中文摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5-6页 |
引言 | 第9-11页 |
第一部分:构建LpqT在耻垢分枝杆菌中过表达及敲除菌株 | 第11-28页 |
材料和方法 | 第12-19页 |
(一)材料 | 第12-13页 |
(二)实验方法 | 第13-19页 |
结果 | 第19-26页 |
1. LpqT蛋白原核表达质粒的构建及鉴定 | 第19-20页 |
2. 原核重组质粒pet28a-LpqT在大肠杆菌中的诱导表达及纯化 | 第20页 |
3. LpqT多克隆抗体的制备及验证 | 第20-21页 |
4. LpqT在耻构分枝杆菌中敲除质粒的构建 | 第21-23页 |
5. 耻构分枝杆菌LpqT敲除菌株的验证 | 第23-24页 |
6. LpqT在耻构分枝杆菌中过表达质粒的构建和鉴定 | 第24-25页 |
7. 过表达LpqT耻垢分枝杆菌的建立及表达鉴定 | 第25-26页 |
8. 重组过表达LpqT蛋白定位在耻垢分枝杆菌细胞壁 | 第26页 |
讨论 | 第26-28页 |
第二部分:LpqT的表达增强耻垢分枝杆菌在巨噬细胞和小鼠中的存活 | 第28-35页 |
材料和方法 | 第28-30页 |
(一)材料 | 第28-29页 |
(二)实验方法 | 第29-30页 |
结果 | 第30-33页 |
1. 重组耻垢分枝杆菌的生长曲线 | 第30-31页 |
2. 重组耻垢分枝杆菌感染RAW264.7的细菌载量的变化 | 第31页 |
3. 重组耻垢分枝杆菌感染小鼠后的存活率变化 | 第31-33页 |
讨论 | 第33-35页 |
第三部分:LpqT抑制巨噬细胞炎症因子的表达和凋亡 | 第35-43页 |
材料和方法 | 第36-39页 |
(一)材料 | 第36页 |
(二)方法 | 第36-39页 |
结果 | 第39-41页 |
1. LpqT抑制巨噬细胞中IL-1β和IL-6 的表达 | 第39-40页 |
2. LpqT抑制巨噬细胞凋亡 | 第40-41页 |
3. LpqT不影响巨噬细胞自噬 | 第41页 |
讨论 | 第41-43页 |
第四部分:LpqT通过抑制MAPKs信号通路影响IL-6 和IL-1β 的表达 | 第43-46页 |
材料和方法 | 第43-44页 |
(一)材料 | 第43-44页 |
(二)方法 | 第44页 |
结果 | 第44-45页 |
讨论 | 第45-46页 |
结论 | 第46-47页 |
文献综述 | 第47-52页 |
参考文献 | 第52-56页 |
附录 | 第56-58页 |
致谢 | 第58-59页 |