| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 第一章 引言 | 第13-22页 |
| 1.1 光合细菌的概述 | 第13-17页 |
| 1.1.1 光合细菌的分类 | 第13-15页 |
| 1.1.2 不放氧光合细菌的分布和生态作用 | 第15页 |
| 1.1.3 丝状光合细菌的光合机制与植物的光合机制的异同 | 第15-17页 |
| 1.2 嗜热绿色光合细菌Chloroflexus aurantiacus概述 | 第17-18页 |
| 1.3 绿小体 | 第18-19页 |
| 1.4 论文研究意义和技术路线 | 第19-22页 |
| 1.4.1 论文研究意义 | 第19-20页 |
| 1.4.2 实验设计思路 | 第20页 |
| 1.4.3 实验主要内容 | 第20-21页 |
| 1.4.4 技术路线 | 第21-22页 |
| 第二章 目标蛋白的基因克隆 | 第22-49页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-25页 |
| 2.1.1 主要实验仪器 | 第22页 |
| 2.1.2 主要实验试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.3 培养基和实验试剂的配制 | 第23-25页 |
| 2.1.4 载体结构图 | 第25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-36页 |
| 2.2.1 光合绿丝菌Chloroflexus aurantiacus J-10-fl的培养 | 第25-26页 |
| 2.2.2 Chloroflexus aurantiacus J-10-fl细菌基因组的提取 | 第26-27页 |
| 2.2.3 引物序列 | 第27页 |
| 2.2.4 基因csmM、csmN与csmP的PCR扩增 | 第27-28页 |
| 2.2.5 序列csmM-N-P-O、csmN-P-O、csmN-P与csmP-O的PCR扩增 | 第28-32页 |
| 2.2.6 PCR产物的凝胶回收 | 第32页 |
| 2.2.7 重组质粒的连接 | 第32-33页 |
| 2.2.8 重组质粒转化感受态Trans1-T1 | 第33页 |
| 2.2.9 菌落PCR筛选阳性重组子 | 第33-34页 |
| 2.2.10 测序结果比对分析 | 第34-35页 |
| 2.2.11 重组质粒的提取 | 第35页 |
| 2.2.12 重组质粒转化感受态细胞BL21(DE3) | 第35-36页 |
| 2.2.13 阳性重组子的筛选 | 第36页 |
| 2.3 实验结果 | 第36-48页 |
| 2.3.1 光合绿丝菌Chloroflexus aurantiacus J-10-fl细菌基因组的提取 | 第36-37页 |
| 2.3.2 csmM、csmN与csmP的PCR扩增 | 第37-38页 |
| 2.3.3 csmM-N-P-O、csmN-P-O、csmN-P与csmP-O的PCR扩增 | 第38-40页 |
| 2.3.4 csmM、csmN与csmP的PCR产物切胶回收 | 第40-41页 |
| 2.3.5 csmM-N-P-O、csmN-P-O、csmN-P与csmP-O的PCR产物切胶回收 | 第41-43页 |
| 2.3.6 重组质粒转化感受态细胞Trans1-T1及菌落PCR筛选 | 第43-45页 |
| 2.3.7 重组质粒的提取 | 第45-47页 |
| 2.3.8 重组质粒转化感受态细胞BL21(DE3)及菌落PCR筛选 | 第47-48页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第48-49页 |
| 第三章 目标蛋白的生物信息学分析 | 第49-58页 |
| 3.1 实验材料和仪器 | 第49页 |
| 3.2 生物信息学分析 | 第49-50页 |
| 3.2.1 蛋白质的理化性质 | 第49页 |
| 3.2.2 蛋白质的可溶性和疏水性分析 | 第49页 |
| 3.2.3 蛋白质的信号肽分析 | 第49页 |
| 3.2.4 跨膜区分析 | 第49页 |
| 3.2.5 二级结构分析 | 第49-50页 |
| 3.3 实验结果 | 第50-57页 |
| 3.3.1 目标蛋白CsmP的分析结果 | 第50-52页 |
| 3.3.2 融合蛋白CsmN-P的分析结果 | 第52-55页 |
| 3.3.3 其他几种蛋白分析结果 | 第55-57页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第57-58页 |
| 第四章 蛋白CsmP与融合蛋白CsmN-P的表达与纯化 | 第58-82页 |
| 4.1 实验材料 | 第58-60页 |
| 4.1.1 主要实验仪器 | 第58-59页 |
| 4.1.2 主要实验试剂 | 第59页 |
| 4.1.3 试剂的配制 | 第59-60页 |
| 4.2 实验方法 | 第60-69页 |
| 4.2.1 聚丙烯酰胺凝胶的配制 | 第60-61页 |
| 4.2.2 目标蛋白CsmP的诱导表达与纯化 | 第61-65页 |
| 4.2.3 融合蛋白CsmN-P的诱导表达与纯化 | 第65-68页 |
| 4.2.4 Western blot检测目标蛋白 | 第68-69页 |
| 4.2.5 BCA法蛋白浓度的测定 | 第69页 |
| 4.3 实验结果 | 第69-80页 |
| 4.3.1 目标蛋白CsmP的诱导表达与纯化 | 第69-74页 |
| 4.3.2 融合蛋白CsmN-P的诱导表达与纯化 | 第74-77页 |
| 4.3.3 Western blot检测目标蛋白 | 第77-78页 |
| 4.3.4 BCA法蛋白浓度的测定 | 第78-80页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第80-82页 |
| 第五章 蛋白CsmP与融合蛋白CsmN-P的结晶 | 第82-85页 |
| 5.1 实验材料 | 第82-83页 |
| 5.1.1 主要实验仪器 | 第82页 |
| 5.1.2 主要实验试剂 | 第82-83页 |
| 5.2 试验方法 | 第83页 |
| 5.2.1 蛋白质的浓缩 | 第83页 |
| 5.2.2 三维晶体生长条件的筛选——悬滴气相扩散法 | 第83页 |
| 5.2.3 晶体生长条件的优化 | 第83页 |
| 5.3 实验结果 | 第83页 |
| 5.4 小结与讨论 | 第83-85页 |
| 第六章 结论与展望 | 第85-87页 |
| 6.1 结论 | 第85页 |
| 6.2 展望 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-92页 |
| 缩略语 | 第92页 |
