| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 缩略语表 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| 1.1 鲤疱疹病毒2型（CyHV-2） | 第11-14页 |
| 1.1.1 CyHV-2 生物学特征 | 第11页 |
| 1.1.2 CyHV-2 流行特点及传播途径 | 第11-12页 |
| 1.1.3 国内外流行情况 | 第12页 |
| 1.1.4 临床特征及病理特征 | 第12-13页 |
| 1.1.5 CyHV-2 的检测方法 | 第13-14页 |
| 1.2 微滴式数字PCR | 第14-16页 |
| 1.2.1 微滴式数字PCR的工作原理 | 第14-15页 |
| 1.2.2 微滴式数字PCR的定量分析方法 | 第15-16页 |
| 1.2.3 微滴式数字PCR的应用研究 | 第16页 |
| 1.3 噬菌体展示技术概述 | 第16-19页 |
| 1.3.1 噬菌体抗体库技术的概念 | 第16-17页 |
| 1.3.2 噬菌体抗体库技术 | 第17页 |
| 1.3.3 噬菌体抗体库表达载体系统 | 第17页 |
| 1.3.4 噬菌体抗体库的分类 | 第17-18页 |
| 1.3.5 噬菌体抗体库的优点 | 第18-19页 |
| 1.3.6 噬菌体抗体库的淘选方法 | 第19页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第19-21页 |
| 第二章 CyHV-2 微滴式数字PCR方法的建立 | 第21-32页 |
| 2.1 材料和方法 | 第21-24页 |
| 2.1.1 毒株 | 第21页 |
| 2.1.2 主要试剂和实验仪器 | 第21-22页 |
| 2.1.3 DNA的提取 | 第22页 |
| 2.1.4 标准质粒的制备与稀释 | 第22页 |
| 2.1.5 ddPCR和RT-qPCR的引物和探针 | 第22页 |
| 2.1.6 RT-qPCR的反应体系和反应条件 | 第22-23页 |
| 2.1.7 ddPCR的反应体系及条件优化 | 第23页 |
| 2.1.8 重复性分析 | 第23页 |
| 2.1.9 特异性分析 | 第23页 |
| 2.1.10 初步应用 | 第23-24页 |
| 2.2 结果与分析 | 第24-30页 |
| 2.2.1 RT-qPCR标准曲线的建立 | 第24页 |
| 2.2.2 ddPCR检测结果 | 第24-26页 |
| 2.2.3 ddPCR反应条件优化筛选结果 | 第26-27页 |
| 2.2.4 ddPCR与RT-qPCR灵敏性及线性关系 | 第27-28页 |
| 2.2.5 ddPCR与RT-qPCR的重复性检测结果 | 第28-29页 |
| 2.2.6 ddPCR与RT-qPCR的特异性检测结果 | 第29-30页 |
| 2.2.7 ddPCR和RT-qPCR对临床样品的检测结果 | 第30页 |
| 2.3 讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 抗CyHV-2 噬菌体单链抗体淘选及鉴定 | 第32-47页 |
| 3.1 材料与方法 | 第32-39页 |
| 3.1.1 主要实验材料 | 第32页 |
| 3.1.2 主要试剂和溶液配制 | 第32-34页 |
| 3.1.3 噬菌体展示文库的扩增 | 第34页 |
| 3.1.4 噬菌体展示文库的拯救 | 第34页 |
| 3.1.5 淘选抗CyHV-2 的单链抗体 | 第34-35页 |
| 3.1.6 鉴定阳性克隆 | 第35-36页 |
| 3.1.7 测定阳性克隆序列 | 第36页 |
| 3.1.8 可溶性单链抗体的诱导表达 | 第36页 |
| 3.1.9 测定可溶性单链抗体的分子量 | 第36页 |
| 3.1.10 可溶性单链抗体与CyHV-2 和变性CyHV-2 的结合特性分析 | 第36-37页 |
| 3.1.11 可溶性单链抗体的特异性分析 | 第37页 |
| 3.1.12 亲和力常数测定 | 第37页 |
| 3.1.13 免疫组化技术使用抗体P1A5和P3A5检测CyHV-2 在异育银鲫体内的分布 | 第37-39页 |
| 3.2 结果与分析 | 第39-45页 |
| 3.2.1 抗CyHV-2 单链抗体库的淘选结果 | 第39页 |
| 3.2.2 阳性克隆的鉴定结果 | 第39-41页 |
| 3.2.3 阳性克隆序列的测定结果 | 第41-42页 |
| 3.2.4 可溶性单链抗体分子量的测定结果 | 第42-43页 |
| 3.2.5 可溶性单链抗体的结合特性分析结果 | 第43-44页 |
| 3.2.6 特异性及亲和力常数的测定结果 | 第44页 |
| 3.2.7 抗体P1A5和P3A5测定CyHV-2 在异育银鲫肝和鳃组织中的分布结果 | 第44-45页 |
| 3.3 讨论 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-54页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
