| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略语/符号说明 | 第12-13页 |
| 前言 | 第13-19页 |
| 研究现状、成果 | 第13-17页 |
| 研究目的、方法 | 第17-19页 |
| 一、多西环素在裸鼠移植瘤模型中对EMT和VM的抑制作用 | 第19-33页 |
| 1.1 对象和方法 | 第19-23页 |
| 1.1.1 实验动物和细胞系 | 第19页 |
| 1.1.2 实验药品及配制 | 第19页 |
| 1.1.3 主要试剂及设备 | 第19页 |
| 1.1.4 建立裸鼠移植瘤模型 | 第19-20页 |
| 1.1.5 常规石蜡包埋及组织切片制备 | 第20页 |
| 1.1.6 H&E染色 | 第20-21页 |
| 1.1.7 免疫组织化学染色 | 第21-22页 |
| 1.1.8 组织切片Endumucin-PAS双重染色 | 第22页 |
| 1.1.9 结果判定 | 第22-23页 |
| 1.1.10 统计学方法 | 第23页 |
| 1.2 结果 | 第23-29页 |
| 1.2.1 多西环素对肿瘤生长速度的影响 | 第23-24页 |
| 1.2.2 多西环素对肿瘤重量的影响 | 第24页 |
| 1.2.3 多西环素对生存期的影响 | 第24-25页 |
| 1.2.4 血管计数结果 | 第25-26页 |
| 1.2.5 组织切片免疫组织化学检测结果 | 第26-29页 |
| 1.3 讨论 | 第29-32页 |
| 1.4 小结 | 第32-33页 |
| 二、多西环素在体外实验中对EMT和VM的抑制作用 | 第33-66页 |
| 2.1 对象和方法 | 第33-51页 |
| 2.1.1 细胞系和培养条件 | 第33页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第33-34页 |
| 2.1.3 试剂盒 | 第34页 |
| 2.1.4 主要溶液的配置 | 第34-39页 |
| 2.1.5 主要仪器设备 | 第39-40页 |
| 2.1.6 研究方法 | 第40-51页 |
| 2.1.7 统计学分析 | 第51页 |
| 2.2 结果 | 第51-63页 |
| 2.2.1 多西环素抑制细胞增殖、迁移和侵袭,增强细胞黏附能力 | 第51-63页 |
| 2.2.1.1 细胞增殖实验结果 | 第51-53页 |
| 2.2.1.2 细胞粘附实验结果 | 第53-55页 |
| 2.2.1.3 细胞迁移实验结果 | 第55-57页 |
| 2.2.1.4 Transwell实验结果 | 第57-58页 |
| 2.2.1.5 多西环素促进HCC细胞EMT的发生 | 第58-60页 |
| 2.2.1.6 多西环素抑制HCC细胞VM的形成 | 第60-63页 |
| 2.3 讨论 | 第63-65页 |
| 2.4 小结 | 第65-66页 |
| 三、多西环素抑制EMT和VM的深入探讨 | 第66-82页 |
| 3.1 对象和方法 | 第66-75页 |
| 3.1.1 细胞系和培养条件 | 第66页 |
| 3.1.2 shRNA质粒构建 | 第66页 |
| 3.1.3 质粒扩增 | 第66-67页 |
| 3.1.4 质粒提取 | 第67-68页 |
| 3.1.5 慢病毒包装 | 第68页 |
| 3.1.6 Western blotting | 第68页 |
| 3.1.7 RT-PCR | 第68页 |
| 3.1.8 real-time PCR | 第68-69页 |
| 3.1.9 细胞免疫荧光共聚焦观察 | 第69页 |
| 3.1.10 DNA甲基转移酶(DNMT)活性检测 | 第69-72页 |
| 3.1.11 DNA甲基化及甲基化特异性PCR | 第72-75页 |
| 3.1.12 统计学分析 | 第75页 |
| 3.2 结果 | 第75-79页 |
| 3.2.1 Western blotting结果 | 第75页 |
| 3.2.2 RT-PCR和real-time PCR结果 | 第75-76页 |
| 3.2.3 细胞免疫荧光共聚焦观察 | 第76-77页 |
| 3.2.4 DNMT活性检测结果 | 第77页 |
| 3.2.5 DNA甲基化特异性PCR结果 | 第77-78页 |
| 3.2.6 Western blotting结果 | 第78页 |
| 3.2.7 RT-PCR和real-time PCR结果 | 第78-79页 |
| 3.3 讨论 | 第79-81页 |
| 3.4 小结 | 第81-82页 |
| 全文结论 | 第82-83页 |
| 论文创新点 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-94页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第94-95页 |
| 综述 肿瘤血管生成拟态及上皮-间充质转变的研究进展 | 第95-106页 |
| 综述参考文献 | 第101-106页 |
| 致谢 | 第106页 |
