.1 CE-LIF光学系统的设计 | 第85-87页 |
| 2.3.2 荧光素钠和阿霉素的荧光光谱与光学元件的选择 | 第87-89页 |
| 2.3.3 CE-LIF分析系统改进 | 第89-90页 |
| 2.3.4 荧光素钠的CE-LIF分析方法检测限 | 第90-91页 |
| 2.3.5 阿霉素的CE-LIF电泳缓冲液优化 | 第91-93页 |
| 2.3.6 毛细管电泳进样体积 | 第93-94页 |
| 2.3.7 阿霉素的CE-LIF分析方法检测限及评价 | 第94-95页 |
| 2.4 结论 | 第95页 |
| 参考文献 | 第95-99页 |
| 第三章 毛细管电泳-激光诱导荧光分析法研究单个K562细胞内阿霉素吸收行为 | 第99-118页 |
| 3.1 引言 | 第99-100页 |
| 3.2 实验部分 | 第100-105页 |
| 3.2.1 化学试剂 | 第100页 |
| 3.2.2 溶液配制 | 第100-101页 |
| 3.2.3 仪器设备 | 第101页 |
| 3.2.4 DOX标准品的CE-LIF检测 | 第101-102页 |
| 3.2.5 细胞培养及活力检测 | 第102页 |
| 3.2.6 细胞的药物处理 | 第102页 |
| 3.2.7 细胞吸收DOX和P-糖蛋白表达的FCM检测 | 第102-103页 |
| 3.2.8 毛细管进样尖端的蚀刻处理 | 第103页 |
| 3.2.9 单个K562细胞吸收DOX的CE-LIF检测 | 第103-105页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第105-115页 |
| 3.3.1 细胞内DOX荧光淬灭的消除 | 第105页 |
| 3.3.2 K562细胞生长特性 | 第105-106页 |
| 3.3.3 单个K562细胞DOX吸收的CE-LIF检测 | 第106-109页 |
| 3.3.4 单个K562细胞吸收药物异质性的变化规律 | 第109-110页 |
| 3.3.5 单个K562细胞吸收药物平均值的变化规律 | 第110-112页 |
| 3.3.6 单个K562细胞DOX吸收的FCM检测 | 第112-114页 |
| 3.3.7 单个K562细胞膜表面P-糖蛋白表达量的FCM检测 | 第114-115页 |
| 3.4 结论 | 第115页 |
| 参考文献 | 第115-118页 |
| 第四章 单细胞分析研究胞间药物吸收差异性与抗癌效果的关系 | 第118-134页 |
| 4.1 引言 | 第118-119页 |
| 4.2 实验部分 | 第119-122页 |
| 4.2.1 化学试剂 | 第119页 |
| 4.2.2 溶液配制 | 第119页 |
| 4.2.3 仪器设备 | 第119-120页 |
| 4.2.4 细胞培养及活力检测 | 第120页 |
| 4.2.5 细胞的药物处理 | 第120-121页 |
| 4.2.6 CE-LIF测定单个细胞内DOX吸收及胞间差异性 | 第121页 |
| 4.2.7 药物抗癌效果的测定 | 第121-122页 |
| 4.2.8 细胞膜表面P-gp表达量的测定 | 第122页 |
| 4.2.9 数据统计处理 | 第122页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第122-131页 |
| 4.3.1 CE-LIF测定不同给药方案下单细胞DOX吸收及胞间差异性 | 第122-124页 |
| 4.3.2 CE-LIF测定不同给药方案下单细胞吸收药物平均值 | 第124-125页 |
| 4.3.3 不同给药方案下DOX杀伤癌细胞效果 | 第125-128页 |
| 4.3.3.1 细胞形态分析 | 第125-126页 |
| 4.3.3.2 MTT测定DOX对癌细胞的抑制率 | 第126-127页 |
| 4.3.3.3 FCM测定DOX对癌细胞的抑制率 | 第127-128页 |
| 4.3.4 不同给药方案下细胞膜表面P-gp的表达情况 | 第128-129页 |
| 4.3.5 细胞吸收药物差异性与抗癌效果的关系 | 第129-130页 |
