| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| 1 根瘤菌与豆科植物的生物固氮 | 第11-14页 |
| 1.1 概述 | 第11页 |
| 1.2 生物固氮过程 | 第11-13页 |
| 1.3 田菁根瘤菌Azorhizobium caulinodans ORS571)与毛萼田菁(Sesbania rostrata)的共生固氮 | 第13-14页 |
| 2. ROS与共生固氮 | 第14-17页 |
| 2.1 ROS简介 | 第14页 |
| 2.2 在共生固氮过程中ROS积累 | 第14-15页 |
| 2.3. H_2O_2在共生过程中的作用 | 第15-17页 |
| 3. 过氧化氢酶的概述 | 第17-23页 |
| 3.1 过氧化氢酶的分类 | 第17-19页 |
| 3.2 大肠杆菌中的过氧化氢酶的表达调控 | 第19-20页 |
| 3.3 苜蓿中华根瘤菌中的过氧化氢酶的表达调控 | 第20-23页 |
| 第二章 田菁根瘤菌ROS相关基因katG和oxyR对H_2O_2抗性的研究 | 第23-47页 |
| 第一节 katG和oxyR基因的框内敲除及缺失株的表型分析 | 第23-40页 |
| 1 材料与方法 | 第23-28页 |
| 1.1 菌株与质粒 | 第23-24页 |
| 1.2 培养基与培养条件 | 第24页 |
| 1.3 实验用酶及试剂 | 第24页 |
| 1.4 实验室基本方法 | 第24-28页 |
| 2 结果与分析 | 第28-39页 |
| 2.1 生物信息学方法确定katG和oxyR基因 | 第28-29页 |
| 2.2 katG与oxyR基因的框内敲除 | 第29-34页 |
| 2.3 katG和oxyR回复表达菌株的构建 | 第34-36页 |
| 2.4 测定生长曲线 | 第36-37页 |
| 2.5 抑菌圈实验 | 第37-38页 |
| 2.6 杀菌实验 | 第38-39页 |
| 3 讨论 | 第39-40页 |
| 第二节 OxyR对katG调控作用 | 第40-47页 |
| 1 材料与方法 | 第40-41页 |
| 1.1 菌株与质粒 | 第40页 |
| 1.2 培养基与培养条件 | 第40页 |
| 1.3 实验用酶及试剂 | 第40页 |
| 1.4 实验室基本方法 | 第40页 |
| 1.5 β-半乳糖苷酶活性测定 | 第40-41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-44页 |
| 2.1 katG基因中间片段转录融合表达菌株的构建 | 第41-44页 |
| 2.2 katG基因在菌株WT、ΔoxyR和ΔoxyR(pSRKGm-oxyR)中的表达情况测定。 | 第44页 |
| 3 讨论 | 第44-47页 |
| 第三章 katG、oxyR基因的缺失对共生固氮的影响 | 第47-59页 |
| 第一节 katG、oxyR基因的缺失对结瘤数量和固氮效率的影响 | 第47-52页 |
| 1 材料与方法 | 第47-49页 |
| 1.1 菌株与质粒 | 第47页 |
| 1.2 培养基与培养条件 | 第47-48页 |
| 1.3 实验用酶及试剂 | 第48页 |
| 1.4 实验室基本方法 | 第48页 |
| 1.5 β-半乳糖苷酶活性测定 | 第48页 |
| 1.6 田菁种子的催芽 | 第48页 |
| 1.7 茎瘤结瘤实验 | 第48-49页 |
| 1.8 固氮酶活性测定 | 第49页 |
| 2 结果和分析 | 第49-51页 |
| 2.1 katG和oxyR基因的缺失对于茎瘤形态的影响 | 第49-50页 |
| 2.2 katG和oxyR基因的缺失对于结瘤数量和固氮能力的影响 | 第50-51页 |
| 3 讨论 | 第51-52页 |
| 第二节 katG和oxyR基因的缺失对nifA和nodA表达的影响 | 第52-59页 |
| 1 材料与方法 | 第52页 |
| 1.1 菌株与质粒 | 第52页 |
| 1.2 培养基与培养条件 | 第52页 |
| 1.3 实验用酶及试剂 | 第52页 |
| 1.4 实验室基本方法 | 第52页 |
| 1.5 β-半乳糖苷酶活性测定 | 第52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-58页 |
| 2.1 nodA和nifA基因翻译融合表达菌株的构建 | 第53-56页 |
| 2.2 nodA在菌株WT、ΔoxyR和ΔkatG中的表达情况测定 | 第56-57页 |
| 2.3 nifA在菌株WT、ΔoxyR和ΔkatG中的表达情况测定 | 第57-58页 |
| 3. 讨论 | 第58-59页 |
| 全文总结 | 第59-61页 |
| 创新点 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-73页 |
| 附录一 本文中所用的试剂和配方 | 第73-75页 |
| 附录二 攻读硕士期间发表的论文 | 第75-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
