| 中文摘要 | 第2-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 英文缩写词表 | 第14-17页 |
| 引言 | 第17-22页 |
| 第一部分 原发性痛风不同中医证型患者外周血单个核细胞NLRP3炎性体基因转录剪接体的MRNA表达 | 第22-49页 |
| 1. 对象与方法 | 第23-37页 |
| 1.1 研究对象 | 第23-24页 |
| 1.1.1 痛风患者入选标准 | 第23页 |
| 1.1.2 痛风患者排除标准 | 第23页 |
| 1.1.3 健康对照入选标准 | 第23-24页 |
| 1.1.4 中医辨证分型标准 | 第24页 |
| 1.1.5 临床资料 | 第24页 |
| 1.2 实验试剂 | 第24-28页 |
| 1.2.1 配制试剂 | 第26-28页 |
| 1.3 实验仪器 | 第28-29页 |
| 1.4 实验场地 | 第29-30页 |
| 1.5 方法 | 第30-36页 |
| 1.5.1 引物设计 | 第30-31页 |
| 1.5.2. 分离血浆 | 第31页 |
| 1.5.3. 外周血单个核细胞(PBMCs)的提取 | 第31页 |
| 1.5.4. PBMCs总RNA提取 | 第31页 |
| 1.5.5. RNA质量鉴定 | 第31-32页 |
| 1.5.6 制备cDNA | 第32页 |
| 1.5.7 NLRP3炎性体基因转录剪接体RT-PCR检测 | 第32-33页 |
| 1.5.8 PCR产物纯化、测序 | 第33页 |
| 1.5.9 目的基因转录剪接体标准品的阳性克隆与测序 | 第33-34页 |
| 1.5.10 NLRP3炎性体基因转录剪接体qRT-PCR检测 | 第34-35页 |
| 1.5.11 PBMCs细胞裂解液蛋白浓度的测定 | 第35页 |
| 1.5.12 Western Blot检测 | 第35页 |
| 1.5.13 ELISA检测 | 第35-36页 |
| 1.6 统计学分析 | 第36-37页 |
| 2. 实验结果 | 第37-46页 |
| 2.1 PG患者西医分期与中医辨证分型结果 | 第37页 |
| 2.2 PG患者NLRP3炎性体基因转录剪接体克隆与测序结果 | 第37-39页 |
| 2.3 PG不同期患者PBMCs的NLRP3炎性体基因转录剪接体引物扩增结果 | 第39-40页 |
| 2.4 PG不同中医证型患者PBMCs的NLRP3炎性体基因转录剪接体引物扩增结果 | 第40-42页 |
| 2.5 PG不同期患者PBMCs的NLRP3炎性体基因转录剪接体MRNA表达 | 第42页 |
| 2.6 PG不同中医证型患者PBMCs的NLRP3炎性体基因转录剪接体MRNA表达 | 第42-43页 |
| 2.7 PG不同期患者PBMCs的IL-1β MRNA表达 | 第43页 |
| 2.8 PG不同中医证型患者PBMCs的IL-1B MRNA表达 | 第43-44页 |
| 2.9 PG不同期患者PBMCs的NLRP3炎性体、NF-κB(P50)蛋白表达 | 第44页 |
| 2.10 PG不同中医证型患者PBMCs的NLRP3炎性体、NF-κB(P50)蛋白表达 | 第44页 |
| 2.11 PG不同期患者血浆IL-Iβ、IL-2、TNF-α、CRP蛋白表达 | 第44-45页 |
| 2.12 PG不同中医证型患者血浆IL-1β、IL-2、TNF-α、CRP蛋白表达 | 第45-46页 |
| 3. 讨论 | 第46-49页 |
| 第二部分 MSU对原发性痛风不同中医证型患者NLRP3炎性体基因转录剪接体的影响 | 第49-75页 |
| 1. 对象与方法 | 第49-59页 |
| 1.1 研究对象 | 第49-51页 |
| 1.1.1 痛风患者入选标准 | 第49-50页 |
| 1.1.2 痛风患者排除标准 | 第50页 |
| 1.1.3 健康对照入选标准 | 第50页 |
| 1.1.4 中医辨证分型标准 | 第50-51页 |
