| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 1 文献综述 | 第11-25页 |
| 1.1 黄粉虫概述 | 第11-13页 |
| 1.1.1 黄粉虫生物学特性 | 第11页 |
| 1.1.2 黄粉虫饲养及营养价值 | 第11-12页 |
| 1.1.3 黄粉虫国内外研究进展 | 第12-13页 |
| 1.2 脂肪酸合成关键基因在昆虫中的研究进展 | 第13-23页 |
| 1.2.1 乙酰辅酶A羧化酶（ACC） | 第14-16页 |
| 1.2.2 脂肪酸合成酶（FAS） | 第16-17页 |
| 1.2.3 超长链脂肪酸延伸酶（ELO） | 第17-19页 |
| 1.2.4 脂肪酸去饱和酶（desat或FAD） | 第19-23页 |
| 1.2.5 脂酰辅酶A还原酶（FAR） | 第23页 |
| 1.3 研究目的与展望 | 第23-25页 |
| 2 黄粉虫发育转录组和脂肪酸合成通路分析 | 第25-46页 |
| 2.1 材料与方法 | 第25-29页 |
| 2.1.1 黄粉虫饲养及收集 | 第25页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第25页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第25页 |
| 2.1.4 总RNA提取 | 第25-26页 |
| 2.1.5 cDNA建库及Illumina测序 | 第26页 |
| 2.1.6 reads预处理拼接组装及功能注释 | 第26页 |
| 2.1.7 黄粉虫脂肪酸通路相关基因差异表达 | 第26页 |
| 2.1.8 cDNA合成 | 第26-27页 |
| 2.1.9 黄粉虫脂肪酸基因表达差异qRT-PCR验证 | 第27-28页 |
| 2.1.10 脂肪酸合成通路关键酶系统发育树分析 | 第28页 |
| 2.1.11 黄粉虫脂肪酸提取 | 第28-29页 |
| 2.1.12 黄粉虫脂肪酸GC分析 | 第29页 |
| 2.2 结果与分析 | 第29-44页 |
| 2.2.1 Illumina测序组装及unigenes长度分布 | 第29-30页 |
| 2.2.2 序列同源性分布 | 第30-32页 |
| 2.2.3 序列KEGG库比对及脂肪酸通路表达分析 | 第32-36页 |
| 2.2.4 脂肪酸合成关键基因表达分析和qRT-PCR验证 | 第36-39页 |
| 2.2.5 脂肪酸合成通路关键酶系统发育树分析 | 第39-43页 |
| 2.2.6 黄粉虫脂肪酸成分组成 | 第43-44页 |
| 2.3 讨论与小结 | 第44-46页 |
| 2.3.1 讨论 | 第44-45页 |
| 2.3.2 小结 | 第45-46页 |
| 3 黄粉虫ELO全长扩增及基因特征分析 | 第46-59页 |
| 3.1 材料和方法 | 第46-51页 |
| 3.1.1 黄粉虫收集 | 第46页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第46页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第46页 |
| 3.1.4 黄粉虫总RNA提取 | 第46页 |
| 3.1.5 cDNA合成 | 第46页 |
| 3.1.6 扩基因全长引物设计 | 第46-47页 |
| 3.1.7 基因片段PCR扩增 | 第47-48页 |
| 3.1.8 琼脂糖凝胶电泳 | 第48页 |
| 3.1.9 PCR产物回收 | 第48-49页 |
| 3.1.10 LB培养基制备 | 第49页 |
| 3.1.11 DH5α 感受态细胞的制备 | 第49页 |
| 3.1.12 目的基因的连接与转化 | 第49-50页 |
| 3.1.13 送样测序 | 第50页 |
| 3.1.14 DH5α 中质粒提取 | 第50-51页 |
| 3.1.15 生物信息学分析 | 第51页 |
| 3.2 结果与分析 | 第51-57页 |
| 3.2.1 黄粉虫ELO基因开放阅读框全长获得 | 第51-52页 |
| 3.2.2 TmELO理化性质分析预测 | 第52-55页 |
| 3.2.3 TmELO序列比对和进化树 | 第55-57页 |
| 3.3 讨论与小结 | 第57-59页 |
| 3.3.1 讨论 | 第57-58页 |
| 3.3.2 小结 | 第58-59页 |
| 4 黄粉虫ELO基因异源表达及RNAi | 第59-75页 |
| 4.1 材料和方法 | 第59-66页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第59页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第59页 |
| 4.1.3 YPD培养基及SC-U培养基配制 | 第59-60页 |
| 4.1.4 目的基因转入pYES2 | 第60-61页 |
| 4.1.5 INVSc1转化相关试剂配制 | 第61-62页 |
| 4.1.6 INVSc1酿酒酵母转化 | 第62-63页 |
| 4.1.7 半乳糖诱导表达INVSc1 | 第63页 |
| 4.1.8 酵母脂肪酸提取 | 第63-64页 |
| 4.1.9 酵母脂肪酸GC分析 | 第64页 |
| 4.1.10 酵母表达后PCR验证 | 第64页 |
| 4.1.11 dsRNA引物设计 | 第64-65页 |
| 4.1.12 dsRNA的合成 | 第65-66页 |
| 4.1.13 黄粉虫dsRNA注射 | 第66页 |
| 4.1.14 RNA干扰后qRT-PCR验证 | 第66页 |
| 4.2 结果和分析 | 第66-72页 |
| 4.2.1 酵母表达TmELO验证 | 第66-67页 |
| 4.2.2 TmELO在INVSc1表达 | 第67-68页 |
| 4.2.3 RNAi后相对转录水平表达变化分析 | 第68-70页 |
| 4.2.4 RNAi后黄粉虫变化 | 第70-72页 |
| 4.3 讨论和小结 | 第72-75页 |
| 4.3.1 讨论 | 第72-74页 |
| 4.3.2 小结 | 第74-75页 |
| 5 全文总结和展望 | 第75-76页 |
| 5.1 全文总结 | 第75页 |
| 5.2 创新点 | 第75页 |
| 5.3 展望 | 第75-76页 |
| 个人简历 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-89页 |
