中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第1章 前言 | 第11-20页 |
1.1 甜菜M14品系简介 | 第11-12页 |
1.2 植物盐胁迫 | 第12页 |
1.3 盐胁迫下植物磷酸化蛋白质组学概述 | 第12-15页 |
1.3.1 磷酸化蛋白简介 | 第12-13页 |
1.3.2 植物响应盐胁迫磷酸化蛋白质组学研究 | 第13-15页 |
1.4 磷酸化肽段的富集方法 | 第15-16页 |
1.4.1 固相金属离子亲和层析富集法 | 第15页 |
1.4.2 金属氧化物富集法 | 第15-16页 |
1.4.3 阳离子交换色谱法 | 第16页 |
1.5 磷酸化蛋白质组学技术 | 第16-18页 |
1.5.1 结合荧光染料的双向凝胶电泳技术 | 第16-17页 |
1.5.2 基于质谱的蛋白质组学技术 | 第17-18页 |
1.6 本研究的目的及意义 | 第18-19页 |
1.7 本研究的技术路线 | 第19-20页 |
第2章 材料与方法 | 第20-30页 |
2.1 试验材料 | 第20-21页 |
2.1.1 植物材料 | 第20页 |
2.1.2 主要试剂及试剂盒 | 第20页 |
2.1.3 主要试验仪器 | 第20-21页 |
2.1.4 试验所需主要溶液及试剂的配制 | 第21页 |
2.2 试验方法 | 第21-30页 |
2.2.1 植物材料的种植和NaCl处理 | 第21页 |
2.2.2 甜菜M14品系最佳盐胁迫响应时间的确定 | 第21-22页 |
2.2.2.1 SOD活性测定 | 第21-22页 |
2.2.2.2 POD活性测定 | 第22页 |
2.2.3 甜菜M14品系磷酸化蛋白质的提取 | 第22-24页 |
2.2.4 蛋白质的定量 | 第24页 |
2.2.5 双向电泳及凝胶的Pro-Q Diamond荧光染色 | 第24-25页 |
2.2.5.1 双向电泳 | 第24-25页 |
2.2.5.2 Pro-Q Diamond荧光染色 | 第25页 |
2.2.5.3 Pro-Q Diamond凝胶图像扫描和分析 | 第25页 |
2.2.6 蛋白质酶解 | 第25-26页 |
2.2.6.1 胶内酶解 | 第25-26页 |
2.2.6.2 溶液内酶解 | 第26页 |
2.2.7 蛋白质除盐 | 第26-27页 |
2.2.8 磷酸化肽段的富集 | 第27页 |
2.2.9 LC-MS/MS质谱鉴定 | 第27页 |
2.2.10 差异表达磷酸化蛋白的功能分类及生物信息学分析 | 第27页 |
2.2.11 信号转导途径差异磷酸化蛋白质编码基因的RT- PCR验证 | 第27-30页 |
第3章 结果与分析 | 第30-45页 |
3.1 甜菜M14品系最佳盐胁迫响应时间的确定 | 第30-31页 |
3.1.1 不同浓度盐胁迫下不同时间点SOD活性变化 | 第30-31页 |
3.1.2 不同浓度盐胁迫下不同时间点POD活性变化 | 第31页 |
3.2 蛋白质的定量分析 | 第31-32页 |
3.3 蛋白质SDS-PAGE检验 | 第32-33页 |
3.4 双向电泳技术获得盐胁迫下磷酸化蛋白质 | 第33-36页 |
3.5 甜菜M14品系盐胁迫下磷酸化蛋白质的质谱鉴定 | 第36-37页 |
3.6 盐应答差异磷酸化蛋白质的功能分类 | 第37-38页 |
3.7 信号转导途径中磷酸化蛋白质编码基因的RT-PCR验证 | 第38-43页 |
3.8 甜菜M14品系响应盐胁迫的代谢网络图谱 | 第43-45页 |
第4章 讨论 | 第45-52页 |
4.1 信号转导途径相关磷酸化蛋白质 | 第45-47页 |
4.2 光合作用相关磷酸化蛋白 | 第47-48页 |
4.3 代谢相关磷酸化蛋白 | 第48-49页 |
4.4 蛋白折叠和降解相关磷酸化蛋白 | 第49页 |
4.5 转录相关磷酸化蛋白 | 第49-50页 |
4.6 胁迫和防御相关蛋白 | 第50页 |
4.7 信号转导途径中磷酸化蛋白质基因水平与蛋白质水平的关系 | 第50-51页 |
4.8 盐胁迫下甜菜M14品系叶片磷酸化蛋白抗盐机制 | 第51-52页 |
结论 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-61页 |
附录 | 第61-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
攻读学位论文期间发表的学术论文 | 第81页 |