摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
目录 | 第8-12页 |
第一部分 文献综述 | 第12-27页 |
1 西瓜炭疽病的研究进展 | 第12-19页 |
1.1 症状与危害 | 第13页 |
1.2 病原菌 | 第13-14页 |
1.3 发病规律 | 第14页 |
1.4 西瓜炭疽病生理小种的分化 | 第14-16页 |
1.5 西瓜炭疽病育种的研究概况 | 第16-17页 |
1.6 西瓜炭疽病抗性遗传研究 | 第17-18页 |
1.7 西瓜炭疽病的防治 | 第18页 |
1.8 品种抗性鉴定方法 | 第18-19页 |
2 分子标记技术的介绍 | 第19-25页 |
2.1 常用的分子标记 | 第20-23页 |
2.2 分子标记技术在西瓜育种的研究概况 | 第23-25页 |
3 本研究的内容和研究目的与意义 | 第25-27页 |
3.1 研究内容 | 第25-26页 |
3.2 本课题研究目的 | 第26页 |
3.3 研究意义 | 第26-27页 |
第二部分 研究内容 | 第27-62页 |
第一章 西瓜抗炭疽病基因连锁标记的群体构建 | 第27-30页 |
1 材料 | 第27-28页 |
2 方法 | 第28页 |
2.1 西瓜苗的准备 | 第28页 |
2.2 F_2代群体的处理 | 第28页 |
2.3 取样 | 第28页 |
3 结果与分析 | 第28-29页 |
3.1 亲本的选择 | 第28页 |
3.2 分子标记的选择 | 第28页 |
3.3 分离群体和大小的选择 | 第28-29页 |
4 讨论 | 第29-30页 |
4.1 作图群体的构建 | 第29页 |
4.2 分子标记的选择 | 第29-30页 |
第二章 西瓜炭疽病抗性鉴定 | 第30-38页 |
1 材料 | 第30-31页 |
1.1 试验材料 | 第30-31页 |
1.2 马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基 | 第31页 |
2 方法 | 第31-32页 |
2.1 病原菌菌液的制备 | 第31页 |
2.2 西瓜苗的准备 | 第31页 |
2.3 接种方法 | 第31页 |
2.4 抗病鉴定和抗性分级标准 | 第31-32页 |
2.5 西瓜炭疽病抗性遗传分析 | 第32页 |
3 结果与分析 | 第32-37页 |
3.1 西瓜苗期抗炭疽病鉴定结果 | 第32-34页 |
3.2 西瓜炭疽病抗性遗传分析 | 第34-37页 |
4 讨论 | 第37-38页 |
第三章 西瓜抗炭疽病相关基因研究的AFLP体系优化 | 第38-50页 |
1 材料 | 第38-39页 |
1.1 实验材料 | 第38页 |
1.2 实验试剂 | 第38-39页 |
1.3 实验仪器 | 第39页 |
2 方法 | 第39-45页 |
2.1 基因组的提取 | 第39页 |
2.2 AFLP反应体系建立 | 第39-43页 |
2.2.1 接头的制备 | 第39-40页 |
2.2.2 基因组DNA的酶切 | 第40-41页 |
2.2.3 连接 | 第41页 |
2.2.4 预扩增反应及产物的稀释 | 第41-42页 |
2.2.5 选择性扩增反应 | 第42-43页 |
2.3 SSR反应体系 | 第43页 |
2.4 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第43-44页 |
2.4.1. 制备聚丙烯酰胺凝胶 | 第43-44页 |
2.4.2 电泳 | 第44页 |
2.5 银染与显色 | 第44-45页 |
2.5.1 染色 | 第44页 |
2.5.2 显色 | 第44-45页 |
3 结果与分析 | 第45-48页 |
3.1 DNA检测 | 第45页 |
3.2 酶切 | 第45-46页 |
3.3 连接 | 第46页 |
3.4 PCR扩增结果 | 第46-47页 |
3.5 最佳反应体系的确定及应用 | 第47-48页 |
4 讨论 | 第48-50页 |
第四章 AFLP、SSR分子标记的连锁分析 | 第50-62页 |
1 材料 | 第50-51页 |
2 方法 | 第51-54页 |
2.1 AFLP引物的筛选 | 第51-52页 |
2.2 SSR引物的筛选 | 第52页 |
2.3 群体F_2单株的PCR扩增 | 第52页 |
2.4 数据统计与连锁分析 | 第52页 |
2.5 聚丙烯酰胺凝胶电泳上回收多态性条带 | 第52-53页 |
2.6 琼脂糖电泳回收DNA片段 | 第53页 |
2.7 目的片段的克隆、转化与测序 | 第53-54页 |
3 结果与分析 | 第54-60页 |
3.1 AFLP引物的筛选及差异条带的获得 | 第54-56页 |
3.2 SSR引物的筛选及差异条带的获得 | 第56-57页 |
3.3 差异性引物组合在F_2群体的单株检测 | 第57-59页 |
3.4 与西瓜炭疽病抗性相关基因的分子标记的遗传距离 | 第59页 |
3.5 差异条带的回收、克隆及测序 | 第59-60页 |
4 讨论 | 第60-62页 |
全文总结 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-68页 |
附录 | 第68-69页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第69-70页 |
致谢 | 第70-71页 |