| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 1 研究背景 | 第11-21页 |
| 1.1 石油烃污染现状、危害及其生物处理的优越性 | 第11-14页 |
| 1.1.1 环境中石油烃的污染及其危害 | 第11-12页 |
| 1.1.2 烃类结构特点对其可生化性的影响分析 | 第12页 |
| 1.1.3 微生物修复烃污染环境的优越性 | 第12-14页 |
| 1.2 石油烃生物降解研究进展 | 第14-18页 |
| 1.2.1 石油烃降解菌及其分离与筛选 | 第14-16页 |
| 1.2.2 石油烃降解菌代谢特征研究进展 | 第16-18页 |
| 1.3 石油烃代谢菌的烃降解酶研究进展 | 第18-19页 |
| 1.3.1 启动烷烃氧化的羟化酶（alkB）基因及其酶的表达研究现状 | 第18-19页 |
| 1.3.2 P450细胞色素酶 | 第19页 |
| 1.3.3 AlmA长链烷烃羟化酶 | 第19页 |
| 1.4 铜绿假单胞菌NY3降解烃类的研究现状 | 第19-20页 |
| 1.4.1 铜绿假单胞菌降解石油烃的优势 | 第19-20页 |
| 1.4.2 铜绿假单胞菌的alkB烷氧化酶基因研究进展 | 第20页 |
| 1.5 本文研究的内容与意义 | 第20-21页 |
| 1.5.1 本论文研究的意义 | 第20页 |
| 1.5.2 本论文研究的内容 | 第20-21页 |
| 2 铜绿假单胞菌NY3羟化酶基因突变菌株构建 | 第21-33页 |
| 2.1 NY3菌烷羟化酶基因突变菌株构建技术路线 | 第21-22页 |
| 2.2 实验材料 | 第22-23页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第22-23页 |
| 2.2.2 实验试剂及仪器 | 第23页 |
| 2.3 实验方法 | 第23-26页 |
| 2.3.1 PCR扩增Pseudomonas aeruginosa NY3的alkB1、alkB2基因 | 第23-24页 |
| 2.3.2 alkB1单突变株的构建 | 第24-25页 |
| 2.3.3 alkB2突变株的构建 | 第25页 |
| 2.3.4 alkB1、alk B2双突变株的构建 | 第25-26页 |
| 2.3.5 突变菌株的培养验证 | 第26页 |
| 2.4 实验结果 | 第26-31页 |
| 2.4.1 PCR扩增的alkB1和alkB2基因电泳结果 | 第26-27页 |
| 2.4.2 alkB1单突变株的构建结果 | 第27-28页 |
| 2.4.3 alkB2突变体的构建结果 | 第28-29页 |
| 2.4.4 alkB1、alkB2双突变菌株的构建结果 | 第29-30页 |
| 2.4.5 NB1D、NB2D、NB12DD菌株的验证 | 第30-31页 |
| 2.5 小结 | 第31-33页 |
| 3 alkB基因在铜绿假单胞菌烷烃降解过程中的作用研究 | 第33-48页 |
| 3.1 材料与方法 | 第33-35页 |
| 3.1.1 菌株来源 | 第33页 |
| 3.1.2 培养基及营养溶液 | 第33-34页 |
| 3.1.3 实验药品及实验仪器 | 第34-35页 |
| 3.2 实验方法 | 第35-37页 |
| 3.2.1 种子液的制备 | 第35页 |
| 3.2.2 NY3菌及其基因突变株以单一烷烃为碳源生长实验 | 第35-36页 |
| 3.2.3 NY3菌及其基因突变株降解原油的实验 | 第36页 |
| 3.2.4 分析方法 | 第36-37页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第37-46页 |
| 3.3.1 NY3菌及其基因突变株代谢十六烷的特性 | 第37-39页 |
| 3.3.2 NY3菌及其基因突变株代谢二十四烷的特性 | 第39-41页 |
| 3.3.3 NY3菌及其基因突变株以其它单一烃类为碳源的生长特性。 | 第41-42页 |
| 3.3.4 NY3菌及其基因突变株对组成复杂的原油的降解特性 | 第42-46页 |
| 3.4 小结 | 第46-48页 |
| 4 野生菌NY3及其羟化酶突变株对菲的降解特性 | 第48-61页 |
| 4.1 实验材料及方法 | 第48-50页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第48-49页 |
| 4.1.2 野生菌NY3及其alkB单、双基因突变株对菲降解率实验 | 第49-50页 |
| 4.1.3 野生菌NY3及其alkB单、双基因突变株降解菲的中间产物提取 | 第50页 |
| 4.1.4 分析方法 | 第50页 |
| 4.2 结果讨论 | 第50-59页 |
| 4.2.1 野生菌NY3及其alkB单、双基因突变株对菲降解转化效率 | 第50-51页 |
| 4.2.2 野生菌NY3及其alkB单、双基因突变株降解菲的中间产物结果分析 | 第51-54页 |
| 4.2.3 铜绿假单胞菌NY3及其突变株降解菲典型中间产物解析 | 第54-59页 |
| 4.3 小结 | 第59-61页 |
| 5 结论与展望 | 第61-63页 |
| 5.1 结论 | 第61-62页 |
| 5.2 建议 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第71页 |
