| 英文缩略词表 | 第3-7页 |
| 中文摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8页 |
| 前言 | 第9-19页 |
| 参考文献 | 第12-19页 |
| 第一部分 Neuroserpin在视网膜组织中的表达与分布 | 第19-27页 |
| 目的 | 第19页 |
| 材料 | 第19-20页 |
| 1. 实验动物 | 第19页 |
| 2. 主要试剂 | 第19页 |
| 3. 主要设备和仪器 | 第19-20页 |
| 4. 药物和溶液配制 | 第20页 |
| 方法 | 第20-24页 |
| 1. 视网膜缺血再灌注损伤模型的制备 | 第20-21页 |
| 2. 视网膜组织Neuroserpin的表达与分布 | 第21-24页 |
| 2.1 视网膜组织样本的准备 | 第21页 |
| 2.2 免疫荧光技术对Neuroserpin进行定位分析 | 第21-22页 |
| 2.3 蛋白印记技术对Neuroserpin进行定量分析 | 第22-24页 |
| 结果 | 第24-26页 |
| 1. 生理及病理情况下Neuroserpin在视网膜组织中的表达及分布 | 第24-26页 |
| 2. 不同的灌注压及灌注时间,均可诱导neuroserpin的表达 | 第26页 |
| 小结 | 第26-27页 |
| 第二部分 Neuroserpin玻璃体腔注射对视网膜缺血再灌注损伤的保护 | 第27-40页 |
| 目的 | 第27页 |
| 材料 | 第27-29页 |
| 1. 实验动物 | 第27页 |
| 2. 主要试剂 | 第27页 |
| 3. 主要设备和仪器 | 第27-28页 |
| 4. 药物和溶液配制 | 第28-29页 |
| 方法 | 第29-33页 |
| 1. 玻璃体腔注射 | 第29页 |
| 1.1 注射前准备 | 第29页 |
| 1.2 玻璃体腔给药 | 第29页 |
| 2. 视网膜缺血再灌注模型制备 | 第29页 |
| 3. 暗适应ERG的测量 | 第29-30页 |
| 3.1 视网膜ERG记录时间点 | 第29页 |
| 3.2 测量前准备 | 第29-30页 |
| 3.3 ERG记录 | 第30页 |
| 4. 小鼠视网膜神经元凋亡的检测 | 第30-31页 |
| 4.1 视网膜样本收集 | 第30页 |
| 4.3 准备冰冻切片 | 第30页 |
| 4.4 TUNEL试剂盒进行凋亡染色 | 第30-31页 |
| 4.5 计数方法 | 第31页 |
| 5. 视网膜缺血再灌注损伤后caspase-3、cleaved caspase-3、PARP、cleavedPRAP、caspase-9、cleaved caspase-9、caspase-8、cleaved caspase-8蛋白表达水平的分析(免疫印迹western blot) | 第31-33页 |
| 5.1 视网膜蛋白样本的准备 | 第31页 |
| 5.2 配制SDS-PAGE浓缩胶与分离胶 | 第31页 |
| 5.3 上样 | 第31页 |
| 5.4 SDS-PAGE电泳 | 第31-32页 |
| 5.5 转膜 | 第32页 |
| 5.6 蛋白质显像 | 第32页 |
| 5.7 免疫检测 | 第32页 |
| 5.8 化学发光检测 | 第32-33页 |
| 5.9 结果分析 | 第33页 |
| 6. 统计分析 | 第33页 |
| 结果 | 第33-39页 |
| 1. 在野生型C57小鼠视网膜缺血再灌注损伤中,Neuroserpin玻璃体预干预促进视网膜功能的恢复 | 第33-35页 |
| 2. Neuroserpin玻璃体给药保护视网膜缺血再灌注损伤诱导的细胞凋亡 | 第35-37页 |
| 3. Neuroserpin抑制caspase-3和PARP的激活来发挥抗凋亡功能 | 第37-38页 |
| 4. Neuroserpin通过抑制caspase-9通路来抑制caspase-3的激活 | 第38-39页 |
| 小结 | 第39-40页 |
| 第三部分 Neuroserpin对视网膜缺血再灌注损伤是否依赖于对组织型纤溶酶原激活剂的抑制活性 | 第40-46页 |
| 目的 | 第40页 |
| 材料 | 第40页 |
| 1. 实验动物 | 第40页 |
| 2. 主要试剂：同第二部分主要试剂 | 第40页 |
| 3. 主要设备和仪器：同第二部分主要试剂 | 第40页 |
| 方法 | 第40-41页 |
| 1. tPA基因敲除鼠(tPA~(-/-))验证 | 第40页 |
| 1.1 取视网膜 | 第40页 |
| 1.2 采用蛋白印记技术验证tPA~(-/-)鼠视网膜组织中不表达tPA蛋白 | 第40页 |
| 2. 玻璃体腔注射 | 第40页 |
| 3. 视网膜缺血再灌注模型制备 | 第40-41页 |
| 4. 暗适应ERG的测量 | 第41页 |
| 5. tPA基因敲除(tPA~(-/-))鼠视网膜缺血再灌注损伤后caspase-3、cleavedcaspase-3、PARP、cleaved PRAP蛋白表达水平的分析(免疫印迹western blot)： | 第41页 |
| 6. 统计学分析 | 第41页 |
| 结果 | 第41-45页 |
| 1. 在tPA基因敲除鼠(tPA~(-/-))中Neuroserpin玻璃体给药促进视网膜缺血再灌注损伤功能的恢复 | 第41-43页 |
| 2. 在tPA基因敲除鼠(tPA~(-/-))中,Neuroserpin玻璃体给药保护视网膜缺血再灌注损伤诱导的细胞凋亡 | 第43-45页 |
| 3. 在tPA基因敲除鼠(tPA~(-/-)),Neuroserpin抑制caspase-3和PARP的激活来发挥抗凋亡功能 | 第45页 |
| 小结 | 第45-46页 |
| 讨论 | 第46-48页 |
| 全文总结及展望 | 第48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 综述 | 第52-62页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
