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双色荧光RNAi技术平台的建立和抗SARS-CoV RNAi的研究

英文缩写词表第7-9页
前言第9-11页
文献回顾第11-31页
    1 RNAi 研究的历史及概况第11-12页
    2 RNAi 的作用机制第12-23页
        2.1 转录后沉默机制第12-17页
        2.2 基因组DNA 甲基化机制第17-19页
        2.3 转译水平的基因沉默机制第19-23页
    3 RNAi 技术的应用第23-31页
        3.1 研究基因功能第23-24页
        3.2 疾病治疗第24-31页
材料与方法第31-48页
    1 主要材料第31-35页
        1.1 限制性内切酶及其它试剂第31页
        1.2 质粒与菌株第31页
        1.3 培养基第31-32页
        1.4 引物的合成及用途第32-33页
        1.5 细胞株第33页
        1.6 仪器设备第33-35页
    2 主要方法第35-48页
        2.1 相关质粒的构建第35-40页
        2.2 U6-shRNA PCR Cassette 的制备第40页
        2.3 细胞转染第40-45页
        2.4 Vero 细胞病毒保护实验第45-46页
        2.5 半定量RT-PCR第46-48页
实验结果第48-60页
    1 外源基因RNAi 技术平台的建立第48-53页
        1.1 顺式双色荧光RNAi 系统的构建及其RNAi 研究第48-51页
        1.2 反式双色荧光RNAi 系统的构建及其RNAi 研究第51-53页
    2 反式双色荧光RNAi 技术平台在SARS-CoV NP 的RNAi 研究中的应用第53-56页
        2.1 针对SARS-CoV NP 的反式双色荧光RNAi 系统的构建第54-55页
        2.2 针对SARS-CoV NP 的反式双色荧光RNAi 系统对SARS-CoV NP 表达的RNAi 研究第55-56页
    3 U6-shRNA PCR Cassette 对SARS-CoV NP 表达的RNAi 研究及对细胞非特异性激活的研究第56-60页
        3.1 U6-shRNA-PCR Cassette 对SARS-CoV NP 表达的RNAi 研究第57-58页
        3.2 U6-shRNA-PCR Cassette 对细胞非特异性激活的研究第58-60页
图和照片第60-86页
讨论第86-107页
    1 siRNA 制备方法的选择第86-93页
        1.1 shRNA 表达载体第86-91页
        1.2 shRNA 表达框架第91-93页
    2 siRNA 序列的选择第93-97页
        2.1 针对目标基因的siRNA 的选择第93-95页
        2.2 对照siRNA 序列的选择第95-96页
        2.3 loop 序列的选择第96-97页
    3 干涉核酸序列的转染第97-99页
    4 RNAi 效应的检测第99-107页
        4.1 目标基因表达被干涉的检测第99-100页
        4.2 非特异性效应的检测第100-107页
结论第107-108页
参考文献第108-117页
攻读博士学位期间已(待)发表的文章第117-118页
中文摘要第118-123页
ABSTRACT第123页
致谢第128-129页
个 人 简 历第129页

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