| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略词 | 第7-10页 |
| 1 引言 | 第10-21页 |
| 1.1 犬细小病毒病的研究进展 | 第10-11页 |
| 1.1.1 犬细小病毒概述 | 第10页 |
| 1.1.2 犬细小病毒病流行病学 | 第10-11页 |
| 1.1.3 犬细小病毒病的防治 | 第11页 |
| 1.2 DNA 疫苗及免疫佐剂 | 第11-13页 |
| 1.2.1 DNA 疫苗的研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2.2 DNA 疫苗佐剂的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.3 IL-2 与 IL-7 研究概述 | 第13-20页 |
| 1.3.1 IL-2 的发现 | 第13页 |
| 1.3.2 IL-2 的结构与特点 | 第13页 |
| 1.3.3 IL-2 的来源及生物学功能 | 第13-14页 |
| 1.3.4 IL-2 的应用 | 第14-16页 |
| 1.3.5 IL-7 的发现与产生 | 第16-17页 |
| 1.3.6 IL-7 的分子结构及其受体 | 第17页 |
| 1.3.7 IL-7 的生物学活性 | 第17-18页 |
| 1.3.8 IL-7 在临床上的应用 | 第18-20页 |
| 1.4 研究目的和意义 | 第20-21页 |
| 2 试验材料与方法 | 第21-40页 |
| 2.1 试验材料 | 第21-26页 |
| 2.1.1 质粒、菌种、毒株和细胞系 | 第21页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第21页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.4 试验所用溶液及其配制 | 第22-25页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第25页 |
| 2.1.6 数据处理与统计分析 | 第25-26页 |
| 2.2 犬 IL-2 与 IL-7 双基因表达载体的构建及其真核表达试验方法 | 第26-36页 |
| 2.2.1 犬 IL-2 和 IL-7 基因的扩增 | 第26-29页 |
| 2.2.2 含犬 IL-2 和 IL-7 双基因表达载体的构建 | 第29-33页 |
| 2.2.3 pcDNA-cIL2/H-IRES-cIL7/H 重组质粒在 HEK293T 细胞中的分泌表达与鉴定 | 第33-36页 |
| 2.3 犬 IL-2 与 IL-7 基因对 CPV VP2 DNA 疫苗的协同免疫增强作用试验方法 | 第36-40页 |
| 2.3.1 注射用 pcDNA-cIL2-IRES-cIL7 质粒的制备 | 第36页 |
| 2.3.2 动物免疫试验 | 第36-37页 |
| 2.3.3 CPV 病毒的扩增 | 第37页 |
| 2.3.4 CPV 病毒滴度的测定 | 第37-38页 |
| 2.3.5 血清抗体滴度检测 | 第38页 |
| 2.3.6 中和抗体试验 | 第38页 |
| 2.3.7 淋巴细胞增殖试验 | 第38-39页 |
| 2.3.8 干扰素-γ（IFN-γ）的测定 | 第39-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-46页 |
| 3.1 犬 IL-2 与 IL-7 双基因表达载体的构建及其真核表达 | 第40-42页 |
| 3.1.1 PCR 法扩增犬 IL-2 与 IL-7 基因 | 第40页 |
| 3.1.2 含犬 IL-2 和 IL-7 双基因表达载体的构建 | 第40-42页 |
| 3.1.3 pcDNA-cIL2/H-IRES-cIL7/H 质粒在 HEK293T 细胞中的表达 | 第42页 |
| 3.2 犬 IL-2 与 IL-7 基因对 CPV VP2 DNA 疫苗的协同免疫增强作用 | 第42-46页 |
| 3.2.1 CPV 病毒滴度测定结果 | 第42页 |
| 3.2.2 免疫小鼠血清抗体水平的检测结果 | 第42-44页 |
| 3.2.3 免疫小鼠血清中和抗体效价测定结果 | 第44页 |
| 3.2.4 免疫小鼠淋巴细胞增殖试验结果 | 第44-45页 |
| 3.2.5 免疫小鼠淋巴细胞干扰素-γ的表达水平 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-49页 |
| 4.1 犬 IL-2 与 IL-7 双基因表达载体的构建及其在 HEK293T 细胞中的表达 | 第46-47页 |
| 4.2 犬 IL-2 与 IL-7 基因对 CPV VP2 DNA 疫苗的协同免疫增强作用 | 第47-49页 |
| 5 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第56-57页 |
| 作者简介 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