| 4.3.6 细胞吸收药物产生差异性的可能原因 | 第130-131页 |
| 4.4 结论 | 第131页 |
| 参考文献 | 第131-134页 |
| 第五章 微流控芯片/毛细管电泳-激光诱导荧光检测两用分析系统的构建与评价 | 第134-155页 |
| 5.1 引言 | 第134页 |
| 5.2 实验部分 | 第134-144页 |
| 5.2.1 化学试剂 | 第134-135页 |
| 5.2.2 溶液配制 | 第135页 |
| 5.2.3 分离设备 | 第135页 |
| 5.2.4 MCE/CE-LIF两用分析系统的组建 | 第135-138页 |
| 5.2.5 MCE/CE-LIF分析系统激光入射光路的选择 | 第138页 |
| 5.2.6 MCE/CE-LIF分析系统光学元件的校准 | 第138-140页 |
| 5.2.7 微流控芯片的定位 | 第140-142页 |
| 5.2.8 毛细管的固定 | 第142页 |
| 5.2.9 MCE/CE-LIF分析系统光路的校准 | 第142-144页 |
| 5.2.10 MCE/CE-LIF分析系统上的微流控芯片电泳 | 第144页 |
| 5.2.11 MCE/CE-LIF分析系统上的毛细管电泳 | 第144页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第144-152页 |
| 5.3.1 MCE/CE-LIF分析系统激光入射光路的选择 | 第144-147页 |
| 5.3.1.1 “共聚焦”式光路设计 | 第144-145页 |
| 5.3.1.2 “小角度入射”式光路设计 | 第145-147页 |
| 5.3.2 MCE/CE-LIF分析系统上的毛细管电泳 | 第147-148页 |
| 5.3.3 MCE/CE-LIF分析系统上的微流控芯片电泳 | 第148-152页 |
| 5.3.3.1 样品进样方式优化 | 第148-149页 |
| 5.3.3.2 程序控制电压优化 | 第149-152页 |
| 5.4 结论 | 第152页 |
| 参考文献 | 第152-155页 |
| 第六章 微流控芯片连续测定单个K562细胞内阿霉素吸收及膜P-糖蛋白表达 | 第155-181页 |
| 6.1 引言 | 第155-156页 |
| 6.2 实验部分 | 第156-161页 |
| 6.2.1 化学试剂 | 第156页 |
| 6.2.2 溶液配制 | 第156页 |
| 6.2.3 仪器设备 | 第156-157页 |
| 6.2.4 芯片设计及制作 | 第157-158页 |
| 6.2.5 芯片通道结构的优化 | 第158-160页 |
| 6.2.6 细胞培养及活力检测 | 第160页 |
| 6.2.7 细胞的药物处理 | 第160页 |
| 6.2.8 细胞膜表面P-糖蛋白的标记 | 第160-161页 |
| 6.2.9 微流控芯片上细胞的连续进样及检测 | 第161页 |
| 6.3 结果与讨论 | 第161-178页 |
| 6.3.1 连续单细胞分析芯片的设计思路 | 第161-162页 |
| 6.3.2 层流介导细胞进样 | 第162-163页 |
| 6.3.3 层流混合介导细胞裂解 | 第163-171页 |
| 6.3.3.1 聚焦距离l | 第163-165页 |
| 6.3.3.2 夹流角度α | 第165-166页 |
| 6.3.3.3 夹流对称性 | 第166-167页 |
| 6.3.3.4 通道内微结构 | 第167-171页 |
| 6.3.4 微流控芯片上的单细胞连续进样 | 第171页 |
| 6.3.5 微流控芯片连续测定单个细胞内的药物吸收 | 第171-173页 |
| 6.3.6 微流控芯片连续测定不同给药方案下单个细胞的药物吸收 | 第173-174页 |
| 6.3.7 微流控芯片连续测定单个细胞膜表面P-糖蛋白表达 | 第174-176页 |
| 6.3.8 微流控芯片连续测定不同给药方案下单细胞膜表面P-gp表达 | 第176-178页 |
| 6.4 结论 | 第178页 |
| 参考文献 | 第178-181页 |
| 附录 博士期间发表论文 | 第181-183页 |
| 致谢 | 第183页 |
