致谢 | 第5-7页 |
中文摘要 | 第7-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
英文缩略词表 | 第13-19页 |
第一章 :支架蛋白Gab2介导TYK2/STAT6通路调控气道上皮黏液的分泌和杯状细胞的化生 | 第19-59页 |
1. 引言 | 第19-22页 |
2. 材料和试剂 | 第22-26页 |
2.1 主要仪器 | 第22-23页 |
2.2 主要试剂耗材 | 第23-25页 |
2.3 小鼠 | 第25页 |
2.4 细胞 | 第25-26页 |
3. 实验方法 | 第26-35页 |
3.1 免疫组化 | 第26页 |
3.2 siRNA细胞转染 | 第26-27页 |
3.3 质粒细胞转染 | 第27-28页 |
3.4 细胞RNA提取(Trizol法)及荧光定量PCR | 第28页 |
3.5 细胞免疫荧光 | 第28-29页 |
3.6 小鼠哮喘模型的建立以及肺泡灌洗液获取 | 第29页 |
3.7 肺组织切片和HE染色 | 第29-30页 |
3.8 组织免疫荧光 | 第30-31页 |
3.9 WST-1细胞增殖检测 | 第31页 |
3.10 细胞凋亡检测(流式细胞法) | 第31页 |
3.11 PAS染色(过碘酸-Schiff反应) | 第31页 |
3.12 酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第31-32页 |
3.13 骨髓置换实验 | 第32页 |
3.14 蛋白制样 | 第32-33页 |
3.15 蛋白质印记法(Western blot) | 第33-34页 |
3.16 免疫共沉淀(Co-IP) | 第34-35页 |
4. 实验结果 | 第35-52页 |
4.1 Gab2的表达与气道黏液分泌相关性研究 | 第35-37页 |
4.2 体外实验显示Gab2正向调控黏液基因的表达 | 第37-41页 |
4.3 Gab2缺失缓解了OVA诱导的杯状细胞化生和黏液分泌 | 第41-43页 |
4.4 Gab2缺失缓解了OVA诱导的气道炎症 | 第43-44页 |
4.5 骨髓置换实验进一步证实Gab2正向调控了体内杯状细胞的化生黏液的分泌 | 第44-46页 |
4.6 Gab2正向调控IL-13介导的TYK2/STAT6信号通路 | 第46-49页 |
4.7 Gab2的缺失增强了SOCS3与TYK2的结合,抑制IL-13诱导的TYK2/STAT6通路 | 第49-52页 |
5. 讨论 | 第52-55页 |
6. 结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-59页 |
第二章 :支架蛋白Gab1在髓系来源树突状细胞介导的过敏性哮喘中作用的研究 | 第59-101页 |
1. 引言 | 第59-62页 |
2. 材料和试剂 | 第62-67页 |
2.1 主要仪器 | 第62-63页 |
2.2 主要试剂耗材 | 第63-65页 |
2.3 小鼠 | 第65-66页 |
2.4 细胞 | 第66-67页 |
3. 实验方法 | 第67-76页 |
3.1 小鼠哮喘模型的建立以及肺泡灌洗液处理 | 第67页 |
3.2 肺组织切片和HE染色 | 第67-68页 |
3.3 免疫组化 | 第68页 |
3.4 PAS染色 | 第68-69页 |
3.5 人或者小鼠外周血单核细胞分离 | 第69页 |
3.6 BMDM和BMDC的过继转移实验 | 第69-70页 |
3.7 细胞RNA提取(Trizol法)及荧光定量PCR | 第70页 |
3.8 DC纯化 | 第70-71页 |
3.9 CD4 T细胞纯化 | 第71-72页 |
3.10 DC抗原吞噬实验 | 第72页 |
3.11 DC成熟实验 | 第72页 |
3.12 DC抗原递呈实验 | 第72页 |
3.13 体内T细胞增殖实验 | 第72-73页 |
3.14 体内DC迁移实验 | 第73页 |
3.15 体外DC迁移实验(Transwell实验) | 第73页 |
3.16 酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第73-74页 |
3.17 蛋白制样 | 第74-75页 |
3.18 蛋白质印记法(Western blot) | 第75-76页 |
4. 实验结果 | 第76-93页 |
4.1 髓系来源细胞缺失Gab1缓解了OVA诱导的过敏性哮喘 | 第76-80页 |
4.2 过继转移实验表明Gab1通过影响树突状细胞功能影响过敏性哮喘的发生62 | 第80-85页 |
4.3 Gab1缺失对树突状细胞的抗原吞噬,成熟以及抗原递呈无影响 | 第85-87页 |
4.4 Gab1的缺失阻断了树突状细胞向淋巴结的迁移 | 第87-89页 |
4.5 Gab1正向调控了树突状细胞的定向迁移 | 第89-93页 |
5. 讨论 | 第93-95页 |
6. 结论 | 第95-96页 |
参考文献 | 第96-101页 |
综述 | 第101-112页 |
参考文献 | 第107-112页 |
作者简历及在读期间取得的科研成果 | 第112-113页 |