中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略语 | 第10-12页 |
前言 | 第12-15页 |
研究现状、成果 | 第12-13页 |
研究目的、方法 | 第13-15页 |
对象和方法 | 第15-32页 |
1.1 仪器与试剂 | 第15-17页 |
1.2 实验方法 | 第17-31页 |
1.2.1 感受态大肠杆菌的制备 | 第17-18页 |
1.2.2 目的基因片段的获得 | 第18-20页 |
1.2.3 质粒载体构建 | 第20-23页 |
1.2.4 慢病毒干扰载体的包装和感染 | 第23-25页 |
1.2.5 MC3T3-E1细胞培养 | 第25页 |
1.2.6 重组慢病毒感染MC3T3-E1细胞 | 第25-26页 |
1.2.7 鉴定 | 第26-31页 |
1.3 统计分析 | 第31-32页 |
结果 | 第32-39页 |
2.1 对pELNS双酶切和重组后结果 | 第32-33页 |
2.2 单独转染的成骨效能 | 第33-35页 |
2.2.1 荧光显微镜下观察,重组慢病毒感染MC3T3-E1细胞 | 第33-34页 |
2.2.2 茜素红染色 | 第34页 |
2.2.3 RT-PCR检测Runx2 mRNA表达水平 | 第34-35页 |
2.3 联合转染的成骨效能 | 第35-39页 |
2.3.1 BGP和ALP表达水平 | 第35-36页 |
2.3.2 RT-PCR检测Runx2 mRNA表达水平 | 第36-37页 |
2.3.3 免疫荧光检测BMP-2和BMP-7联合转染MC3T3-E1细胞 | 第37页 |
2.3.4 Western blot检测BMP2和BMP7联合转染BMPs蛋白的表达水平 | 第37-39页 |
讨论 | 第39-45页 |
3.1 成骨分化的BMPs诱导因子 | 第39-41页 |
3.2 病毒载体的选择 | 第41-43页 |
3.3 基因工程技术在骨组织工程中的应用 | 第43-45页 |
结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-54页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第54-55页 |
综述 | 第55-73页 |
综述参考文献 | 第65-73页 |
致谢 | 第73页 |