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DDAH2/ADMA通路在高糖诱导内皮祖细胞线粒体功能障碍中的作用及机制

摘要第4-7页
Abstract第7-11页
符号说明第14-15页
1 前言第15-18页
2 材料与方法第18-28页
    2.1 试剂与仪器第18-20页
        2.1.1 主要试剂第18-19页
        2.1.2 主要仪器第19-20页
        2.1.3 动物第20页
    2.2 方法第20-26页
        2.2.1 EPCs分离、培养第20-21页
        2.2.2 EPCs鉴定第21页
        2.2.3 细胞免疫化学第21-22页
        2.2.4 EPCs总RNA提取第22页
        2.2.5 RNA逆转录第22-23页
        2.2.6 实时荧光定量PCR检测VDAC1、DDAH2 mRNA表达第23-24页
        2.2.7 细胞上清ADMA浓度测定第24页
        2.2.8 细胞总蛋白提取第24页
        2.2.9 Western blot检测EPCs的VDAC1蛋白表达第24-25页
        2.2.10 ATP含量检测第25-26页
        2.2.11 线粒体膜电位检测第26页
        2.2.12 活性氧检测第26页
        2.2.13 EPCs凋亡第26页
    2.3 统计学分析第26-28页
3 结果第28-39页
    3.1 EPCs的鉴定第28页
        3.1.1 EPCs的形态学变化第28页
        3.1.2 双荧光染色鉴定EPCs第28页
    3.2 高糖诱导EPCs线粒体功能障碍第28页
    3.3 高糖诱导EPCs凋亡第28-29页
    3.4 高糖抑制EPCs DDAH2基因表达,增加细胞培养液ADMA浓度第29页
    3.5 外源性ADMA诱导EPCs线粒体功能障碍第29页
        3.5.1 ATP含量的变化第29页
        3.5.2 线粒体膜电位的变化第29页
    3.6 外源性ADMA诱导EPCs凋亡第29页
    3.7 高糖或ADMA对EPCs VDAC1表达的影响第29-30页
    3.8 DIDS抑制ADMA诱导EPCs线粒体功能障碍的影响第30页
        3.8.1 ATP含量的变化第30页
        3.8.2 线粒体膜电位的变化第30页
    3.9 DIDS对ADMA诱导EPCs内活性氧的影响第30页
    3.10 DIDS对ADMA诱导EPCs凋亡的影响第30-31页
    附图第31-39页
4 讨论第39-42页
5 结论第42-43页
参考文献第43-48页
综述第48-60页
    参考文献第54-60页
攻读学位期间主要的研究成果第60-61页
致谢第61页

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