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芽孢杆菌yczE基因生防功能分析及表达Harpin蛋白的工程菌防病效果研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
上篇 文献综述第12-33页
 第一章 脂肽类化合物结构及其生防活性第13-23页
  1 简介第13-14页
  2 CLPs的结构第14页
  3 脂肽类生物化合物的应用第14-16页
   ·脂肽类化合物在表面活性剂领域中的应用第14-15页
   ·抗病毒作用第15页
   ·用于防治植物病原菌第15页
   ·除去受污染土壤中的重金属离子第15-16页
   ·降解有害农药第16页
   ·发泡性能第16页
   ·微生物采油第16页
  4 Bacillus CLPs在植物病害生物防治中的作用第16-20页
   ·参与根部定殖第16-17页
   ·参与的直接对抗第17-18页
   ·脂肽类化合物诱导植物系统抗病性第18-20页
     ·植物体内CLPs诱导的防卫相关反应第19页
     ·CLPs诱导不同植物获得抗病活性第19-20页
   ·CLPs的生态学意义第20页
  5 在生物防治中Bacillus产生的其他一些抗生素第20-21页
  6 总结和展望第21-23页
 第二章 Swarming:一种协调一致的细菌活动第23-33页
  1 swarming研究概况第23-24页
  2 Swarming现象的三个阶段第24-25页
   ·营养细胞向swarm细胞的分化第24页
   ·Swarm细胞群体的迁移第24-25页
   ·Consolidation过程第25页
  3 调控swarming的两个关键系统第25-27页
   ·发展的途径:鞭毛操纵和细胞分化第26页
   ·生物合成途径:群体感应系统第26-27页
  4 Swarm细胞的特性第27-28页
  5 影响swarming产生的因素第28-32页
   ·鞭毛的影响第28-31页
     ·鞭毛的基本形态与结构第28-29页
     ·鞭毛的基因与合成的基因控制第29页
     ·细菌的运动及其机制第29-31页
   ·分泌黏液的影响第31页
   ·趋化系统的作用第31-32页
     ·负趋化的理论支持的证据第31页
     ·负趋化的理论的限制第31-32页
  6 Swarming的生物学意义第32-33页
下篇 研究内容第33-69页
 第一章 芽孢杆菌yczE基因生防功能分析第35-51页
  第一节 yczE基因突变菌株的构建第36-43页
   1 材料和方法第36-42页
   ·菌株和培养基第36-37页
   ·酶和引物合成第37-38页
   ·定点突变枯草芽孢杆菌OKB105中的yczE基因第38-42页
     ·芽孢杆菌基因组的提取第38页
     ·扩增基因片段第38-39页
     ·TA克隆连接反应第39页
     ·大肠杆菌感受态的制备(CaCl_2法)第39-40页
     ·连接产物的转化第40页
     ·菌落PCR筛选阳性克隆第40页
     ·质粒的提取第40-41页
     ·酶切反应体系第41页
     ·连接反应体系第41页
     ·连接产物的转化和验证第41页
     ·转化枯草芽孢杆菌OKB105第41页
     ·枯草芽孢杆菌转化子的验证第41-42页
   ·定点突变解淀粉芽孢杆菌FZB42菌株中的yczE基因第42页
   2 结果与分析第42-43页
   ·构建yczE基因突变体第42-43页
   3 讨论第43页
  第二节 野生菌与yczE基因突变体菌株表型实验分析第43-51页
   1 材料与方法第43-45页
   ·生物材料第43-44页
   ·培养基第44页
   ·平板对峙试验第44-45页
   ·血琼平板溶血试验第45页
   ·实验室烟草促生试验第45页
   ·swarming试验第45页
   2 结果与分析第45-48页
   ·平板对峙试验结果第45-46页
   ·血琼脂平板溶血试验结果第46-47页
   ·烟草根系生效果第47-48页
   ·swarming试验结果第48页
   3 讨论第48-51页
 第二章 FZB42与FZB42△yczE swarming现象研究第51-61页
  1 材料和方法第52-56页
   ·菌株第52页
   ·酶和引物合成第52-53页
   ·培养基第53页
   ·swarming扩展分析第53页
   ·电镜观察第53页
   ·生物膜的形成能力第53-54页
   ·Realtime-PCR分析第54-56页
     ·芽孢杆菌RNA的提取第54-55页
     ·RNA反转录成cDNA和PCR检测第55页
     ·Quantiative RT-PCR(qRT-PCR)第55-56页
  2 结果与分析第56-59页
   ·swarm扩展半径测量第56-57页
   ·菌体鞭毛数和细胞排列情况观察第57-58页
   ·生物膜形成第58页
   ·qRT-PCR第58-59页
  3 讨论第59-61页
 第三章 表达Harpin蛋白的芽孢杆菌工程菌防治水稻白叶枯病的研究第61-69页
  1 材料与方法第62-64页
   ·植物材料、供试菌株和培养基第62页
   ·芽孢杆菌的发酵第62页
   ·平板对峙试验第62-63页
   ·温室生防及促生试验第63页
   ·滁州大田生防试验第63-64页
   ·江宁大田促生试验第64页
   ·数据分析第64页
  2 结果与分析第64-67页
   ·平板对峙试验结果第64-65页
   ·芽孢杆菌防治水稻白叶枯效果第65-66页
   ·芽孢杆菌对水稻促生效果第66-67页
  3 讨论第67-69页
参考文献第69-77页
附录第77-87页
致谢第87-89页
攻读硕士学位期间发表的论文第89页

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