| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-9页 |
| 英文缩略表 | 第16-17页 |
| 第一章 引言 | 第17-28页 |
| 1.1 苏云金芽胞杆菌 | 第17-19页 |
| 1.1.1 苏云金芽胞杆菌简介 | 第17页 |
| 1.1.2 Bt杀虫蛋白种类 | 第17-19页 |
| 1.2 蛴螬 | 第19-20页 |
| 1.2.1 蛴螬简介 | 第19页 |
| 1.2.2 蛴螬的防治 | 第19-20页 |
| 1.3 Bt在蛴螬生物防治中的应用 | 第20-22页 |
| 1.3.1 Bt在蛴螬生物防治中的优势 | 第20页 |
| 1.3.2 Bt在蛴螬生物防治中的进展 | 第20-22页 |
| 1.4 Bt的作用机理 | 第22-23页 |
| 1.5 Bt对蛴螬作用缓慢及其原因分析 | 第23-25页 |
| 1.5.1 Bt对蛴螬作用缓慢 | 第23-24页 |
| 1.5.2 Bt对蛴螬作用缓慢原因分析 | 第24-25页 |
| 1.6 转录组测序 | 第25-26页 |
| 1.7 RNA干扰及其在昆虫生物防治中的应用 | 第26页 |
| 1.8 本研究的立题依据 | 第26-27页 |
| 1.9 本研究的目的和意义 | 第27-28页 |
| 第二章 材料方法 | 第28-38页 |
| 2.1 材料 | 第28-29页 |
| 2.1.1 供试昆虫 | 第28页 |
| 2.1.2 仪器设备 | 第28页 |
| 2.1.3 试剂和溶液 | 第28-29页 |
| 2.2 方法 | 第29-38页 |
| 2.2.1 中肠总RNA提取及建库 | 第29-30页 |
| 2.2.1.1 中肠总RNA提取 | 第29页 |
| 2.2.1.2 cDNA的合成 | 第29-30页 |
| 2.2.1.3 测序文库构建与测序 | 第30页 |
| 2.2.2 大黑鳃金龟幼虫中肠转录组数据分析 | 第30-32页 |
| 2.2.2.1 转录组数据分析流程 | 第30-31页 |
| 2.2.2.2 转录组数据组装方法 | 第31-32页 |
| 2.2.3 靶标基因的克隆 | 第32-34页 |
| 2.2.3.1 靶标基因的引物设计 | 第32-33页 |
| 2.2.3.2 靶标基因PCR扩增及序列分析 | 第33-34页 |
| 2.2.4 L4440质粒获取及干扰片段扩增 | 第34-36页 |
| 2.2.5 幼虫的血淋巴和中肠消化液体外耐受实验 | 第36-37页 |
| 2.2.5.1 大黑鳃金龟幼虫中肠液获取 | 第36页 |
| 2.2.5.2 大黑鳃金龟中肠消化液耐受实验 | 第36页 |
| 2.2.5.3 幼虫血淋巴的获取 | 第36页 |
| 2.2.5.4 大黑鳃金龟幼虫和白星花金龟幼虫血淋巴耐受实验 | 第36-37页 |
| 2.2.6 白星花金龟幼虫的体外注射 | 第37-38页 |
| 第三章 结果及讨论 | 第38-57页 |
| 3.1 中肠转录组分析 | 第38-42页 |
| 3.1.1 中肠总RNA提取 | 第38-39页 |
| 3.1.2 中肠转录组中unigene的分布 | 第39页 |
| 3.1.3 中肠转录组中unigene的GO注释信息 | 第39-40页 |
| 3.1.4 中肠转录组中unigene的物种分布 | 第40-41页 |
| 3.1.5 中肠转录组中unigene的功能注释 | 第41-42页 |
| 3.2 中肠转录组分析 | 第42-44页 |
| 3.2.1 转录组中蛋白酶相关基因 | 第42-43页 |
| 3.2.2 转录组中免疫相关基因 | 第43-44页 |
| 3.3 基因克隆 | 第44-47页 |
| 3.3.1 基因serineprotease克隆 | 第44-45页 |
| 3.3.2 基因pgrp克隆 | 第45页 |
| 3.3.3 基因definsin克隆 | 第45-46页 |
| 3.3.4 基因lectin克隆 | 第46-47页 |
| 3.4 L4440质粒获取及干扰片段扩增 | 第47-48页 |
| 3.4.1 L4440质粒获取 | 第47页 |
| 3.4.2 干扰片段扩增 | 第47-48页 |
| 3.5 幼虫中肠消化液耐受实验 | 第48页 |
| 3.6 幼虫血淋巴耐受实验 | 第48-50页 |
| 3.6.1 大黑鳃金龟幼虫血淋巴耐受实验 | 第48-49页 |
| 3.6.2 白星花金龟幼虫血淋巴耐受实验 | 第49-50页 |
| 3.7 白星花金龟体外注射 | 第50-52页 |
| 3.8 不同菌株在血淋巴中Bt增殖状况的探索 | 第52页 |
| 3.9 讨论 | 第52-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 耐受实验菌株列表 | 第64-70页 |
| 致谢 | 第70-73页 |
| 作者简历 | 第73页 |