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桃体细胞胚发生相关基因SERK2的克隆与表达分析

致谢第4-8页
缩略语第8-9页
摘要第9-10页
1 引言第10-14页
    1.1 植物体细胞胚发生第10-11页
        1.1.1 植物体细胞胚胎发生的概念第10页
        1.1.2 植物体细胞胚胎发生的途径及特点第10-11页
        1.1.3 植物体细胞胚胎发生的意义第11页
    1.2 植物体细胞胚胎发生相关基因研究进展第11-13页
        1.2.1SERK第11-12页
        1.2.2LEC第12-13页
        1.2.3WUS第13页
        1.2.4 其他体细胞胚发生相关基因第13页
    1.3 本研究的目的意义第13-14页
2 材料与方法第14-24页
    2.1 实验材料第14页
        2.1.1 植物材料第14页
        2.1.2 菌种与质粒第14页
        2.1.3 主要仪器第14页
    2.2 主要试剂及配制第14-16页
        2.2.1 RNA提取所用试剂第14页
        2.2.2 CTAB法提取RNA的试剂配置第14-15页
        2.2.3 主要培养基的配置第15-16页
        2.2.4 酶及生化试剂第16页
    2.3 试验方法第16-24页
        2.3.1 愈伤组织的诱导第16页
            2.3.1.1‘秋甜’胚培苗获得第16页
            2.3.1.2‘秋甜’胚培苗叶片愈伤组织诱导第16页
        2.3.2 PpeSERK2基因的克隆与分析第16-17页
            2.3.2.1 PpeSERK2基因的克隆测序验证第16-17页
            2.3.2.2 PpeSERK2基因的生物信息学分析第17页
        2.3.3 PpeSERK2基因的表达分析第17-20页
            2.3.3.1‘秋甜’桃不同组织(器官)总RNA的提取第17-18页
            2.3.3.2‘秋甜’桃不同组织(器官)RNA的反转录第18-19页
            2.3.3.3 RNA浓度和胶检测第19页
            2.3.3.4 实时荧光定量PCR引物第19页
            2.3.3.5 荧光定量PCR反应第19-20页
        2.3.4 35S::PpeSERK2过量表达载体构建第20-21页
            2.3.4.1PpeSERK2基因扩增第20页
            2.3.4.2 目的片段切胶回收第20-21页
            2.3.4.3.酶切连接反应第21页
            2.3.4.4 转化第21页
            2.3.4.5 挑单克隆菌检第21页
            2.3.4.6 酶切验证第21页
        2.3.5 35S::Ppe SERK2过量表达载体转化拟南芥第21-24页
            2.3.5.1 碱裂解法提取质粒DNA第21-22页
            2.3.5.2 农杆菌GV3101感受态细胞的制备第22页
            2.3.5.3 重组质粒 35S:Ppe SERK2转化农杆菌第22-23页
            2.3.5.4 利用农杆菌转染的方法转化拟南芥第23页
            2.3.5.5 PpeSERK2转基因植株的鉴定第23-24页
        2.3.6 数据统计和分析第24页
3 结果与分析第24-34页
    3.1 PpeSERK2基因的克隆与分析第24-29页
        3.1.1 PpeSERK2基因的克隆第24-25页
        3.1.2 PpeSERK2基因的生物信息学分析第25-29页
    3.2 PpeSERK2基因的表达分析第29-32页
        3.2.1 PpeSERK2在桃不同组织(器官)表达分析第29-30页
        3.2.2 PpeSERK2在‘秋甜’愈伤组织中的表达分析第30-32页
            3.2.2.1‘秋甜’体细胞胚或愈伤组织诱导第30-31页
            3.2.2.2 PpeSERK2在‘秋甜’愈伤组织中的表达分析第31-32页
    3.3 35S::PpeSERK2过量表达载体构建第32-34页
        3.3.1 35S::PpeSERK2过量表达载体的构建第32-34页
    3.4 35S::PpeSERK2转化拟南芥第34页
4 讨论第34-36页
5 结论第36-37页
参考文献第37-43页
ABSTRACT第43-44页

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