摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
缩略表 | 第17-18页 |
第一章 绪论 | 第18-25页 |
1.1 HPV病毒与宫颈癌 | 第18-19页 |
1.2 E6基因 | 第19-21页 |
1.3 p53基因 | 第21-22页 |
1.4 WEE1激酶 | 第22-24页 |
1.5 研究目的和意义 | 第24-25页 |
第二章 实验材料与方法 | 第25-49页 |
2.1 实验材料 | 第25-32页 |
2.1.1 研究材料 | 第25页 |
2.1.2 主要仪器 | 第25-26页 |
2.1.3 所用试剂和耗材 | 第26-27页 |
2.1.4 相关溶液 | 第27-30页 |
2.1.5 菌株和载体 | 第30-32页 |
2.2 实验方法 | 第32-49页 |
2.2.1 细胞培养 | 第32页 |
2.2.2 WEE1异构体mRNA水平检测 | 第32-33页 |
2.2.3 细胞H_2O_2半致死量和时间点的检测 | 第33-35页 |
2.2.4 重组质粒构建 | 第35-45页 |
2.2.5 上下调基因 | 第45-49页 |
第三章 结果与分析 | 第49-79页 |
3.1 用浓度梯度的H_2O_2处理细胞,4种WEE1异构体的mRNA水平检测 | 第49-50页 |
3.2 H_2O_2半致死量浓度检测 | 第50-53页 |
3.3 实时PCR WEE1异构体的标准曲线检测 | 第53-55页 |
3.4 半致死量浓度处理细胞不同时间点检测4种WEE1异构体的mRNA水平 | 第55-60页 |
3.5 上下调各基因结果 | 第60-79页 |
3.5.1 基因克隆 | 第60-61页 |
3.5.2 酶切 | 第61-62页 |
3.5.3 重组质粒的PCR验证和测序鉴定结果 | 第62-69页 |
3.5.4 质粒转染293细胞制备慢病毒用于基因表达的上下调节 | 第69-71页 |
3.5.5 基因上下调后的蛋白表达水平检测 | 第71-74页 |
3.5.6 半致死量浓度H_2O_2处理上下调基因细胞检测WEE1异构体mRNA表达水平 | 第74-79页 |
第四章 小结 | 第79-81页 |
第五章 讨论 | 第81-83页 |
第六章 论文综述 | 第83-89页 |
致谢 | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-95页 |
附录A 攻读硕士期间发表论文 | 第95-96页 |
附录B 其他需要说明的内容 | 第96页 |