| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 1.前言 | 第12-19页 |
| 1.1 课题的提出 | 第12页 |
| 1.2 研究进展 | 第12-17页 |
| 1.2.1 柑橘果实成熟机理研究进展 | 第12-13页 |
| 1.2.2 果实成熟相关转录因子的功能研究 | 第13-16页 |
| 1.2.3 MYB转录因子研究进展 | 第16-17页 |
| 1.3 研究目的和意义 | 第17-18页 |
| 1.4 研究内容和技术路线 | 第18-19页 |
| 2.材料与方法 | 第19-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第19页 |
| 2.1.2 菌株、载体及主要试剂 | 第19页 |
| 2.2 方法 | 第19-32页 |
| 2.2.1 基因克隆及生物信息学分析 | 第19-21页 |
| 2.2.2 亚细胞定位载体构建 | 第21-24页 |
| 2.2.3 烟草瞬时表达 | 第24-25页 |
| 2.2.4 转录活性分析载体构建 | 第25-26页 |
| 2.2.5 酵母转化 | 第26-27页 |
| 2.2.6 转录因子表达模式分析 | 第27-28页 |
| 2.2.7 超表达载体构建 | 第28-29页 |
| 2.2.8 番茄遗传转化 | 第29-30页 |
| 2.2.9 番茄阳性鉴定 | 第30-31页 |
| 2.2.10 转基因番茄基因半定量 | 第31-32页 |
| 3.结果与分析 | 第32-50页 |
| 3.1 基因克隆与生物信息学分析 | 第32-39页 |
| 3.1.1 基因全长克隆 | 第32-33页 |
| 3.1.2 Cs2g27940和Cs3g23950基因的进化分析 | 第33页 |
| 3.1.3 基因保守结构域分析 | 第33-34页 |
| 3.1.4 一级结构预测 | 第34页 |
| 3.1.5 氨基酸序列预测 | 第34-35页 |
| 3.1.6 启动子克隆 | 第35-36页 |
| 3.1.7 顺式作用结合元件分析 | 第36-39页 |
| 3.2 转录因子亚细胞定位 | 第39-41页 |
| 3.2.1 载体构建 | 第39-40页 |
| 3.2.2 亚细胞定位 | 第40-41页 |
| 3.3 基因的转录激活功能 | 第41-42页 |
| 3.3.1 构建酵母单杂交质粒 | 第41页 |
| 3.3.2 酵母中转录激活活性鉴定 | 第41-42页 |
| 3.4 转录因子表达模式分析 | 第42-43页 |
| 3.5 超表达载体的构建 | 第43-45页 |
| 3.5.1 目的基因克隆及重组质粒酶切 | 第43-44页 |
| 3.5.2 农杆菌目的基因PCR阳性检测 | 第44-45页 |
| 3.6 农杆菌介导的番茄的遗传转化 | 第45-46页 |
| 3.7 转基因番茄获得 | 第46-50页 |
| 3.7.1 转基因植株DNA水平的阳性鉴定 | 第46页 |
| 3.7.2 转基因植株的半定量检测 | 第46-47页 |
| 3.7.3 转基因番茄的性状统计 | 第47-50页 |
| 4 讨论 | 第50-54页 |
| 4.1 基因序列分析 | 第50页 |
| 4.2 农杆菌介导的番茄转化体系的探讨 | 第50-51页 |
| 4.3 目的基因在柑橘果实成熟中的功能探讨 | 第51-53页 |
| 4.4 后续研究设想 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-64页 |
| 附录 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |