| 摘要 | 第14-16页 |
| ABSTRACT | 第16-18页 |
| 符号说明 | 第19-20页 |
| 第一章 前言 | 第20-38页 |
| 1. 糖胺聚糖概述 | 第20-23页 |
| 1.1 硫酸软骨素(CS)和硫酸皮肤素(DS) | 第21-22页 |
| 1.2 肝素(HP)和硫酸乙酰肝素(HS) | 第22页 |
| 1.3 透明质酸(HA) | 第22页 |
| 1.4 硫酸角质素(KS) | 第22-23页 |
| 2. CS研究现状 | 第23-36页 |
| 2.1 CS的来源及结构 | 第23-25页 |
| 2.2 CS的生物合成 | 第25-26页 |
| 2.3 CS的性质 | 第26-27页 |
| 2.3.1 CS的物理性质 | 第26-27页 |
| 2.3.2 CS的化学性质 | 第27页 |
| 2.4 CS的抗肿瘤研究 | 第27-31页 |
| 2.4.1 癌症—人类健康的最大威胁 | 第27-28页 |
| 2.4.2 CS/DS-PGs参与肿瘤发生过程 | 第28-29页 |
| 2.4.3 富含E unit的CS在肿瘤发生过程中的重要作用 | 第29页 |
| 2.4.4 CS/DS在肿瘤转移过程的重要作用 | 第29-30页 |
| 2.4.5 CS/DS的抗肿瘤活性和应用 | 第30-31页 |
| 2.5 CS的其它生物活性和应用 | 第31-33页 |
| 2.5.1 CS的抗炎活性和应用 | 第32页 |
| 2.5.2 CS的抗凝血、抗血栓活性和应用 | 第32页 |
| 2.5.3 CS在软骨的润滑、保护、再生中的活性及应用 | 第32-33页 |
| 2.5.4 CS在抑制粘附中的活性和应用 | 第33页 |
| 2.5.5 CS在神经元的保护和修复中的活性和应用 | 第33页 |
| 2.5.6 CS在增强免疫中的活性和应用 | 第33页 |
| 2.6 CS的提取和纯化 | 第33-36页 |
| 2.6.1 CS的提取 | 第33-35页 |
| 2.6.2 CS的纯化 | 第35-36页 |
| 2.7 获得低分子量CS方法 | 第36页 |
| 3. 本课题需要解决的问题及意义 | 第36-38页 |
| 第二章 NER-CS多糖的分离、纯化、质量检测 | 第38-54页 |
| 1. 材料仪器 | 第38页 |
| 1.1 材料 | 第38页 |
| 1.2 仪器 | 第38页 |
| 2. 实验方法 | 第38-45页 |
| 2.1 CS多糖的分离 | 第38-40页 |
| 2.1.1 鱿鱼软骨的预处理 | 第38页 |
| 2.1.2 胃蛋白酶和木瓜蛋白酶降解提取 | 第38-39页 |
| 2.1.3 碱性蛋白酶和胰蛋白酶降解提取 | 第39页 |
| 2.1.4 链霉蛋白酶E降解提取 | 第39页 |
| 2.1.5 曲霉菌蛋白酶降解提取 | 第39页 |
| 2.1.6 碱、酶联合提取 | 第39-40页 |
| 2.1.7 多糖样品的超滤脱盐 | 第40页 |
| 2.1.8 NER-CS的糖含量测定 | 第40页 |
| 2.2 NER-CS的提取方法的优选 | 第40-41页 |
| 2.3 NER-CS的的纯化 | 第41-42页 |
| 2.4 NER-CS的质量检测 | 第42-45页 |
| 2.4.1 NER-CS中其它种类糖胺聚糖的检测 | 第42页 |
| 2.4.2 NER-CS的分子量分析 | 第42-43页 |
| 2.4.3 NER-CS的蛋白含量分析 | 第43-44页 |
| 2.4.4 NER-CS的纯度分析 | 第44页 |
| 2.4.5 NER-CS的双硫酸化二糖含量分析 | 第44页 |
| 2.4.6 NER-CS的二糖组成分析 | 第44-45页 |
| 3. 实验结果分析 | 第45-52页 |
| 3.1 CS多糖的提取 | 第45-47页 |
| 3.1.1 软骨组织预处理结果 | 第45页 |
