摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-11页 |
1 引言 | 第11-19页 |
·血浆脂蛋白概述 | 第11-13页 |
·血浆脂蛋白的组成及功能 | 第11-12页 |
·LDL及其与动脉粥样硬化的关系 | 第12-13页 |
·LDL分离技术 | 第13-15页 |
·超速离心 | 第13-14页 |
·化学沉淀 | 第14-15页 |
·凝胶过滤层析 | 第15页 |
·亲和色谱层析 | 第15页 |
·临床上使用的LDL去除技术 | 第15-18页 |
·硫酸右旋糖酐纤维素吸附 | 第16页 |
·体外免疫吸附 | 第16页 |
·肝素诱导LDL体外沉淀 | 第16-17页 |
·LDL血液灌流 | 第17页 |
·国内LDL吸附材料研究进展 | 第17-18页 |
·A群链球菌与胶原样蛋白 | 第18页 |
·立题依据及研究内容 | 第18-19页 |
2 试验材料与方法 | 第19-32页 |
·试验材料 | 第19-21页 |
·主要仪器设备 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19-21页 |
·质粒和菌株 | 第21页 |
·引物 | 第21页 |
·试验方法 | 第21-32页 |
·基因克隆 | 第21-27页 |
·基因扩增 | 第21-22页 |
·PCR产物的纯化 | 第22-23页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第23页 |
·核酸定量 | 第23页 |
·PCR产物及pASK-IBA2载体的酶切 | 第23-24页 |
·酶切产物的切胶回收 | 第24页 |
·连接 | 第24-25页 |
·质粒或连接产物转化感受态大肠杆菌 | 第25页 |
·感受态大肠杆菌的制备 | 第25-26页 |
·菌落PCR鉴定阳性克隆 | 第26页 |
·质粒提取 | 第26-27页 |
·重组蛋白的诱导表达及纯化 | 第27-28页 |
·重组蛋白的诱导表达 | 第27页 |
·重组蛋白的纯化 | 第27-28页 |
·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第28页 |
·蛋白质含量测定 | 第28页 |
·rScl1、rScl1L及rScl1T与人LDL结合实验 | 第28-30页 |
·亲和色谱层析实验 | 第28-29页 |
·Western blot | 第29-30页 |
·rScl1、rScl1T与NHS-activated sepharose偶联 | 第30页 |
·偶联后的rScl1-sepharose和rScl1T-sepharose与人血浆的吸附实验 | 第30-31页 |
·rScl1T-sepharose与人血清的吸附试验 | 第31页 |
·血清总胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇检测方法 | 第31-32页 |
·总胆固醇的检测 | 第31-32页 |
·低密度脂蛋白胆固醇的检测 | 第32页 |
3 试验结果与分析 | 第32-43页 |
·基因克隆 | 第32-36页 |
·pASK-IBA2-Scl1载体的构建 | 第32-33页 |
·pASK-IBA2-Scl1L载体的构建 | 第33-35页 |
·pASK-IBA2-Scl1T载体的构建 | 第35-36页 |
·重组蛋白的诱导表达和纯化 | 第36-38页 |
·rScl1 | 第36-37页 |
·rScl1L | 第37-38页 |
·rScl1T | 第38页 |
·rScl1、rScl1L和rScl1T与LDL的相互作用 | 第38-39页 |
·rScl1、rScl1T与NHS-activated sepharose偶联 | 第39-40页 |
·rScl1-sepharose和rScl1T-sepharose与人血浆的吸附实验 | 第40-41页 |
·rScl1T-sepharose与人血清的吸附试验 | 第41-43页 |
4 讨论 | 第43-44页 |
5 结论 | 第44-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-53页 |
作者简介 | 第53页 |