| 中文摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-28页 |
| 1 黄萎病菌的研究进展 | 第10-28页 |
| 1.1 黄萎病菌的分类学意义 | 第10-19页 |
| 1.1.1 大丽轮枝菌 | 第11-12页 |
| 1.1.2 棉花黄萎病的疾病周期 | 第12-14页 |
| 1.1.3 微菌核的形成 | 第14-15页 |
| 1.1.4 棉花黄萎病菌的致病机理 | 第15-19页 |
| 1.2 棉花对黄萎病的抗性机理 | 第19-22页 |
| 1.2.1 植物对黄萎病菌的形态抗性 | 第19-20页 |
| 1.2.2 棉花对黄萎病的生理生化抗性 | 第20-21页 |
| 1.2.3 植株防御黄萎病菌的信号 | 第21-22页 |
| 1.3 棉花黄萎病的防控策略 | 第22页 |
| 1.4 农杆菌介导真菌遗传转化的研究进展 | 第22-28页 |
| 1.4.1 农杆菌介导遗传转化的机理 | 第22-23页 |
| 1.4.2 农杆菌介导遗传转化的特点 | 第23-24页 |
| 1.4.3 影响农杆菌介导真菌遗传转化效率的因素 | 第24-25页 |
| 1.4.4 农杆菌介导的大丽轮枝菌随机插入突变研究 | 第25-26页 |
| 1.4.5 分离T-DNA插入位点两翼的基因组序列 | 第26-28页 |
| 第二部分 引言 | 第28-30页 |
| 2.1 论文的立题依据 | 第28-29页 |
| 2.2 论文的技术路线 | 第29-30页 |
| 第三部分 棉花黄萎病菌T-DNA插入突变体系的建立 | 第30-59页 |
| 3.1 实验材料 | 第30-31页 |
| 3.1.1 菌株与载体 | 第30页 |
| 3.1.2 主要化学试剂 | 第30页 |
| 3.1.3 仪器设备 | 第30-31页 |
| 3.1.4 缓冲液及培养基 | 第31页 |
| 3.2 实验方法 | 第31-38页 |
| 3.2.1 大肠杆菌感受态的制备与转化 | 第31-32页 |
| 3.2.2 DNA片段的分子操作 | 第32页 |
| 3.2.3 农杆菌感受态的制备与转化 | 第32-33页 |
| 3.2.4 大丽轮枝菌对潮霉素的敏感梯度测试 | 第33页 |
| 3.2.5 根癌农杆菌介导大丽轮枝菌的遗传转化 | 第33-34页 |
| 3.2.6 大丽轮枝菌DNA的提取 | 第34-35页 |
| 3.2.7 转化子的PCR分析 | 第35-36页 |
| 3.2.8 转化子的遗传稳定性分析 | 第36页 |
| 3.2.9 T-DNA插入突变体的保存 | 第36页 |
| 3.2.10 大丽轮枝菌突变体的筛选 | 第36-37页 |
| 3.2.11 T-DNA插入侧翼序列的扩增 | 第37页 |
| 3.2.12 T-DNA插入侧翼序列的克隆和测序 | 第37-38页 |
| 3.2.13 T-DNA插入侧翼序列的比对分析 | 第38页 |
| 3.3 结果与分析 | 第38-55页 |
| 3.3.1 大丽轮枝菌对潮霉素B的抗性检测 | 第38-40页 |
| 3.3.2 双元载体pPK2转入到根癌农杆菌LBA4404 | 第40-41页 |
| 3.3.3 大丽轮枝菌遗传转化条件的优化 | 第41-44页 |
| 3.3.4 转化子的分子验证 | 第44-45页 |
| 3.3.5 转化子的遗传稳定性分析 | 第45-46页 |
| 3.3.6 大丽轮枝菌突变体的筛选 | 第46-53页 |
| 3.3.7 T-DNA插入位点的侧翼序列扩增 | 第53-54页 |
| 3.3.8 T-DNA插入位点及两翼的基因组序列特征分析 | 第54-55页 |
| 3.4 讨论 | 第55-59页 |
| 3.4.1 关于农杆菌介导的遗传转化体系 | 第55-56页 |
| 3.4.2 关于T-DNA插入突变体系的质量的评价 | 第56-57页 |
| 3.4.3 关于突变体的筛选 | 第57-58页 |
| 3.4.4 关于T-DNA侧翼序列的获得 | 第58页 |
| 3.4.5 关于T-DNA插入位点 | 第58-59页 |
| 第四部分 总结 | 第59-61页 |
| 4.1 适用于大丽轮枝菌T-DNA插入突变体系的建立 | 第59页 |
| 4.2 大丽轮枝菌T-DNA插入突变体库的质量评价 | 第59页 |
| 4.3 大丽轮枝菌突变体的筛选 | 第59页 |
| 4.4 突变体插入序列的分析 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 附录 | 第69-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 硕士研究生期间所发表论文 | 第78页 |
