| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 主要缩略词表 | 第11-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-19页 |
| 1.1 研究背景 | 第13-16页 |
| 1.1.1 胰腺癌 | 第13页 |
| 1.1.2 DNA甲基化结合蛋白 3 | 第13-14页 |
| 1.1.3 上皮间质转化 | 第14-15页 |
| 1.1.4 TGF-β/Smad通路 | 第15-16页 |
| 1.2 本研究的目的、内容、方法与技术路线 | 第16-19页 |
| 1.2.1 研究目的 | 第16页 |
| 1.2.2 研究内容 | 第16-17页 |
| 1.2.3 研究意义 | 第17-18页 |
| 1.2.4 研究技术路线图 | 第18-19页 |
| 第二章 MBD3在胰腺癌组织和细胞中的表达 | 第19-32页 |
| 2.1 实验仪器和材料 | 第19-22页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第19-20页 |
| 2.1.2 实验耗材 | 第20页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.4 一般试剂配制 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-28页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第22-23页 |
| 2.2.2 总RNA提取 | 第23-24页 |
| 2.2.3 qPCR检测方法 | 第24-25页 |
| 2.2.4 Western blot检测方法 | 第25-27页 |
| 2.2.5 肿瘤数据库分析 | 第27-28页 |
| 2.3 数据处理与统计方法 | 第28页 |
| 2.4 结果 | 第28-30页 |
| 2.4.1 MBD3在胰腺癌组织中mRNA水平的表达情况 | 第28页 |
| 2.4.2 MBD3与胰腺癌患者病理分期的关系 | 第28-29页 |
| 2.4.3 MBD3与胰腺癌患者预后的关系 | 第29页 |
| 2.4.4 检测MBD3在三种不同胰腺癌细胞中的表达情况 | 第29-30页 |
| 2.5 讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 MBD3对胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响 | 第32-51页 |
| 3.1 实验仪器和材料 | 第32-34页 |
| 3.1.1 实验仪器 | 第32页 |
| 3.1.2 实验耗材 | 第32页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第32-33页 |
| 3.1.4 试剂配制 | 第33-34页 |
| 3.2 实验方法 | 第34-41页 |
| 3.2.1 感受态细胞的制备 | 第34页 |
| 3.2.2 重组慢病毒sh-MBD3载体构建 | 第34-38页 |
| 3.2.3 过表达质粒Flag-MBD3构建 | 第38-39页 |
| 3.2.4 病毒包装 | 第39-40页 |
| 3.2.5 感染细胞 | 第40页 |
| 3.2.6 质粒转染 | 第40页 |
| 3.2.7 CCK-8 实验 | 第40页 |
| 3.2.8 平板克隆形成实验 | 第40-41页 |
| 3.2.9 干细胞成球实验 | 第41页 |
| 3.2.10 Transwell迁移实验 | 第41页 |
| 3.2.11 Transwell侵袭实验 | 第41页 |
| 3.2.12 细胞培养、Western blot | 第41页 |
| 3.3 数据处理与统计方法 | 第41页 |
| 3.4 结果 | 第41-49页 |
| 3.4.1 MBD3 shRNA质粒的构建 | 第41-42页 |
| 3.4.2 Flag-MBD3质粒的构建 | 第42-43页 |
| 3.4.3 sh-MBD3和Flag-MBD3质粒效果验证 | 第43-44页 |
| 3.4.4 CCK-8 法检测MBD3对胰腺癌细胞增殖能力的影响 | 第44页 |
| 3.4.5 检测MBD3对胰腺癌细胞克隆形成能力的影响 | 第44-45页 |
| 3.4.6 检测MBD3对胰腺癌细胞干性的作用 | 第45-46页 |
| 3.4.7 Transwell法检测MBD3对胰腺癌细胞迁移能力的影响 | 第46-47页 |
| 3.4.8 侵袭实验检测MBD3对胰腺癌细胞侵袭能力的影响 | 第47-48页 |
| 3.4.9 Western blot检测MBD3对侵袭相关蛋白表达的影响 | 第48-49页 |
| 3.5 讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 MBD3对胰腺癌细胞EMT的影响及其分子机制 | 第51-57页 |
| 4.1 实验仪器和材料 | 第51-52页 |
| 4.1.1 实验仪器 | 第51页 |
| 4.1.2 实验耗材 | 第51页 |
| 4.1.3 实验试剂 | 第51-52页 |
| 4.1.4 试剂配制 | 第52页 |
| 4.2 实验方法 | 第52页 |
| 4.3 数据处理与统计方法 | 第52页 |
| 4.4 结果 | 第52-54页 |
| 4.4.1 Western blot测定MBD3对胰腺癌细胞EMT关联蛋白的影响 | 第52-53页 |
| 4.4.2 检测MBD3对胰腺癌TGF-β/Smad信号通路相关蛋白的影响 | 第53-54页 |
| 4.5 讨论 | 第54-57页 |
| 结论与展望 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 综述 | 第65-70页 |
| 参考文献 | 第68-70页 |
| 攻读硕士期间发表论文 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
