| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略词 | 第7-13页 |
| 第1章 引言 | 第13-22页 |
| 1.1 概述 | 第13页 |
| 1.2 TFA及其健康危害 | 第13-20页 |
| 1.2.1 TFA的性质和来源 | 第14页 |
| 1.2.2 TFA与心血管疾病 | 第14-17页 |
| 1.2.3 人脐静脉平滑肌细胞增殖 | 第17-20页 |
| 1.3 课题研究的目的、意义及主要内容 | 第20-22页 |
| 1.3.1 课题来源 | 第20页 |
| 1.3.2 研究目的、意义 | 第20-21页 |
| 1.3.3 研究内容 | 第21-22页 |
| 第2章 TFA对HUVSMC活力的影响 | 第22-31页 |
| 2.1 前言 | 第22页 |
| 2.2 试剂与实验设备 | 第22-23页 |
| 2.2.1 试验材料 | 第22-23页 |
| 2.2.2 设备 | 第23页 |
| 2.3 实验方法 | 第23-25页 |
| 2.3.1 HUVSMC的培养 | 第23-24页 |
| 2.3.2 TFA对HUVSMC活力的影响 | 第24-25页 |
| 2.3.3 统计学分析 | 第25页 |
| 2.4 实验结果 | 第25-29页 |
| 2.4.1 HUVSMC细胞生长曲线 | 第25-26页 |
| 2.4.2 TFA对HUVSMC活力的影响 | 第26-27页 |
| 2.4.3 TFA对HUVSMC凋亡的影响 | 第27-29页 |
| 2.5 讨论 | 第29-31页 |
| 2.5.1 低浓度TFA可促进HUVSMC增殖,高浓度则显现毒性而抑制其生长 | 第29-30页 |
| 2.5.2 9tl2tl8:2对HUVSMC的促増殖作用可能比9tl8:l强 | 第30-31页 |
| 第3章 TFA对HUVSMC细胞周期的影响 | 第31-36页 |
| 3.1 前言 | 第31页 |
| 3.2 试剂与实验设备 | 第31-32页 |
| 3.2.1 试验材料 | 第31-32页 |
| 3.2.2 设备 | 第32页 |
| 3.3 实验方法 | 第32-33页 |
| 3.3.1 HUVSMC细胞周期的测定 | 第32-33页 |
| 3.4 结果 | 第33-34页 |
| 3.4.1 TFA对HUVSMC细胞周期的影响 | 第33-34页 |
| 3.5 讨论 | 第34-36页 |
| 3.5.1 TFA促进平滑肌细胞周期进程 | 第34-35页 |
| 3.5.2 平滑肌细胞增殖与心血管疾病 | 第35-36页 |
| 第4章 TFA对HUVSMC细胞周期相关基因和蛋白表达的影响 | 第36-53页 |
| 4.1 前言 | 第36-37页 |
| 4.2 试剂与实验设备 | 第37-39页 |
| 4.2.1 试验材料 | 第37-38页 |
| 4.2.2 设备 | 第38-39页 |
| 4.3 实验方法 | 第39-44页 |
| 4.3.1 HUVSMC的培养 | 第39页 |
| 4.3.2 细胞总RNA提取 | 第39页 |
| 4.3.3 两步法PCR测定目的基因含量 | 第39-41页 |
| 4.3.4 实时荧光定量PCR测定目的基因含量 | 第41-42页 |
| 4.3.5 细胞总蛋白的提取 | 第42页 |
| 4.3.6 SDS-PAGE | 第42-44页 |
| 4.3.7 实验结果分析 | 第44页 |
| 4.4 结果 | 第44-50页 |
| 4.4.1 TFA对HUVSMC细胞周期相关基因表达的影响 | 第44-49页 |
| 4.4.2 TFA对HUVSMC细胞周期相关蛋白表达的影响 | 第49-50页 |
| 4.5 讨论 | 第50-52页 |
| 4.5.1 反油酸与反亚油酸促进细胞周期进展 | 第50-51页 |
| 4.5.2 反式脂肪酸促进细胞PCNA、CDK2、CyclinE；抑制p21基因和蛋白质的表达 | 第51页 |
| 4.5.3 反式脂肪酸通过促进CDK2和cyclin E表达促进HUVSMC增殖 | 第51页 |
| 4.5.4 反亚油酸对蛋白表达的影响强于反油酸 | 第51-52页 |
| 4.6 小结 | 第52-53页 |
| 第5章 反式脂肪酸对HUVSMC细胞脂肪酸组成的影响 | 第53-58页 |
| 5.1 前言 | 第53页 |
| 5.2 试剂与实验设备 | 第53-54页 |
| 5.2.1 试验材料 | 第53-54页 |
| 5.2.2 设备 | 第54页 |
| 5.3 实验方法 | 第54-55页 |
| 5.3.1 反式脂肪酸作用后的HUVSMC脂肪酸的提取测定 | 第54-55页 |
| 5.4 结果 | 第55-56页 |
| 5.4.1 反式脂肪酸对HUVSMC脂肪酸组成的影响 | 第55-56页 |
| 5.5 讨论 | 第56-58页 |
| 5.5.1 反式脂肪酸使HUVSMC中总不饱和脂肪酸含量减少 | 第56-57页 |
| 5.5.2 反式脂肪酸使HUVSMC中总TFA含量增加 | 第57-58页 |
| 第6章 反式脂肪酸对联合培养条件下内皮细胞功能的影响 | 第58-66页 |
| 6.1 前言 | 第58页 |
| 6.2 试剂与实验设备 | 第58-59页 |
| 6.2.1 试验材料 | 第58-59页 |
| 6.2.2 设备 | 第59页 |
| 6.3 实验方法 | 第59-61页 |
| 6.3.1 内皮和平滑肌细胞联合培养模型的建立 | 第59-60页 |
| 6.3.2 联合培养中内皮细胞粘附因子表达的测定 | 第60-61页 |
| 6.3.3 联合培养条件下内皮细胞形态的测定 | 第61页 |
| 6.4 结果 | 第61-63页 |
| 6.4.1 反式脂肪酸对联合培养内皮粘附因子表达的影响 | 第61-62页 |
| 6.4.2 反式脂肪酸对联合培养内皮形态的影响 | 第62-63页 |
| 6.5 讨论 | 第63-66页 |
| 6.5.1 与单独培养模型相比,联合培养模型可能是研究内皮形态和功能变化更好的模型选择 | 第64页 |
| 6.5.2 反式脂肪酸使联合培养的内皮细胞粘附因子表达增加 | 第64-65页 |
| 6.5.3 内皮功能失调可能引起平滑肌细胞增殖 | 第65-66页 |
| 第7章 结论与展望 | 第66-68页 |
| 7.1 结论 | 第66页 |
| 7.1.1 TFA能促进HUVSMC增殖 | 第66页 |
| 7.1.2 TFA能通过影响周期相关基因和蛋白促进HUVSMC周期进展 | 第66页 |
| 7.1.3 TFA能使联合培养的内皮细胞粘附分子mRNA表达上调 | 第66页 |
| 7.2 进一步工作方向 | 第66-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第77页 |
