中文摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
缩略词 | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-40页 |
1.1 合成生物学 | 第10-13页 |
1.1.1 合成生物学的定义 | 第10页 |
1.1.2 合成生物学的发展 | 第10-12页 |
1.1.3 合成生物学的应用前景 | 第12-13页 |
1.2 DNA组装方法 | 第13-33页 |
1.2.1 DNA组装方法—酶切和连接的方法 | 第14-18页 |
1.2.2 DNA组装方法—重叠定向组装方法 | 第18-22页 |
1.2.3 DNA组装方法—位点特异性重组方法 | 第22-25页 |
1.2.4 DNA组装方法—同源重组方法 | 第25-33页 |
1.3 基因编辑技术 | 第33-39页 |
1.3.1 基因编辑技术概述 | 第33页 |
1.3.2 基因编辑技术原理 | 第33-34页 |
1.3.3 基因编辑技术的发展 | 第34-35页 |
1.3.4 CRISPR/Cas9系统基因编辑技术的发展 | 第35页 |
1.3.5 CRISPR/Cas9系统基因编辑技术的原理 | 第35-37页 |
1.3.6 CRISPR/Cas9系统基因编辑技术在植物基因组中的应用 | 第37页 |
1.3.7 CRISPR/Cas9系统基因编辑技术在植物多基因敲除中的应用 | 第37页 |
1.3.8 CRISPR/Cas9系统的脱靶效应 | 第37-38页 |
1.3.9 正交CRISPR/Cas9系统 | 第38-39页 |
1.4 本研究的立题依据和意义 | 第39-40页 |
第二章 材料与方法 | 第40-79页 |
2.1 实验材料 | 第40-43页 |
2.1.1 菌株与质粒 | 第40页 |
2.1.2 常用分子生物学试剂及设备 | 第40-41页 |
2.1.3 植物材料 | 第41页 |
2.1.4 常用培养基的配制 | 第41页 |
2.1.5 常用抗生素的配制 | 第41-42页 |
2.1.6 常用溶液的配制 | 第42-43页 |
2.2 实验方法 | 第43-79页 |
2.2.1 载体构建基本方法 | 第43-48页 |
2.2.2 植物多基因表达载体构建方法 | 第48-74页 |
2.2.3 植物材料培养方法 | 第74-75页 |
2.2.4 植物材料检测方法 | 第75-79页 |
第三章 实验结果与分析 | 第79-105页 |
3.1 MISSA2.0组分 | 第79-82页 |
3.1.1 MISSA2.0的供体载体 | 第79-80页 |
3.1.2 MISSA2.0的供体载体的宿主菌株 | 第80-81页 |
3.1.3 MISSA2.0的受体载体 | 第81-82页 |
3.1.4 MISSA2.0的受体载体的宿主菌株 | 第82页 |
3.2 MISSA2.0中DNA组装规则 | 第82-84页 |
3.3 MISSA2.0系统组分的验证 | 第84-90页 |
3.3.1 MISSA2.0能够将基因组装到大肠杆菌染色体上 | 第85-87页 |
3.3.2 MISSA2.0促进植物多基因的诱导表达系统的建立 | 第87-90页 |
3.4 MISSA2.0是研究多基因整合抗逆性的有效手段 | 第90-93页 |
3.5 MISSA2.0促进正交CRISPR/Cas9系统的组装 | 第93-100页 |
3.5.1 正交CRISPR/Cas9系统的组装 | 第93-94页 |
3.5.2 转基因株系突变分析 | 第94-97页 |
3.5.3 转基因株系T-DNA插入突变分析 | 第97-98页 |
3.5.4 SaCas9功能测试 | 第98-100页 |
3.6 MISSA3.0系统 | 第100-105页 |
3.6.1 MISSA3.0系统组分 | 第100-101页 |
3.6.2 MISSA3.0系统组分的验证 | 第101-105页 |
第四章 讨论 | 第105-108页 |
第五章 结论与展望 | 第108-109页 |
参考文献 | 第109-121页 |
附录一 论文中所需引物序列 | 第121-132页 |
致谢 | 第132-133页 |
个人简历 | 第133页 |