免疫质谱检测肝癌患者血清多肽标志物的方法与应用研究
| 缩略词表 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 前言 | 第11-18页 |
| ·研究意义 | 第11-12页 |
| ·研究现状 | 第12-15页 |
| ·本论文研究目的、研究思路、研究策略与研究流程 | 第15-16页 |
| ·本论文的研究内容 | 第16-18页 |
| 第一章 免疫质谱方法的建立 | 第18-29页 |
| 1 材料与仪器 | 第18-19页 |
| ·材料 | 第18页 |
| ·仪器 | 第18-19页 |
| 2 实验方法 | 第19-20页 |
| ·单克隆抗体制备 | 第19页 |
| ·间接ELISA 检测 | 第19页 |
| ·SDS-PAGE | 第19-20页 |
| ·银染方法 | 第20页 |
| ·凝胶扫描 | 第20页 |
| ·免疫亲和富集抗原 | 第20页 |
| ·质谱检测 | 第20页 |
| 3 结果与讨论 | 第20-27页 |
| ·多肽抗原的筛选与合成 | 第20-21页 |
| ·多肽单克隆抗体的制备 | 第21-25页 |
| ·尾血检测 | 第21页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的初筛和复筛 | 第21-22页 |
| ·杂交瘤细胞抗体亚型鉴定 | 第22-23页 |
| ·杂交瘤细胞上清抗体灵敏度 | 第23-24页 |
| ·杂交瘤细胞保存 | 第24页 |
| ·单抗腹水效价、纯化单抗滴度检测 | 第24-25页 |
| ·免疫质谱方法建立和多肽标准品检测 | 第25-27页 |
| 4 本章小结 | 第27-29页 |
| 第二章 免疫质谱方法的优化 | 第29-44页 |
| 1 材料与仪器 | 第29页 |
| ·材料 | 第29页 |
| ·仪器 | 第29页 |
| 2 实验方法 | 第29-31页 |
| ·SDS-PAGE | 第29-30页 |
| ·银染方法 | 第30页 |
| ·凝胶扫描 | 第30页 |
| ·免疫亲和富集抗原 | 第30页 |
| ·质谱检测 | 第30-31页 |
| 3 结果与讨论 | 第31-43页 |
| ·免疫亲和平台制备条件优化 | 第31-38页 |
| ·抗体/载体量比 | 第31-33页 |
| ·抗体联接方式 | 第33-34页 |
| ·抗体孵育环境 | 第34-36页 |
| ·抗体孵育时间 | 第36-38页 |
| ·抗原检测条件优化 | 第38-43页 |
| ·抗原孵育时间 | 第38-39页 |
| ·洗脱缓冲液 | 第39-42页 |
| ·洗脱时间 | 第42-43页 |
| 4 本章小结 | 第43-44页 |
| 第三章 免疫质谱方法的评价 | 第44-49页 |
| 1 材料与仪器 | 第44页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·仪器 | 第44页 |
| 2 实验方法 | 第44-45页 |
| ·免疫亲和富集抗原 | 第44页 |
| ·质谱检测 | 第44-45页 |
| 3 结果与讨论 | 第45-47页 |
| ·线性范围、相关系数和检测限 | 第45-46页 |
| ·准确性和重复性 | 第46页 |
| ·冻融稳定性 | 第46-47页 |
| 4 本章小结 | 第47-49页 |
| 第四章 免疫质谱方法在肝癌血清诊断中的应用 | 第49-57页 |
| 1 材料与仪器 | 第49页 |
| ·材料 | 第49页 |
| ·仪器 | 第49页 |
| 2 实验方法 | 第49-51页 |
| ·样本收集和保存 | 第50页 |
| ·血清预处理 | 第50页 |
| ·有机溶剂沉淀 | 第50页 |
| ·超滤 | 第50页 |
| ·去除IgG 和白蛋白 | 第50页 |
| ·解离白蛋白联接的多肽 | 第50页 |
| ·免疫亲和富集抗原 | 第50页 |
| ·质谱分析 | 第50-51页 |
| ·数据库检索 | 第51页 |
| 3 结果与讨论 | 第51-56页 |
| ·临床血清预处理优化 | 第51-52页 |
| ·临床血清检测 | 第52-56页 |
| 4 本章小结 | 第56-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 附录 | 第62-96页 |
| 综述 | 第96-103页 |
| 参考文献 | 第100-103页 |
| 个人简历 | 第103-104页 |
| 攻读硕士学位期间发表文章与研究成果 | 第104-105页 |
| 致谢 | 第105页 |
