ACKNOWLEDGEMENTS | 第4-5页 |
Preface | 第5-10页 |
List of Tables | 第10-11页 |
List of Figures | 第11-13页 |
1- INTRODUCTION | 第13-17页 |
2- LITERATURE REVIEW | 第17-43页 |
2.1 Genetic Transformation of Wheat | 第17-18页 |
2.2 Genetic Engineering of Wheat for Abiotic Stresses | 第18-21页 |
2.3 Transformation Methods Used for Wheat | 第21-35页 |
2.3.1 Direct Methods | 第21-27页 |
2.3.1.1 Simple direct methods | 第21-23页 |
2.3.1.2 Bilolistic/microprojectile bombardment | 第23-27页 |
2.3.2 Indirect Methods | 第27-35页 |
2.3.2.1 Agrobacterium-Mediated Transformation | 第27-32页 |
2.3.2.2 Agrobacterium-Mediated inplanta Transformation | 第32-35页 |
2.4 Genetic Markers | 第35-40页 |
2.4.1 Scorable/Screenable Markers | 第35-37页 |
2.4.2 Selectable Markers | 第37-40页 |
2.4.2.1 Antibiotic Resistance Markers | 第37-39页 |
2.4.2.2 Herbicide Resistance Markers | 第39-40页 |
2.4.2.3 Metabolic/Auxotrophic Marker Genes | 第40页 |
2.5 Promoters | 第40-43页 |
3 GENE GUN TRANSFORMATION OF WHEAT | 第43-61页 |
3.1 MATERIALS AND METHODS | 第43-49页 |
3.1.1 Callus Induction | 第43页 |
3.1.2 Osmotic Treatment | 第43-44页 |
3.1.3 Plasmid Vector | 第44页 |
3.1.4 Extraction of Plasmid DNA | 第44-45页 |
3.1.5 Preparing Micro-carriers | 第45-46页 |
3.1.6 Coating plasmid DNA onto Micro-Carriers | 第46页 |
3.1.7 Bombardment of Callus | 第46页 |
3.1.8 Selection and regeneration | 第46-47页 |
3.1.9 Extraction of genomic DNA from leaves | 第47页 |
3.1.10 PCR (Polymerase Chain Reaction) Analysis | 第47-48页 |
3.1.11 Phosphinothricin Leaf Paint Assay | 第48-49页 |
3.1.12 Salt tolerance | 第49页 |
3.2 RESULTS | 第49-56页 |
3.2.1 Selection | 第49-50页 |
3.2.2 Regeneration | 第50-51页 |
3.2.3 Screening of Transformants | 第51-56页 |
3.2.3.1 PCR test | 第51页 |
3.2.3.2 PPT Leaf-painting | 第51-56页 |
3.2.3.3 Salt tolerance | 第56页 |
3.3 DISCUSSION | 第56-59页 |
3.5 CONCLUSION | 第59-61页 |
4 AGROBACTERIUM-MEDIATED TRANSFORMATION OF WHEAT | 第61-76页 |
4.1 MATERIALS AND METHODS | 第61-64页 |
4.1.1 Callus Induction | 第61-62页 |
4.1.2 Agrobacterium Culture | 第62页 |
4.1.3 Inoculation and co-cultivation | 第62页 |
4.1.4 Selection and Regeneration | 第62-63页 |
4.1.5 Molecular Characterization of Putative Transformants | 第63页 |
4.1.6 Extraction of Plasmid DNA | 第63-64页 |
4.1.7 Determination of osmotic stress resistance | 第64页 |
4.2 RESULTS | 第64-71页 |
4.2.1 Selection | 第64-66页 |
4.2.2 Regeneration | 第66页 |
4.2.3 PCR test for transformed status of plants | 第66-70页 |
4.2.4 Salt tolerance of transformed plants | 第70-71页 |
4.3 DISCUSSION | 第71-74页 |
4.4 CONCLUSION | 第74-76页 |
5 IN PLANTA APICAL MERISTEM TRANSFORMATION OF WHEAT | 第76-96页 |
5.1 MATERIALS AND METHODS | 第76-81页 |
5.1.1 Plant material, Inoculation, Co-cultivation and Selection | 第76-80页 |
5.1.1.1 Transient GUS expression experiments | 第76-77页 |
5.1.1.2 Transformation of apical meristem after germination | 第77-79页 |
5.1.1.3 Transformation of apical meristem before germination | 第79-80页 |
5.1.2. GUS Assay | 第80页 |
5.1.3 Molecular Evaluation of Putative Transformants | 第80-81页 |
5.2 RESULTS | 第81-89页 |
5.2.1 Transient GUS expression | 第81-82页 |
5.2.2 GUS expression in inflorescences from meristems inoculation after germination | 第82-84页 |
5.2.3 GUS expression in inflorescences after inoculation of meristems before seed germination | 第84-86页 |
5.2.4 PCR Analysis of T1 generation from GUS positive plants | 第86页 |
5.2.5 Transformation of apical meristems with BADH and nptII | 第86-88页 |
5.2.6 PCR test of kanamycim resistant plants | 第88-89页 |
5.3 DISCUSSION | 第89-94页 |
5.4 CONCLUSION | 第94-96页 |
6 BADH TRANSGENE AND SALT TOLERANCE | 第96-99页 |
7 SUMMARY | 第99页 |
8 SUMMARY IN CHINESE | 第102-105页 |
9 REFERENCES | 第105-122页 |