| 1.1.5 临床资料 | 第51页 |
| 1.2 实验试剂 | 第51-52页 |
| 1.3 实验仪器 | 第52-53页 |
| 1.4 实验场地 | 第53页 |
| 1.5 方法 | 第53-57页 |
| 1.5.1 PBS、MSU、LPS、MSU+LPS刺激PG患者外周静脉血 | 第53页 |
| 1.5.2. 分离血浆 | 第53-54页 |
| 1.5.3. 外周血单个核细胞(PBMCs)的提取 | 第54页 |
| 1.5.4. PBMCs总RNA提取 | 第54页 |
| 1.5.5. RNA质量鉴定 | 第54页 |
| 1.5.6 制备cDNA | 第54-55页 |
| 1.5.7 NLRP3炎性体基因转录剪接体RT-PCR检测 | 第55-56页 |
| 1.5.8 NLRP3炎性体基因转录剪接体qRT-PCR检测 | 第56页 |
| 1.5.9 PBMCs细胞裂解液蛋白浓度的测定 | 第56-57页 |
| 1.5.10 Western Blot检测 | 第57页 |
| 1.5.11 ELISA检测 | 第57页 |
| 1.6 统计学分析 | 第57-59页 |
| 2. 实验结果 | 第59-73页 |
| 2.1 原发性痛风患者西医分期与中医辨证分型结果 | 第59页 |
| 2.2 HC与PG患者外周静脉血经PBS、MSU、LPS、MSU+LPS以不同时间刺激后血浆IL-1β蛋白及PBMCs的IL-1β MRNA表达 | 第59-60页 |
| 2.3 原发性痛风不同期患者PBMCs的MLRP3炎性体基因转录剪接体MRNA表达 | 第60-63页 |
| 2.3.1 经PBS、MSU、LPS、MSU+LPS刺激24h后原发性痛风患者PBMCs的NLRP3炎性体基因转录剪接体mRNA表达 | 第60-61页 |
| 2.3.2 刺激前后PG患者PBMCs的NLRP3炎性体基因转录剪接体mRNA表达 | 第61-63页 |
| 2.4 PG不同中医证型患者PBMCs的NLRP3炎性体基因转录剪接体MRNA表达 | 第63-68页 |
| 2.4.1 经PBS、MSU、LPS、MSU+LPS刺激24h后PG患者PBMCs的NLRP3炎性体基因转录剪接体mRNA表达 | 第63-66页 |
| 2.4.2 刺激前后PG患者PBMCs的NLRP3炎性体基因转录剪接体mRNA表达 | 第66-68页 |
| 2.5 刺激前后PG不同期患者PBMCs的NLRP3炎性体、NF-κB(P50)蛋白表达 | 第68-69页 |
| 2.6 刺激前后PG不同中医证型患者PBMCs的NLRP3炎性体、NF-κB(P50)蛋白表达 | 第69-71页 |
| 2.6.1 经PBS、MSU、LPS、MSU+LPS刺激前后PG不同中医证型患者PBMCs的NLRP3、NF-κB(p50)蛋白表达 | 第69-70页 |
| 2.6.2 经PBS、MSU、LPS、MSU+LPS刺激前后PG不同中医证型患者PBMCs的PYCARD蛋白表 | 第70页 |
| 2.6.3 经PBS、MSU、LPS、MSU+LPS刺激前后PG不同中医证型患者PBMCs的CASP1蛋白表达 | 第70-71页 |
| 2.7 PG不同期患者血浆IL-1β蛋白表达 | 第71页 |
| 2.8 PG不同中医证型患者血浆IL-1β蛋白表达 | 第71-73页 |
| 3. 讨论 | 第73-75页 |
| 第三部分 NLRP3炎性体基因转录剪接体MRNA表达与临床相关实验指标的相关性分析 | 第75-90页 |
| 1. 对象与方法 | 第75-83页 |
| 1.1 研究对象 | 第75-77页 |
| 1.1.1 痛风患者入选标准 | 第75-76页 |
| 1.1.2 痛风患者排除标准 | 第76页 |
| 1.1.3 健康对照入选标准 | 第76页 |
| 1.1.4 临床资料 | 第76-77页 |
| 1.2 实验试剂 | 第77-78页 |
| 1.3 实验仪器 | 第78-79页 |
| 1.4 实验场地 | 第79页 |
| 1.5 方法 | 第79-83页 |
| 1.5.1. 收集痛风患者与健康对照临床实验指标及检测方法 | 第79-80页 |
| 1.5.2. 分离血浆 | 第80页 |
| 1.5.3. PBMCs的提取 | 第80页 |
| 1.5.4. PBMCs总RNA提取 | 第80页 |
| 1.5.5. RNA质量鉴定 | 第80-81页 |
| 1.5.6 制备cDNA | 第81页 |
| 1.5.7 NLRP3炎性体基因转录剪接体RT-PCR检测 | 第81-82页 |
| 1.5.8 NLRP3炎性体基因转录剪接体qRT-PCR检测 | 第82-83页 |
| 1.5.9 ELISA检测 | 第83页 |
| 1.6 统计学分析 | 第83页 |
| 2. 实验结果 | 第83-88页 |
| 2.1 HC与PG患者临床实验指标比较 | 第83-84页 |
| 2.2 NLRP3炎性体基因及其转录剪接体MRNA表达与各组临床实验指标的相关性分析 | 第84-86页 |
| 2.2.1 NLRP3炎性体基因及其转录剪接体mRNA表达与APPG组临床实验指标的相关性分析 | 第84-85页 |
| 2.2.2 NLRP3炎性体基因及其转录剪接体mRNA表达与NAPPG组临床实验指标的相关性分析 | 第85-86页 |
| 2.2.3 NLRP3炎性体基因及其转录剪接体mRNA表达与HC组临床实验指标的相关性分析 | 第86页 |
| 2.3 NLRP3炎性体基因及其转录剪接体MRNA表达与PBMCs的IL-1β MRNA表达及血浆IL-1β蛋白表达的相关性分析 | 第86-88页 |
| 3. 讨论 | 第88-90页 |
| 第四部分 小檗碱对NLRP3炎性体基因转录剪接体MRNA表达的影响 | 第90-104页 |
| 1. 对象与方法 | 第91-98页 |
| 1.1 研究对象 | 第91-92页 |
| 1.1.1 痛风患者入选标准 | 第91页 |
| 1.1.2 痛风患者排除标准 | 第91页 |
| 1.1.3 健康对照入选标准 | 第91-92页 |
| 1.1.4 临床资料 | 第92页 |
| 1.2 实验试剂 | 第92-93页 |
| 1.3 实验仪器 | 第93-94页 |
| 1.4 实验场地 | 第94-95页 |
| 1.5 方法 | 第95-98页 |
| 1.5.1. 标本的收集 | 第95页 |
| 1.5.2. 小檗碱刺激培养 | 第95页 |
| 1.5.3. 分离血浆 | 第95页 |
| 1.5.4. PBMCs的提取 | 第95页 |
| 1.5.5. PBMCs总RNA提取 | 第95-96页 |
| 1.5.6. RNA质量鉴定 | 第96页 |
| 1.5.7 制备cDNA | 第96-97页 |
| 1.5.8 NLRP3炎性体基因转录剪接体qRT-PCR检测 | 第97页 |
| 1.5.9 ELISA检测 | 第97-98页 |
| 1.6 统计学分析 | 第98页 |
| 2. 实验结果 | 第98-101页 |
| 2.1 小檗碱对痛风患者NLRP3炎性体基因转录剪接体MRNA表达的影响 | 第98-99页 |
| 2.2 小檗碱刺激后痛风患者血浆中CASP1蛋白的表达 | 第99-101页 |
| 3. 讨论 | 第101-104页 |
| 附图 | 第104-106页 |
| 总结 | 第106-108页 |
| 问题与展望 | 第108-109页 |
| 致谢 | 第109-110页 |
| 参考文献 | 第110-118页 |
| 附件1 | 第118-134页 |
| 综述(一) 核苷酸结合寡聚化结构域样受体3炎性体在痛风炎症反应中的作用 | 第118-125页 |
| 参考文献 | 第121-125页 |
| 综述(二) 基因转录剪接体：潜在的病变位点 | 第125-134页 |
| 参考文献 | 第129-134页 |
| 附件2：在读期间参与课题 | 第134-135页 |
| 附件3：在读期间公开发表的学术论文 | 第135-137页 |
