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植物合成生物学工具箱的优化及其在基因组编辑中的应用研究

中文摘要第4-5页
Abstract第5-6页
缩略词第9-10页
第一章 文献综述第10-40页
    1.1 合成生物学第10-13页
        1.1.1 合成生物学的定义第10页
        1.1.2 合成生物学的发展第10-12页
        1.1.3 合成生物学的应用前景第12-13页
    1.2 DNA组装方法第13-33页
        1.2.1 DNA组装方法—酶切和连接的方法第14-18页
        1.2.2 DNA组装方法—重叠定向组装方法第18-22页
        1.2.3 DNA组装方法—位点特异性重组方法第22-25页
        1.2.4 DNA组装方法—同源重组方法第25-33页
    1.3 基因编辑技术第33-39页
        1.3.1 基因编辑技术概述第33页
        1.3.2 基因编辑技术原理第33-34页
        1.3.3 基因编辑技术的发展第34-35页
        1.3.4 CRISPR/Cas9系统基因编辑技术的发展第35页
        1.3.5 CRISPR/Cas9系统基因编辑技术的原理第35-37页
        1.3.6 CRISPR/Cas9系统基因编辑技术在植物基因组中的应用第37页
        1.3.7 CRISPR/Cas9系统基因编辑技术在植物多基因敲除中的应用第37页
        1.3.8 CRISPR/Cas9系统的脱靶效应第37-38页
        1.3.9 正交CRISPR/Cas9系统第38-39页
    1.4 本研究的立题依据和意义第39-40页
第二章 材料与方法第40-79页
    2.1 实验材料第40-43页
        2.1.1 菌株与质粒第40页
        2.1.2 常用分子生物学试剂及设备第40-41页
        2.1.3 植物材料第41页
        2.1.4 常用培养基的配制第41页
        2.1.5 常用抗生素的配制第41-42页
        2.1.6 常用溶液的配制第42-43页
    2.2 实验方法第43-79页
        2.2.1 载体构建基本方法第43-48页
        2.2.2 植物多基因表达载体构建方法第48-74页
        2.2.3 植物材料培养方法第74-75页
        2.2.4 植物材料检测方法第75-79页
第三章 实验结果与分析第79-105页
    3.1 MISSA2.0组分第79-82页
        3.1.1 MISSA2.0的供体载体第79-80页
        3.1.2 MISSA2.0的供体载体的宿主菌株第80-81页
        3.1.3 MISSA2.0的受体载体第81-82页
        3.1.4 MISSA2.0的受体载体的宿主菌株第82页
    3.2 MISSA2.0中DNA组装规则第82-84页
    3.3 MISSA2.0系统组分的验证第84-90页
        3.3.1 MISSA2.0能够将基因组装到大肠杆菌染色体上第85-87页
        3.3.2 MISSA2.0促进植物多基因的诱导表达系统的建立第87-90页
    3.4 MISSA2.0是研究多基因整合抗逆性的有效手段第90-93页
    3.5 MISSA2.0促进正交CRISPR/Cas9系统的组装第93-100页
        3.5.1 正交CRISPR/Cas9系统的组装第93-94页
        3.5.2 转基因株系突变分析第94-97页
        3.5.3 转基因株系T-DNA插入突变分析第97-98页
        3.5.4 SaCas9功能测试第98-100页
    3.6 MISSA3.0系统第100-105页
        3.6.1 MISSA3.0系统组分第100-101页
        3.6.2 MISSA3.0系统组分的验证第101-105页
第四章 讨论第105-108页
第五章 结论与展望第108-109页
参考文献第109-121页
附录一 论文中所需引物序列第121-132页
致谢第132-133页
个人简历第133页

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