摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
符号说明 | 第14-15页 |
1 前言 | 第15-18页 |
2 材料与方法 | 第18-28页 |
2.1 试剂与仪器 | 第18-20页 |
2.1.1 主要试剂 | 第18-19页 |
2.1.2 主要仪器 | 第19-20页 |
2.1.3 动物 | 第20页 |
2.2 方法 | 第20-26页 |
2.2.1 EPCs分离、培养 | 第20-21页 |
2.2.2 EPCs鉴定 | 第21页 |
2.2.3 细胞免疫化学 | 第21-22页 |
2.2.4 EPCs总RNA提取 | 第22页 |
2.2.5 RNA逆转录 | 第22-23页 |
2.2.6 实时荧光定量PCR检测VDAC1、DDAH2 mRNA表达 | 第23-24页 |
2.2.7 细胞上清ADMA浓度测定 | 第24页 |
2.2.8 细胞总蛋白提取 | 第24页 |
2.2.9 Western blot检测EPCs的VDAC1蛋白表达 | 第24-25页 |
2.2.10 ATP含量检测 | 第25-26页 |
2.2.11 线粒体膜电位检测 | 第26页 |
2.2.12 活性氧检测 | 第26页 |
2.2.13 EPCs凋亡 | 第26页 |
2.3 统计学分析 | 第26-28页 |
3 结果 | 第28-39页 |
3.1 EPCs的鉴定 | 第28页 |
3.1.1 EPCs的形态学变化 | 第28页 |
3.1.2 双荧光染色鉴定EPCs | 第28页 |
3.2 高糖诱导EPCs线粒体功能障碍 | 第28页 |
3.3 高糖诱导EPCs凋亡 | 第28-29页 |
3.4 高糖抑制EPCs DDAH2基因表达,增加细胞培养液ADMA浓度 | 第29页 |
3.5 外源性ADMA诱导EPCs线粒体功能障碍 | 第29页 |
3.5.1 ATP含量的变化 | 第29页 |
3.5.2 线粒体膜电位的变化 | 第29页 |
3.6 外源性ADMA诱导EPCs凋亡 | 第29页 |
3.7 高糖或ADMA对EPCs VDAC1表达的影响 | 第29-30页 |
3.8 DIDS抑制ADMA诱导EPCs线粒体功能障碍的影响 | 第30页 |
3.8.1 ATP含量的变化 | 第30页 |
3.8.2 线粒体膜电位的变化 | 第30页 |
3.9 DIDS对ADMA诱导EPCs内活性氧的影响 | 第30页 |
3.10 DIDS对ADMA诱导EPCs凋亡的影响 | 第30-31页 |
附图 | 第31-39页 |
4 讨论 | 第39-42页 |
5 结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-48页 |
综述 | 第48-60页 |
参考文献 | 第54-60页 |
攻读学位期间主要的研究成果 | 第60-61页 |
致谢 | 第61页 |