| 摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第11-18页 |
| 1.1 研究的目的与意义 | 第11页 |
| 1.2 文献综述 | 第11-16页 |
| 1.2.1 烟草病毒病的危害 | 第11-12页 |
| 1.2.2 烟草抗病毒病的转基因研究进展 | 第12-13页 |
| 1.2.3 BT类基因的研究进展 | 第13-16页 |
| 1.3 本研究的主要内容 | 第16-18页 |
| 1.3.1 研究内容 | 第16-17页 |
| 1.3.2 技术路线 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-21页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第18页 |
| 2.1.2 植物与病毒材料 | 第18页 |
| 2.1.3 培养基 | 第18-19页 |
| 2.1.4 引物序列 | 第19页 |
| 2.1.5 仪器设备 | 第19-20页 |
| 2.1.6 实验试剂 | 第20-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-28页 |
| 2.2.1 植物表达载体构建方法 | 第21-22页 |
| 2.2.2 遗传转化方法 | 第22页 |
| 2.2.3 抗性植株的分子生物学检测方法 | 第22-26页 |
| 2.2.4 抗性植株的病毒病检测方法 | 第26-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-40页 |
| 3.1 目的基因的获得 | 第28-29页 |
| 3.2 目的基因的表达特性分析 | 第29-30页 |
| 3.3 植物表达载体的构建 | 第30-32页 |
| 3.3.1 NtBT1基因植物表达载体的构建 | 第30-32页 |
| 3.3.2 重组质粒导入根癌农杆菌 | 第32页 |
| 3.4 NtBT1基因对烟草的遗传转化及植株再生 | 第32-33页 |
| 3.5 抗性植株的分子生物学检测 | 第33-37页 |
| 3.5.1 PCR检测 | 第33-35页 |
| 3.5.2 RT-PCR检测 | 第35-36页 |
| 3.5.3 转基因植株的Southern印迹杂交检测 | 第36-37页 |
| 3.6 T1代转基因植株的筛选及遗传稳定性检测 | 第37-39页 |
| 3.6.1 T1代转基因种子筛选 | 第37-38页 |
| 3.6.2 转基因植株T1代PCR检测 | 第38-39页 |
| 3.7 转基因植株抗病毒检测 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-42页 |
| 5 结论 | 第42-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-47页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第47页 |