摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6页 |
引言 | 第11页 |
1 文献综述 | 第11-17页 |
1.1 植物成花转变的研究 | 第11-13页 |
1.1.1 光周期途径 | 第11-12页 |
1.1.2 自主开花途径 | 第12-13页 |
1.1.3 赤霉素途径 | 第13页 |
1.1.4 春化途径 | 第13页 |
1.2 肽基脯氨酰顺反异构酶 | 第13-14页 |
1.3 Pin1在植物中的研究 | 第14-15页 |
1.4 竹子成花机理的研究 | 第15-17页 |
2 材料与方法 | 第17-30页 |
2.1 材料 | 第17页 |
2.2 试剂 | 第17-19页 |
2.3 质粒与菌种 | 第19-20页 |
2.3.1 主要菌株 | 第19页 |
2.3.2 实验所需质粒 | 第19-20页 |
2.4 实验方法 | 第20-30页 |
2.4.1 大肠杆菌转化 | 第20页 |
2.4.1.1 大肠杆菌热激感受态的制备 | 第20页 |
2.4.1.2 转化感受态细胞 | 第20页 |
2.4.2 质粒的提取 | 第20-21页 |
2.4.3 农杆菌转化 | 第21-22页 |
2.4.3.1 农杆菌GV3101、EHA105热激转化感受态细胞的制备 | 第21页 |
2.4.3.2 农杆菌菌种GV3101、EHA105的热击转化 | 第21-22页 |
2.4.4 拟南芥的遗传转化 | 第22-23页 |
2.4.4.1 拟南芥的种植 | 第22页 |
2.4.4.2 拟南芥目的基因的侵染 | 第22页 |
2.4.4.3 转基因拟南芥种子的筛选 | 第22页 |
2.4.4.4 DNA提取及鉴定 | 第22-23页 |
2.4.5 转基因拟南芥中相关开花基因的表达量分析 | 第23页 |
2.4.5.1 RNA提取 | 第23页 |
2.4.5.2 RNA的反转录 | 第23页 |
2.4.5.3 荧光定量PCR | 第23页 |
2.4.6 水稻的遗传转化 | 第23-24页 |
2.4.6.1 水稻的遗传转化 | 第23页 |
2.4.6.2 GUS染色鉴定实验 | 第23-24页 |
2.4.7 转基因水稻中开花相关基因的表达量分析 | 第24页 |
2.4.8 PvPin1的启动子克隆 | 第24-25页 |
2.4.8.1 启动子克隆 | 第24-25页 |
2.4.8.2 目的条带序列确定 | 第25页 |
2.4.9 启动子元件预测分析 | 第25-26页 |
2.4.10 脱落酸(ABA)和茉莉酸甲酯(MeJA)处理 | 第26页 |
2.4.11 PvPin1亚细胞定位 | 第26-27页 |
2.4.11.1 亚细胞定位载体构建 | 第26-27页 |
2.4.11.2 细胞定位农杆菌转化 | 第27页 |
2.4.12 PvPin1原核表达载体构建 | 第27-29页 |
2.4.13 PvPin1的小量表达优化 | 第29-30页 |
3 结果与分析 | 第30-40页 |
3.1 PvPin1基因的生物信息学分析 | 第30-31页 |
3.1.1 PvPin1同源氨基酸序列比对 | 第30页 |
3.1.2 系统进化树的分析 | 第30-31页 |
3.2 PvPin1的基因结构分析 | 第31-32页 |
3.3 PvPin1基因过量表达转化野生型拟南芥 | 第32-34页 |
3.3.1 转基因拟南芥表型分析 | 第32-33页 |
3.3.2 转基因拟南芥开花相关基因表达量分析 | 第33-34页 |
3.5 PvPin1基因过表达转化水稻 | 第34-36页 |
3.5.1 转基因水稻表型分析 | 第34-35页 |
3.5.2 转基因水稻开花相关基因表达量分析 | 第35-36页 |
3.7 PvPin1启动子活性分析 | 第36-38页 |
3.7.1 PvPin1启动子克隆 | 第36页 |
3.7.2 PvPin1启动子的元件分析 | 第36-37页 |
3.7.3 ABA和MeJA处理 | 第37-38页 |
3.8 PvPin1的亚细胞定位 | 第38-39页 |
3.9 PvPin1蛋白的小量表达与纯化 | 第39-40页 |
3.9.1 PvPin1重组质粒载体构建 | 第39页 |
3.9.2 重组PvPin1蛋白的可溶性条件优化 | 第39-40页 |
4 结论与讨论 | 第40-44页 |
4.1 结论 | 第40-41页 |
4.2 讨论 | 第41-44页 |
5 参考文献 | 第44-51页 |
个人简介 | 第51页 |
在校期间发表论文情况 | 第51-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
附表 | 第53页 |