| 3.1.2 不同酶解方法提取CS粗品得率结果 | 第45-46页 |
| 3.1.3 不同提取方法对所制备CS样品中双硫酸化二糖含量的影响 | 第46-47页 |
| 3.2 纯化NER-CS多糖 | 第47-49页 |
| 3.3 NER-CS多糖质量分析 | 第49-52页 |
| 3.3.1 NER-CS中其它种类糖胺聚糖的检测 | 第49页 |
| 3.3.2 NER-CS的分子量 | 第49-50页 |
| 3.3.3 CS纯度分析 | 第50-51页 |
| 3.3.4 CS多糖二糖组成分析 | 第51-52页 |
| 4. 讨论 | 第52-53页 |
| 5. 本章小结 | 第53-54页 |
| 第三章 NER-CS多糖的生物活性分析 | 第54-68页 |
| 1. 实验材料 | 第54页 |
| 1.1 试剂 | 第54页 |
| 1.2 仪器 | 第54页 |
| 2. 方法 | 第54-60页 |
| 2.1 抗凝血活性分析 | 第54-57页 |
| 2.1.1 抗FⅡa活性分析 | 第54-55页 |
| 2.1.2 抗FⅩa因子分析 | 第55-57页 |
| 2.2 抗肿瘤活性分析 | 第57-59页 |
| 2.2.1 肿瘤细胞培养 | 第57页 |
| 2.2.2 NER-CS多糖抗肿瘤转移实验 | 第57页 |
| 2.2.3 小鼠肺部组织石蜡切片制备 | 第57-59页 |
| 2.3 NER-CS多糖与蛋白的相互作用 | 第59-60页 |
| 2.3.1 NER-CS多糖生物素化 | 第59页 |
| 2.3.2 SA芯片的制备 | 第59-60页 |
| 2.3.3 NER-CS多糖与各种蛋白的相互作用分析 | 第60页 |
| 3. 实验结果 | 第60-66页 |
| 3.1 NER-CS多糖抗凝血活性分析 | 第60-63页 |
| 3.1.1 抗FⅡa活性 | 第60-61页 |
| 3.1.2 抗FⅩa活性 | 第61-63页 |
| 3.2 抗肿瘤活性 | 第63-65页 |
| 3.2.1 NER-CS的抗肿瘤肺转移活性 | 第63-64页 |
| 3.2.2 小鼠肺部肿瘤组织和正常组织形态差异 | 第64-65页 |
| 3.3 NER-CS与各种蛋白的相互作用 | 第65-66页 |
| 4. 讨论 | 第66-67页 |
| 5. 本章小结 | 第67-68页 |
| 第四章 NER-CS寡糖的制备及其抗肿瘤研究 | 第68-76页 |
| 1. 实验材料 | 第68页 |
| 1.1 试剂 | 第68页 |
| 1.2 仪器 | 第68页 |
| 2. 方法 | 第68-69页 |
| 2.1. NER-CS寡糖的制备和分析 | 第68-69页 |
| 2.1.1 降解条件优化 | 第68-69页 |
| 2.1.2 寡糖的分离制备 | 第69页 |
| 2.1.3 寡糖聚合度确定 | 第69页 |
| 2.1.4 寡糖二糖组成分析 | 第69页 |
| 2.2 寡糖的抗肿瘤活性分析 | 第69页 |
| 3. 实验结果和分析 | 第69-73页 |
| 3.1 制备不同聚合度寡糖 | 第69-73页 |
| 3.1.1 优化降解条件 | 第69-70页 |
| 3.1.2 NER-CS寡糖分离制备 | 第70-71页 |
| 3.1.3 寡糖聚合度、二糖组成分析 | 第71-73页 |
| 3.2 NER-CS寡糖的抗肿瘤活性 | 第73页 |
| 4. 讨论 | 第73-74页 |
| 5. 本章小结 | 第74-76页 |
| 全文总结 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-86页 |
| 致谢 | 第86-88页 |
| 硕士期间研究成果 | 第88-89页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第89页 |
