| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 目录 | 第9-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-40页 |
| 1.1 蜱虫 | 第14-17页 |
| 1.1.1 软蜱 | 第14-15页 |
| 1.1.2 硬蜱 | 第15-16页 |
| 1.1.3 全沟硬蜱 | 第16-17页 |
| 1.2 硬蜱吸血策略 | 第17-18页 |
| 1.3 蜱虫生理生化与吸血过程 | 第18-32页 |
| 1.3.1 中肠与血餐消化 | 第18-23页 |
| 1.3.2 唾液腺、唾液与血餐摄取 | 第23-32页 |
| 1.4 病原菌传播与吸血过程 | 第32-38页 |
| 1.4.1 主要蜱传疾病 | 第32-35页 |
| 1.4.2 共生菌 | 第35-36页 |
| 1.4.3 病原菌传播与吸血过程 | 第36-38页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第38-40页 |
| 第二章 常用仪器、试剂及方法 | 第40-48页 |
| 2.1 常用仪器与试剂 | 第40-41页 |
| 2.1.1 常用仪器 | 第40-41页 |
| 2.1.2 常用试剂 | 第41页 |
| 2.2 常用试剂配制 | 第41-43页 |
| 2.2.1 培养基配制 | 第41页 |
| 2.2.2 抗生素配制 | 第41页 |
| 2.2.3 SDS-PAGE相关试剂配制 | 第41-42页 |
| 2.2.4 Western blot相关试剂配制 | 第42页 |
| 2.2.5 其他试剂配制 | 第42-43页 |
| 2.3 常用方法 | 第43-48页 |
| 2.3.1 酶切反应 | 第43页 |
| 2.3.2 载体连接 | 第43页 |
| 2.3.3 琼脂糖凝胶回收 | 第43页 |
| 2.3.4 质粒抽提 | 第43-44页 |
| 2.3.5 CaCl2法制备TG1感受态细胞 | 第44页 |
| 2.3.6 质粒DNA热激转化TG1感受态细胞 | 第44页 |
| 2.3.7 SDS-PAGE | 第44-45页 |
| 2.3.8 Western Blot | 第45页 |
| 2.3.9 多克隆抗体制备 | 第45页 |
| 2.3.10 间接免疫荧光(IFA) | 第45-46页 |
| 2.3.11 莱姆病螺旋体组织培养 | 第46页 |
| 2.3.12 蜱虫饲养 | 第46-48页 |
| 第三章 全沟硬蜱不同吸血阶段的转录组和表达谱分析 | 第48-78页 |
| 3.1 引言 | 第48-49页 |
| 3.2 材料与方法 | 第49-52页 |
| 3.2.1 伦理声明 | 第49页 |
| 3.2.2 蜱虫采集和饲养 | 第49-50页 |
| 3.2.3 Illumina测序文库制备、测序及数据分析 | 第50-51页 |
| 3.2.4 全沟硬蜱代谢解毒酶基因家族分析 | 第51页 |
| 3.2.5 全沟硬蜱抗氧化酶基因家族分析 | 第51-52页 |
| 3.2.6 全沟硬蜱不同吸血阶段cDNA文库构建、测序以及数据分析 | 第52页 |
| 3.3 结果与分析 | 第52-77页 |
| 3.3.1 Illumina测序与序列拼接 | 第52-53页 |
| 3.3.2 序列比对分析 | 第53-55页 |
| 3.3.3 GO和KEGG注释 | 第55-57页 |
| 3.3.4 全沟硬蜱代谢解毒酶系统 | 第57-61页 |
| 3.3.5 全沟硬蜱抗氧化酶系统 | 第61-73页 |
| 3.3.6 全沟硬蜱转录组中利什曼原虫相关序列 | 第73页 |
| 3.3.7 不同吸血阶段基因差异表达情况 | 第73-75页 |
| 3.3.8 不同吸血阶段差异表达基因的GO富集分析 | 第75-76页 |
| 3.3.9 全沟硬蜱代谢解毒酶系表达模式 | 第76页 |
| 3.3.10 全沟硬蜱抗氧化酶系表达模式 | 第76-77页 |
