| 中文摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9页 |
| 第一篇 文献综述 | 第12-35页 |
| 第一章 生物体内活性氧及活性氧清除系统 | 第12-18页 |
| 1 自由基 | 第12页 |
| 2 氧与自由基 | 第12-13页 |
| 3 机体内氧自由基产生的主要部位 | 第13-15页 |
| 4 机体内氧自由基的清除 | 第15-18页 |
| 第二章 超氧化物歧化酶的研究进展 | 第18-35页 |
| 1 SOD的分类 | 第18-21页 |
| 1.1 CuZn-SOD的分子结构及理化性质 | 第18-19页 |
| 1.2 Mn-SOD、Fe-SOD的结构及理化性质 | 第19-21页 |
| 2 SOD的分布 | 第21页 |
| 3 SOD的分子进化 | 第21-23页 |
| 4 SOD基因的结构 | 第23页 |
| 5 SOD突变体及其在生物学研究中的作用 | 第23-27页 |
| 5.1 细菌SOD突变体的构建 | 第24页 |
| 5.2 细胞质SOD突变 | 第24-26页 |
| 5.3 细胞质外的SOD突变 | 第26-27页 |
| 5.4 细菌SOD突变体的应用 | 第27页 |
| 6 大肠杆菌Mn-SOD基因表达的调控 | 第27-30页 |
| 6.1 soxRS对Mn-SOD表达的调控 | 第27-28页 |
| 6.2 Fur蛋白对Mn-SOD表达的调控 | 第28页 |
| 6.3 arcAB对Mn-SOD表达的调控 | 第28页 |
| 6.4 DNA的构像及整合宿主因子对Mn-SOD表达的影响 | 第28-29页 |
| 6.5 Mn-SOD活性的翻译后水平调控 | 第29-30页 |
| 7 SOD基因表达调控的分子机理 | 第30-31页 |
| 8 SOD在维持氧自由基平衡中的作用 | 第31-32页 |
| 9 SOD基因的克隆及表达 | 第32页 |
| 10 SOD基因工程的研究 | 第32-33页 |
| 11 本研究的立论依据和研究意义 | 第33-35页 |
| 第二篇 研究报告 | 第35-108页 |
| 第一章 蜡样芽孢杆菌M22锰超氧化物歧化酶基因的克隆及在大肠杆菌中表达 | 第35-62页 |
| 1 材料与方法 | 第35-47页 |
| 1.1 试验材料 | 第35-39页 |
| 1.2 试验方法 | 第39-47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-60页 |
| 2.1 简并引物的设计 | 第47-48页 |
| 2.2 简并引物PCR扩增Mn-SOD基因核心区结果 | 第48页 |
| 2.3 测序结果及序列分析 | 第48-50页 |
| 2.4 扩增片段推定氨基酸序列在线BLAST检索 | 第50-51页 |
| 2.5 反向PCR内、外部特异引物的设计 | 第51页 |
| 2.6 反向PCR扩增Mn-SOD基因 | 第51-52页 |
| 2.7 Mn-SOD基因完整序列的克隆及推定氨基酸序列分析 | 第52-57页 |
| 2.8 Mn-SOD基因在原核细胞中的表达及表达产物的鉴定 | 第57-60页 |
| 3 小结与讨论 | 第60-62页 |
| 第二章 蜡样芽孢杆菌M22铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆及在E.coli中表达 | 第62-82页 |
| 1 材料与方法 | 第63-65页 |
| 1.1 试验材料 | 第63页 |
| 1.2 试验方法 | 第63-65页 |
| 2 结果与分析 | 第65-80页 |
| 2.1 引物设计 | 第65-66页 |
| 2.2 PCR扩增结果 | 第66-67页 |
| 2.3 CnZn-SOD基因片段及推定氨基酸序列分析 | 第67-68页 |
| 2.4 CuZn-SOD基因片段推定氨基酸序列在线BLAST检索 | 第68-69页 |
| 2.5 特异引物的设计及锚定物序列 | 第69-70页 |
| 2.6 CuZn-SOD旁侧序列的克隆 | 第70-73页 |
| 2.7 CuZn-SOD基因序列拼接及其推定氨基酸序列分析 | 第73-75页 |
| 2.8 CuZn-SOD基因在原核细胞中的表达及表达产物的鉴定 | 第75-80页 |
| 3 小结和讨论 | 第80-82页 |
| 第三章 蜡样芽孢杆菌M22基因组文库的构建及Fe-SOD基因片段的克隆 | 第82-98页 |
| 1 材料与方法 | 第83-86页 |
| 1.1 试验材料 | 第83页 |
| 1.2 试验方法 | 第83-86页 |
| 2 结果与分析 | 第86-96页 |
| 2.1 M22菌株基因组文库的构建 | 第86-88页 |
| 2.2 基因文库中阳性重组子鉴定 | 第88-90页 |
| 2.3 Fe-SOD基因核心区简并引物的设计 | 第90-91页 |
| 2.4 pZL-sodB的PCR鉴定 | 第91-92页 |
| 2.5 含Fe-SOD基因核心区片段的克隆 | 第92-93页 |
| 2.6 扩增片段测序结果及序列分析 | 第93页 |
| 2.7 扩增片段推定氨基酸序列在线BLAST检索结果 | 第93-96页 |
| 2.8 亚克隆的构建及Fe-SOD基因序列测定 | 第96页 |
| 3 小结与讨论 | 第96-98页 |
| 3.1 基因组文库的构建 | 第96-97页 |
| 3.2 M22菌株Fe-SOD基因片段的克隆 | 第97-98页 |
| 第四章 蜡样芽孢杆菌M22铜锌超氧化物歧化酶基因在毕赤酵母中的分泌表达 | 第98-108页 |
| 1 材料与方法 | 第99-102页 |
| 1.1 材料 | 第99-101页 |
| 1.2 方法 | 第101-102页 |
| 2 结果与分析 | 第102-107页 |
| 2.1 扩增CuZn-SOD基因编码区引物的设计及PCR扩增 | 第102-103页 |
| 2.2 分泌型表达载体pZaA-sodC的构建 | 第103-104页 |
| 2.3 重组菌株的构建及PCR鉴定 | 第104-106页 |
| 2.4 CuZn-SOD基因在毕赤酵母中的分泌表达及表达产物的活性鉴定 | 第106-107页 |
| 3 小结与讨论 | 第107-108页 |
| 研究结论及进一步研究设想 | 第108-109页 |
| 参考文献 | 第109-121页 |
| 致谢 | 第121-122页 |
| 附录 | 第122-124页 |
| 附录A 发表的文章及克隆的基因序列 | 第122-123页 |
| 附录B 缩略词表 | 第123-124页 |
