中文摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
1 前言 | 第12-32页 |
1.1 我国水稻的主要病害 | 第12-13页 |
1.2 水稻抗病基因和抗病相关基因的研究现状 | 第13-15页 |
1.2.1 水稻抗病基因研究进展 | 第14页 |
1.2.2 水稻抗病相关基因研究进展 | 第14-15页 |
1.3 植物与病原的互作 | 第15-19页 |
1.3.1 植物免疫系统 | 第16-18页 |
1.3.2 植物获得性抗性 | 第18-19页 |
1.4 植物的抗病信号路径 | 第19-21页 |
1.4.1 水杨酸抗病信号路径 | 第19-20页 |
1.4.2 茉莉酸抗病信号路径 | 第20-21页 |
1.5 生长素与植物-病原互作 | 第21-26页 |
1.5.1 生长素的合成途径 | 第21-23页 |
1.5.2 生长素的信号路径 | 第23-24页 |
1.5.3 生长素在植物抗病反应中的作用 | 第24-26页 |
1.6 植物中的GH3基因家族 | 第26-30页 |
1.6.1 GH3家族基因的分类 | 第26-27页 |
1.6.2 GH3基因家族蛋白的生化功能 | 第27-29页 |
1.6.3 GH3基因家族的生理功能 | 第29-30页 |
1.7 研究的目的与意义 | 第30-32页 |
2 材料与方法 | 第32-45页 |
2.1 水稻材料与来源 | 第32页 |
2.2 菌株及用途 | 第32-33页 |
2.3 病原菌培养、水稻材料接种及病情调查 | 第33页 |
2.3.1 白叶枯病菌的培养、接种、病情调查及细菌菌体计数 | 第33页 |
2.3.2 细条病菌的培养及细菌菌体计数 | 第33页 |
2.4 病原菌激素的抽提及定量分析 | 第33-34页 |
2.5 β-葡萄糖苷酸酶(GUS)染色 | 第34页 |
2.6 OsDR10免疫组织化学分析 | 第34-36页 |
2.6.1 OsDR10蛋白抗体制备 | 第34-35页 |
2.6.2 水稻总蛋白抽提 | 第35页 |
2.6.3 Western Blot杂交分析 | 第35-36页 |
2.6.4 免疫组织化学检测 | 第36页 |
2.7 种子萌发能力检测 | 第36-37页 |
2.8 OsDR10蛋白筛选酵母双杂交文库 | 第37-38页 |
2.8.1 酵母双杂交载体构建 | 第37页 |
2.8.2 酵母双杂交 | 第37-38页 |
2.9 载体构建及农杆菌介导的遗传转化 | 第38-41页 |
2.9.1 OsGH3.9基因结构分析 | 第38页 |
2.9.2 OsGH3.9超量表达载体构建 | 第38-40页 |
2.9.3 OsGH3.9抑制表达载体构建 | 第40页 |
2.9.4 农杆菌介导的遗传转化 | 第40-41页 |
2.10 外源激素处理水稻材料 | 第41页 |
2.10.1 离体水稻叶片的处理 | 第41页 |
2.10.2 活体水稻叶片的处理 | 第41页 |
2.11 DNA抽提与阳性检测 | 第41-42页 |
2.12 基因表达量分析 | 第42-45页 |
2.12.1 RNA抽提及反转录 | 第42页 |
2.12.2 反转录PCR(RT-PCR) | 第42页 |
2.12.3 实时定量PCR(Real-time Quantitative PCR) | 第42-43页 |
2.12.4 水稻抗感病品种接种病原菌的cDNA材料及来源 | 第43-45页 |
3 结果与分析 | 第45-74页 |
3.1 OsGH3家族基因响应激素的功能分析 | 第45-62页 |
3.1.1 OsGH3家族基因在外源激素处理后的表达变化 | 第45-51页 |
3.1.2 OsGH3家族基因在病原菌侵染的水稻材料中的表达变化 | 第51-53页 |
3.1.3 OsGH3.9超量和抑制表达材料表型分析 | 第53-62页 |
3.2 病原菌激素合成与分泌检测 | 第62-64页 |
3.3 抗病相关基因OsDR10基因的功能分析 | 第64-74页 |
3.3.1 OsDR10基因的GUS染色结果与分析 | 第64-65页 |
3.3.2 免疫组织化学检测结果与分析 | 第65-69页 |
3.3.3 OsDR10超量和抑制表达植株的种子休眠检测 | 第69-72页 |
3.3.4 OsDR10蛋白的酵母双杂交文库筛选 | 第72-74页 |
4 讨论 | 第74-79页 |
4.1 OsGH3.9 可能不参与水稻对白叶枯病菌的防卫反应 | 第74-75页 |
4.2 OsGH3家族的抗病相资源发掘方向 | 第75-76页 |
4.3 干扰病原菌生长素的合成可以降低其毒性 | 第76页 |
4.4 OsDR10可能通过与抗病基因xa5的等位基因互作参与水稻防卫反应 | 第76-79页 |
5 参考文献 | 第79-100页 |
附录 | 第100-102页 |
附录1:部分实验的详细操作程序 | 第100-101页 |
Protocol 1: 小样法抽提植物DNA | 第100页 |
Protocol 2: 病原菌分泌的激素抽提 | 第100-101页 |
附录2:在读期间发表论文 | 第101-102页 |
致谢 | 第102页 |