| 3.4 讨论与小结 | 第77-78页 |
| 第四章 全沟硬蜱吸血前后微生物群落变化及其传菌能力分析 | 第78-92页 |
| 4.1 引言 | 第78-79页 |
| 4.2 材料与方法 | 第79-81页 |
| 4.2.1 伦理声明 | 第79页 |
| 4.2.2 蜱虫采集和饲养 | 第79页 |
| 4.2.3 基因组DNA提取 | 第79-80页 |
| 4.2.4 16SrRNA V4区扩增测序以及数据分析 | 第80页 |
| 4.2.5 PCR扩增和序列分析 | 第80-81页 |
| 4.3 结果与分析 | 第81-88页 |
| 4.3.1 吸血过程中微生物群落变化分析 | 第81-84页 |
| 4.3.2 吸血过程中传递给哺乳动物宿主的潜在病原菌 | 第84-86页 |
| 4.3.3 蜱传病原菌感染率检测 | 第86-88页 |
| 4.3.4 中国东北莱姆病螺旋体优势基因型分析 | 第88页 |
| 4.3.5 B.garinii对脊椎动物的感染力检测 | 第88页 |
| 4.4 讨论与小结 | 第88-92页 |
| 第五章 莱姆病螺旋体候选致病因子BBA68-BBA73初步研究 | 第92-108页 |
| 5.1 引言 | 第92-93页 |
| 5.2 材料与方法 | 第93-98页 |
| 5.2.1 莱姆病螺旋体及敲除载体 | 第93页 |
| 5.2.2 敲除载体构建 | 第93-97页 |
| 5.2.3 莱姆病螺旋体电击转化 | 第97-98页 |
| 5.2.4 莱姆病螺旋体基因敲除菌株筛选 | 第98页 |
| 5.2.5 人工针刺感染验证 | 第98页 |
| 5.3 结果与分析 | 第98-106页 |
| 5.3.1 BBA68敲除菌株的致病力分析 | 第98-99页 |
| 5.3.2 BBA69敲除菌株的致病力分析 | 第99-101页 |
| 5.3.3 BBA70敲除菌株的致病力分析 | 第101-102页 |
| 5.3.4 BBA71敲除菌株的致病力分析 | 第102-103页 |
| 5.3.5 BBA72敲除菌株的致病力分析 | 第103-104页 |
| 5.3.6 BBA73敲除菌株的致病力分析 | 第104-106页 |
| 5.4 讨论与小结 | 第106-108页 |
| 第六章 莱姆病螺旋体及莱姆病的血清学检测方法初步研究 | 第108-120页 |
| 6.1 引言 | 第108-110页 |
| 6.2 材料与方法 | 第110-111页 |
| 6.2.1 莱姆病螺旋体及全沟硬蜱 | 第110页 |
| 6.2.2 菌体培养 | 第110页 |
| 6.2.3 全菌裂解物制备 | 第110页 |
| 6.2.4 多克隆抗体制备 | 第110页 |
| 6.2.5 蜱-鼠动物模型建立 | 第110页 |
| 6.2.6 间接免疫荧光(IFA) | 第110-111页 |
| 6.2.7 大鼠抗血清制备 | 第111页 |
| 6.2.8 SDS-PAGE和免疫印迹检测 | 第111页 |
| 6.2.9 条带检测及分子量计算 | 第111页 |
| 6.3 结果与分析 | 第111-116页 |
| 6.3.1 B31A3和NMJW1全菌抗原制备 | 第111-112页 |
| 6.3.2 不同莱姆病螺旋体全菌多抗的抗原反应特性 | 第112-114页 |
| 6.3.3 莱姆病螺旋体的免疫荧光检测 | 第114-115页 |
| 6.3.4 幼蜱中肠莱姆病螺旋体的免疫荧光检测 | 第115页 |
| 6.3.5 全沟硬蜱叮咬后大鼠血清的抗原反应特性 | 第115-116页 |
| 6.4 讨论与小结 | 第116-120页 |
| 第七章 总结与展望 | 第120-124页 |
| 7.1 总结 | 第120-121页 |
| 7.2 本研究创新点 | 第121-122页 |
| 7.3 展望 | 第122-124页 |
| 参考文献 | 第124-136页 |
| 在读期间发表论文 | 第136-137页 |
| 致谢 | 第137页 |
