| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 主要英文缩写 | 第7-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-21页 |
| 1.1 埃博拉病毒概况 | 第11-16页 |
| 1.1.1 EBVO病原学特征 | 第11-13页 |
| 1.1.2 EBVO流行病学特征 | 第13-15页 |
| 1.1.3 EBVO诊断方法和治疗 | 第15-16页 |
| 1.2 真核表达进展 | 第16-18页 |
| 1.2.1 瞬时转染 | 第16-17页 |
| 1.2.2 建立稳定转染细胞系 | 第17-18页 |
| 1.3 单克隆抗体研究进展 | 第18页 |
| 1.4 课题研究背景及内容 | 第18-21页 |
| 第2章 GP抗原的制备及免疫原性鉴定 | 第21-33页 |
| 2.1 引言 | 第21页 |
| 2.2 实验材料 | 第21-23页 |
| 2.2.1 细胞、质粒 | 第21页 |
| 2.2.2 主要材料 | 第21-22页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第22页 |
| 2.2.4 实验试剂配制 | 第22-23页 |
| 2.3 实验方法 | 第23-29页 |
| 2.3.1 GP抗原真核表达质粒的构建 | 第23-26页 |
| 2.3.2 GP抗原重组蛋白质粒的扩增 | 第26-27页 |
| 2.3.3 GP重组蛋白真核表达及鉴定 | 第27-28页 |
| 2.3.4 GP重组蛋白抗原性鉴定 | 第28页 |
| 2.3.5 GP重组蛋白免疫原性鉴定 | 第28-29页 |
| 2.4 实验结果及讨论 | 第29-32页 |
| 2.4.1 GP抗原真核表达鉴定结果 | 第29-30页 |
| 2.4.2 表达GP抗原性鉴定结果 | 第30页 |
| 2.4.3 表达GP蛋白免疫原性鉴定结果 | 第30-31页 |
| 2.4.4 结果讨论 | 第31-32页 |
| 2.5 本章小结 | 第32-33页 |
| 第3章 埃博拉病毒重组膜蛋白GP-Fc瞬时转染条件优化 | 第33-43页 |
| 3.1 引言 | 第33页 |
| 3.2 研究技术路线 | 第33页 |
| 3.3 实验材料 | 第33-35页 |
| 3.3.1 细胞、质粒 | 第33-34页 |
| 3.3.2 主要材料 | 第34页 |
| 3.3.3 主要仪器设备 | 第34-35页 |
| 3.4 实验方法 | 第35-37页 |
| 3.4.1 Fc试纸条标准曲线制定 | 第35页 |
| 3.4.2 瞬时转染表达条件优化 | 第35-37页 |
| 3.4.3 蛋白检测方法 | 第37页 |
| 3.4.4 最佳条件转染验证 | 第37页 |
| 3.5 实验结果及讨论 | 第37-42页 |
| 3.5.1 细胞转染密度与GP蛋白表达量关系的研究结果 | 第37-38页 |
| 3.5.2 PEI浓度及转染时间与GP蛋白表达量关系的研究结果 | 第38页 |
| 3.5.3 TPA和VPA浓度与GP蛋白表达量关系的研究结果 | 第38-39页 |
| 3.5.4 质粒和PEI比例与GP蛋白表达量关系的研究结果 | 第39页 |
| 3.5.5 综合验证结果 | 第39-41页 |
| 3.5.6 结果讨论 | 第41-42页 |
| 3.6 本章小结 | 第42-43页 |
| 第4章 GP蛋白单克隆抗体的筛选及鉴定 | 第43-59页 |
| 4.1 引言 | 第43页 |
| 4.2 研究技术路线 | 第43页 |
| 4.3 实验材料 | 第43-45页 |
| 4.3.1 小鼠、病毒株、细胞株 | 第43-44页 |
| 4.3.2 主要材料 | 第44-45页 |
| 4.4 实验方法 | 第45-50页 |
| 4.4.1 SP2/0 细胞的筛选及培养 | 第45页 |
| 4.4.2 细胞融合 | 第45-47页 |
| 4.4.3 融合细胞筛选 | 第47页 |
| 4.4.4 小鼠腹水制备及纯化 | 第47-48页 |
| 4.4.5 小鼠单克隆抗体电泳及WB检测 | 第48-49页 |
| 4.4.6 小鼠单克隆抗体EC50检测 | 第49页 |
| 4.4.7 小鼠单克隆抗体分型实验 | 第49-50页 |
| 4.4.8 小鼠单克隆抗体中和实验检测 | 第50页 |
| 4.5 实验结果及讨论 | 第50-57页 |
| 4.5.1 三轮ELISA筛选结果 | 第50-53页 |
| 4.5.2 电泳及WB检测结果 | 第53-54页 |
| 4.5.3 抗体EC50检测结果 | 第54-55页 |
| 4.5.4 抗体分型结果 | 第55-56页 |
| 4.5.5 抗体中和实验结果 | 第56页 |
| 4.5.6 结果讨论 | 第56-57页 |
| 4.6 本章小结 | 第57-59页 |
| 结论与展望 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-65页 |
| 附录A 4株抗体测序结果 | 第65-67页 |
| 攻读硕士学位期间所取得的学术论文 | 第67-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
