| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-25页 |
| 1 红曲霉的研究 | 第14-15页 |
| 1.1 红曲霉 | 第14页 |
| 1.2 红曲霉的发酵技术 | 第14-15页 |
| 2 红曲霉主要代谢产物--红曲色素与桔霉素的研究 | 第15-20页 |
| 2.1 红曲色素的研究 | 第15-19页 |
| 2.2 桔霉素的研究 | 第19-20页 |
| 3 红曲霉的基因功能研究 | 第20-22页 |
| 3.1 红曲色素合成相关基因的研究 | 第20-21页 |
| 3.2 桔霉素合成相关基因的研究 | 第21页 |
| 3.3 其他功能基因的研究 | 第21-22页 |
| 4 红曲霉的遗传转化研究概述 | 第22-23页 |
| 4.1 根癌农杆菌介导的T-DNA转化真菌的技术 | 第22-23页 |
| 4.2 根癌农杆菌介导转化红曲霉的研究 | 第23页 |
| 5 立题背景及主要研究内容 | 第23-25页 |
| 5.1 立题背景 | 第23-24页 |
| 5.2 主要研究内容 | 第24页 |
| 5.3 技术路线 | 第24-25页 |
| 第二章 根癌农杆菌介导的紫色红曲霉高效转化体系的构建 | 第25-37页 |
| 1 材料与仪器 | 第25-27页 |
| 1.1 菌种来源 | 第25-26页 |
| 1.2 主要试剂药品及仪器设备 | 第26页 |
| 1.3 主要培养基 | 第26-27页 |
| 2 实验方法 | 第27-29页 |
| 2.1 根癌农杆菌转化Mp-41菌株的基本步骤 | 第27-28页 |
| 2.2 转化率各影响因素的研究 | 第28-29页 |
| 2.3 转化库的构建 | 第29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-35页 |
| 3.1 Mp-41菌株对潮霉素的敏感性检测 | 第29-30页 |
| 3.2 转化率各种因素的分析 | 第30-35页 |
| 3.3 优化后的高效转化体系和T-DNA插入突变体库的构建 | 第35页 |
| 4 讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 紫色红曲霉转化子的PCR鉴定及遗传稳定性分析 | 第37-43页 |
| 1 材料与仪器 | 第37-38页 |
| 1.1 菌株 | 第37页 |
| 1.2 主要仪器设备及试剂 | 第37-38页 |
| 1.3 培养基 | 第38页 |
| 2 实验方法 | 第38-40页 |
| 2.1 紫色红曲霉转化子的遗传稳定性分析 | 第38页 |
| 2.2 紫色红曲霉转化子潮霉素抗性的PCR鉴定 | 第38-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-41页 |
| 3.1 紫色红曲霉转化子的遗传稳定性分析 | 第40页 |
| 3.2 紫色红曲霉转化子潮霉素抗性的PCR鉴定 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| 第四章 紫色红曲霉转化子的形态观察 | 第43-57页 |
| 1 材料与仪器 | 第43-44页 |
| 1.1 菌株 | 第43页 |
| 1.2 主要试剂及仪器设备 | 第43页 |
| 1.3 主要培养基 | 第43-44页 |
| 2 实验方法 | 第44页 |
| 2.1 转化子的菌落形态观察 | 第44页 |
| 2.2 转化子的显微特征观察 | 第44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-56页 |
| 3.1 紫色红曲霉转化子的菌落形态特征比较 | 第44-50页 |
| 3.2 转化子的显微形态特征比较 | 第50-56页 |
| 4 讨论 | 第56-57页 |
| 第五章 色素转化子的筛选及其产物分析 | 第57-66页 |
| 1 材料与仪器 | 第57-58页 |
| 1.1 菌株 | 第57页 |
| 1.2 主要药品及仪器设备 | 第57页 |
| 1.3 主要培养基 | 第57-58页 |
| 2 实验方法 | 第58-59页 |
| 2.1 转化子的色素产量测定 | 第58页 |
| 2.2 转化子的桔霉素含量分析 | 第58-59页 |
| 3 结果与分析 | 第59-64页 |
| 3.1 紫色红曲霉转化子色素分析 | 第59-64页 |
| 3.2 紫色红曲霉转化子的桔霉素含量分析 | 第64页 |
| 4 讨论 | 第64-66页 |
| 第六章 紫色红曲霉转化子生物合成桔霉素基因-pksCT的扩增以及保守性分析 | 第66-73页 |
| 1 材料与仪器 | 第66-67页 |
| 1.1 菌株 | 第66页 |
| 1.2 主要试剂及仪器设备 | 第66-67页 |
| 1.3 主要培养基 | 第67页 |
| 2 实验方法 | 第67-69页 |
| 2.1 紫色红曲霉转化子基因组DNA的提取 | 第67页 |
| 2.2 pksCT基因部分序列的PCR扩增 | 第67-68页 |
| 2.3 PCR产物连接转化 | 第68页 |
| 2.4 测序及分析 | 第68-69页 |
| 3 结果与分析 | 第69-71页 |
| 3.1 紫色红曲霉转化子基因组DNA的纯度分析 | 第69页 |
| 3.2 转化子菌株中pksCT基因部分序列的PCR扩增结果 | 第69-70页 |
| 3.3 PCR扩增产物测序结果生物信息学分析 | 第70-71页 |
| 4 讨论 | 第71-73页 |
| 第七章 小结与建议 | 第73-75页 |
| 1 小结 | 第73-74页 |
| 2 建议 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-84页 |
| 附录 | 第84-85页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第85-86页 |
| 致谢词 | 第86-87页 |
