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甜菜M14品系响应盐胁迫定量磷酸化蛋白质组学研究

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第1章 前言第11-20页
    1.1 甜菜M14品系简介第11-12页
    1.2 植物盐胁迫第12页
    1.3 盐胁迫下植物磷酸化蛋白质组学概述第12-15页
        1.3.1 磷酸化蛋白简介第12-13页
        1.3.2 植物响应盐胁迫磷酸化蛋白质组学研究第13-15页
    1.4 磷酸化肽段的富集方法第15-16页
        1.4.1 固相金属离子亲和层析富集法第15页
        1.4.2 金属氧化物富集法第15-16页
        1.4.3 阳离子交换色谱法第16页
    1.5 磷酸化蛋白质组学技术第16-18页
        1.5.1 结合荧光染料的双向凝胶电泳技术第16-17页
        1.5.2 基于质谱的蛋白质组学技术第17-18页
    1.6 本研究的目的及意义第18-19页
    1.7 本研究的技术路线第19-20页
第2章 材料与方法第20-30页
    2.1 试验材料第20-21页
        2.1.1 植物材料第20页
        2.1.2 主要试剂及试剂盒第20页
        2.1.3 主要试验仪器第20-21页
        2.1.4 试验所需主要溶液及试剂的配制第21页
    2.2 试验方法第21-30页
        2.2.1 植物材料的种植和NaCl处理第21页
        2.2.2 甜菜M14品系最佳盐胁迫响应时间的确定第21-22页
            2.2.2.1 SOD活性测定第21-22页
            2.2.2.2 POD活性测定第22页
        2.2.3 甜菜M14品系磷酸化蛋白质的提取第22-24页
        2.2.4 蛋白质的定量第24页
        2.2.5 双向电泳及凝胶的Pro-Q Diamond荧光染色第24-25页
            2.2.5.1 双向电泳第24-25页
            2.2.5.2 Pro-Q Diamond荧光染色第25页
            2.2.5.3 Pro-Q Diamond凝胶图像扫描和分析第25页
        2.2.6 蛋白质酶解第25-26页
            2.2.6.1 胶内酶解第25-26页
            2.2.6.2 溶液内酶解第26页
        2.2.7 蛋白质除盐第26-27页
        2.2.8 磷酸化肽段的富集第27页
        2.2.9 LC-MS/MS质谱鉴定第27页
        2.2.10 差异表达磷酸化蛋白的功能分类及生物信息学分析第27页
        2.2.11 信号转导途径差异磷酸化蛋白质编码基因的RT- PCR验证第27-30页
第3章 结果与分析第30-45页
    3.1 甜菜M14品系最佳盐胁迫响应时间的确定第30-31页
        3.1.1 不同浓度盐胁迫下不同时间点SOD活性变化第30-31页
        3.1.2 不同浓度盐胁迫下不同时间点POD活性变化第31页
    3.2 蛋白质的定量分析第31-32页
    3.3 蛋白质SDS-PAGE检验第32-33页
    3.4 双向电泳技术获得盐胁迫下磷酸化蛋白质第33-36页
    3.5 甜菜M14品系盐胁迫下磷酸化蛋白质的质谱鉴定第36-37页
    3.6 盐应答差异磷酸化蛋白质的功能分类第37-38页
    3.7 信号转导途径中磷酸化蛋白质编码基因的RT-PCR验证第38-43页
    3.8 甜菜M14品系响应盐胁迫的代谢网络图谱第43-45页
第4章 讨论第45-52页
    4.1 信号转导途径相关磷酸化蛋白质第45-47页
    4.2 光合作用相关磷酸化蛋白第47-48页
    4.3 代谢相关磷酸化蛋白第48-49页
    4.4 蛋白折叠和降解相关磷酸化蛋白第49页
    4.5 转录相关磷酸化蛋白第49-50页
    4.6 胁迫和防御相关蛋白第50页
    4.7 信号转导途径中磷酸化蛋白质基因水平与蛋白质水平的关系第50-51页
    4.8 盐胁迫下甜菜M14品系叶片磷酸化蛋白抗盐机制第51-52页
结论第52-54页
参考文献第54-61页
附录第61-80页
致谢第80-81页
攻读学位论文期间发表的学术论文第81页

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