英文缩写词表 | 第7-9页 |
前言 | 第9-11页 |
文献回顾 | 第11-31页 |
1 RNAi 研究的历史及概况 | 第11-12页 |
2 RNAi 的作用机制 | 第12-23页 |
2.1 转录后沉默机制 | 第12-17页 |
2.2 基因组DNA 甲基化机制 | 第17-19页 |
2.3 转译水平的基因沉默机制 | 第19-23页 |
3 RNAi 技术的应用 | 第23-31页 |
3.1 研究基因功能 | 第23-24页 |
3.2 疾病治疗 | 第24-31页 |
材料与方法 | 第31-48页 |
1 主要材料 | 第31-35页 |
1.1 限制性内切酶及其它试剂 | 第31页 |
1.2 质粒与菌株 | 第31页 |
1.3 培养基 | 第31-32页 |
1.4 引物的合成及用途 | 第32-33页 |
1.5 细胞株 | 第33页 |
1.6 仪器设备 | 第33-35页 |
2 主要方法 | 第35-48页 |
2.1 相关质粒的构建 | 第35-40页 |
2.2 U6-shRNA PCR Cassette 的制备 | 第40页 |
2.3 细胞转染 | 第40-45页 |
2.4 Vero 细胞病毒保护实验 | 第45-46页 |
2.5 半定量RT-PCR | 第46-48页 |
实验结果 | 第48-60页 |
1 外源基因RNAi 技术平台的建立 | 第48-53页 |
1.1 顺式双色荧光RNAi 系统的构建及其RNAi 研究 | 第48-51页 |
1.2 反式双色荧光RNAi 系统的构建及其RNAi 研究 | 第51-53页 |
2 反式双色荧光RNAi 技术平台在SARS-CoV NP 的RNAi 研究中的应用 | 第53-56页 |
2.1 针对SARS-CoV NP 的反式双色荧光RNAi 系统的构建 | 第54-55页 |
2.2 针对SARS-CoV NP 的反式双色荧光RNAi 系统对SARS-CoV NP 表达的RNAi 研究 | 第55-56页 |
3 U6-shRNA PCR Cassette 对SARS-CoV NP 表达的RNAi 研究及对细胞非特异性激活的研究 | 第56-60页 |
3.1 U6-shRNA-PCR Cassette 对SARS-CoV NP 表达的RNAi 研究 | 第57-58页 |
3.2 U6-shRNA-PCR Cassette 对细胞非特异性激活的研究 | 第58-60页 |
图和照片 | 第60-86页 |
讨论 | 第86-107页 |
1 siRNA 制备方法的选择 | 第86-93页 |
1.1 shRNA 表达载体 | 第86-91页 |
1.2 shRNA 表达框架 | 第91-93页 |
2 siRNA 序列的选择 | 第93-97页 |
2.1 针对目标基因的siRNA 的选择 | 第93-95页 |
2.2 对照siRNA 序列的选择 | 第95-96页 |
2.3 loop 序列的选择 | 第96-97页 |
3 干涉核酸序列的转染 | 第97-99页 |
4 RNAi 效应的检测 | 第99-107页 |
4.1 目标基因表达被干涉的检测 | 第99-100页 |
4.2 非特异性效应的检测 | 第100-107页 |
结论 | 第107-108页 |
参考文献 | 第108-117页 |
攻读博士学位期间已(待)发表的文章 | 第117-118页 |
中文摘要 | 第118-123页 |
ABSTRACT | 第123页 |
致谢 | 第128-129页 |
个 人 简 历 | 第129页 |