| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-24页 |
| 1 eui突变体及其国内外研究进展 | 第13-16页 |
| 2 植物株高突变体生理学和分子生物学研究进展 | 第16-22页 |
| 3 基因图位克隆简述 | 第22-23页 |
| 4 博士论文选题的意义和目标 | 第23-24页 |
| 第二章 eui突变体生理学和细胞形态学研究 | 第24-38页 |
| 1 材料与方法 | 第24-28页 |
| 1.1 植物材料 | 第24页 |
| 1.2 eui突变体植株形态学研究 | 第24-25页 |
| 1.2.1 取材和统计方法 | 第24页 |
| 1.2.2 307T和珍汕97／308D及其F2群体的观察 | 第24-25页 |
| 1.3 eui植株对暗处理的反应实验 | 第25页 |
| 1.4 eui突变体的激素生理学研究 | 第25页 |
| 1.4.1 eui突变体对外施GA敏感性反应的研究 | 第25页 |
| 1.4.2 赤霉素类物质(GAs)和油菜素内酯类物质(BRs)的测定 | 第25页 |
| 1.5 eui突变体细胞生物学研究 | 第25-28页 |
| 1.5.1 取材 | 第25页 |
| 1.5.2 材料的固定和包埋 | 第25-27页 |
| 1.5.3 切片和展片 | 第27-28页 |
| 1.5.4 观察与摄像 | 第28页 |
| 2 eui突变体生理学和细胞形态学研究结果与分析 | 第28-38页 |
| 2.1 形态学研究结果与分析 | 第28-29页 |
| 2.1.1 307T和珍汕97形态学研究结果与分析 | 第28-29页 |
| 2.1.2 307T和珍汕97 F2群体观察结果与分析 | 第29页 |
| 2.2 307T和308D对暗处理反应结果与分析 | 第29-30页 |
| 2.3 eui突变体对外施GA敏感性反应结果与分析 | 第30页 |
| 2.4 GA类物质和BR类物质的测定结果分析 | 第30-33页 |
| 2.4.1 BR类物质测定结果与分析 | 第30-31页 |
| 2.4.2 307T和308D内源GA类物质测定结果与分析 | 第31-33页 |
| 2.5 307T和308D细胞切片观察结果与分析 | 第33-38页 |
| 第三章 水稻Eui基因精细定位 | 第38-45页 |
| 1 材料与方法 | 第38-39页 |
| 1.1 Eui基因图位克隆所用F2群体的构建 | 第38页 |
| 1.2 F2群体DNA的提取 | 第38页 |
| 1.3 CAPS遗传标记的筛选 | 第38页 |
| 1.4 CAPS遗传标记在F2群体中分析 | 第38-39页 |
| 1.5 目的基因区域DNA测序 | 第39页 |
| 2 实验结果与分析 | 第39-45页 |
| 2.1 CAPS鉴定结果 | 第39-41页 |
| 2.2 遗传连锁分析 | 第41页 |
| 2.3 Eui基因初步定位 | 第41页 |
| 2.4 Eui基因精细定位 | 第41-42页 |
| 2.5 Eui基因高密度连锁图谱及其BAC重叠群的构建 | 第42-44页 |
| 2.6 候选基因区域内碱基序列分析 | 第44页 |
| 2.7 目的基因区域DNA碱基突变位点结果与分析 | 第44-45页 |
| 第四章 Eui基因的功能互补实验 | 第45-62页 |
| 1 材料与方法 | 第45-54页 |
| 1.1 表达载体的构建 | 第45-49页 |
| 1.1.1 TAC表达载体构建所用日本晴BAC(CUGI)的筛选 | 第45页 |
| 1.1.2 TAC质粒表达载体 | 第45-46页 |
| 1.1.3 BAC质粒的提取 | 第46-47页 |
| 1.1.4 BAC质粒DNA部分酶切 | 第47页 |
| 1.1.5 BAC质粒DNA部分酶切后的回收 | 第47页 |
| 1.1.6 连接反应 | 第47-48页 |
| 1.1.7 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第48页 |
| 1.1.8 电击转化大肠杆菌 | 第48页 |
| 1.1.9 转化鉴定 | 第48页 |
| 1.1.10 Southern blot筛选TAC库阳性克隆 | 第48-49页 |
| 1.1.11 阳性克隆TAC质粒末端测序 | 第49页 |
| 1.1.12 亚克隆表达载体的构建 | 第49页 |
| 1.2 农杆菌感受态细胞的制备 | 第49页 |
| 1.3 电击转化农杆菌 | 第49页 |
| 1.4 农杆菌转化鉴定 | 第49页 |
| 1.5 转基因实验材料与方法 | 第49-52页 |
| 1.5.1 水稻转化受体的确定 | 第49-50页 |
| 1.5.2 水稻幼胚的获得 | 第50页 |
| 1.5.3 愈伤组织的继代培养 | 第50页 |
| 1.5.4 由成熟胚获得愈伤组织 | 第50页 |
| 1.5.5 根癌农杆菌的培养 | 第50页 |
| 1.5.6 水稻愈伤与根癌农杆菌的共培养 | 第50页 |
| 1.5.7 抗性愈伤的筛选及植株再生 | 第50页 |
| 1.5.8 生根和移栽 | 第50-51页 |
| 1.5.9 基因枪轰击转化 | 第51页 |
| 1.5.10 基因枪轰击愈伤组织 | 第51-52页 |
| 1.5.11 轰击后抗性愈伤组织筛选及植株再生 | 第52页 |
| 1.6 转基因植株的鉴定 | 第52-54页 |
| 1.6.1 基因植株的PCR鉴定 | 第52页 |
| 1.6.2 转基因植株的Southern blot鉴定 | 第52-54页 |
| 2 结果与分析 | 第54-62页 |
| 2.1 表达载体构建结果与分析 | 第54-56页 |
| 2.1.1 BAC质粒DNA部分酶切结果 | 第54页 |
| 2.1.2 TAC表达载体插入片断的大小电泳鉴定 | 第54-55页 |
| 2.1.3 TAC亚克隆库筛选结果 | 第55页 |
| 2.1.4 几个TAC表达载体插入片断的大小及其位置 | 第55-56页 |
| 2.1.5 几个亚克隆表达载体中插入片断的大小与位置 | 第56页 |
| 2.2 转化结果与分析 | 第56-59页 |
| 2.3 转基因阳性植株T1代的表型分析 | 第59页 |
| 2.4 转基因植株PCR鉴定结果与分析 | 第59-60页 |
| 2.5 转基因植株Sourthern blotting鉴定结果与分析 | 第60页 |
| 2.6 功能互补转化实验结果统计 | 第60-62页 |
| 第五章 全文讨论 | 第62-71页 |
| 全文参考文献 | 第71-81页 |
| 附录A | 第81-82页 |
| 附录B | 第82-85页 |
| 附录C | 第85-87页 |
| 附录D | 第87-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
