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基于RT-LAMP的口蹄疫病毒(FMDV)通用型快速检测方法构建

中文摘要第4-7页
Abstract第7-9页
1 概述第15-27页
    1.1 口蹄疫第15-19页
        1.1.1 流行态势第15-16页
        1.1.2 传播特点第16页
        1.1.3 临床及病理特征第16-17页
        1.1.4 病毒结构第17-19页
    1.2 FMDV的实验室检测第19-21页
        1.2.1 病原学检测第19页
        1.2.2 血清学检测第19-20页
        1.2.3 分子生物学检测第20-21页
    1.3 环介导等温扩增技术第21-26页
        1.3.1 扩增原理第21-23页
        1.3.2 技术特点第23-25页
        1.3.3 实际应用第25-26页
    1.4 研究内容第26页
    1.5 研究目的与意义第26-27页
2 FMDV RT-LAMP引物设计和筛选第27-41页
    2.1 实验材料第28-29页
        2.1.1 样品来源第28页
        2.1.2 实验仪器和设备第28-29页
        2.1.3 常用材料与试剂第29页
        2.1.4 主要试剂配制第29页
    2.2 实验方法第29-34页
        2.2.1 核酸提取第30页
        2.2.2 序列比对第30页
        2.2.3 软件使用第30-31页
        2.2.4 参数调整第31-32页
        2.2.5 RT-PCR筛选引物第32-33页
        2.2.6 荧光RT-LAMP筛选引物第33页
        2.2.7 克隆与测序第33-34页
    2.3 实验结果第34-39页
        2.3.1 模板质量检测结果第34页
        2.3.2 引物设计结果第34-35页
        2.3.3 RT-PCR引物筛选结果第35-36页
        2.3.4 荧光RT-LAMP引物筛选结果第36-37页
        2.3.5 克隆与测序结果第37-39页
    2.4 讨论第39-41页
3 FMDV RT–LAMP反应体系的优化第41-61页
    3.1 实验材料第41-42页
        3.1.1 样品来源第41页
        3.1.2 实验仪器与设备第41页
        3.1.3 实验材料与试剂第41页
        3.1.4 主要试剂配制第41-42页
    3.2 实验方法第42-46页
        3.2.1 核酸提取第42页
        3.2.2 镁离子浓度的优化第42页
        3.2.3 甜菜碱浓度的优化第42-43页
        3.2.4 dNTP浓度的优化第43页
        3.2.5 Bst DNA大片段聚合酶的优化第43-44页
        3.2.6 AMV反转录酶的优化第44页
        3.2.7 引物的优化第44-45页
        3.2.8 染料浓度优化第45页
        3.2.9 反应温度的优化第45-46页
        3.2.10 反应时间优化第46页
    3.3 结果第46-59页
        3.3.1 模板质量检测结果第46页
        3.3.2 镁离子浓度的优化第46-47页
        3.3.3 甜菜碱溶液浓度的优化第47-48页
        3.3.4 dNTP浓度的优化第48-49页
        3.3.5 Bst DNA大片段聚合酶的优化第49-50页
        3.3.6 AMV反转录酶的优化第50-51页
        3.3.7 引物的优化第51-54页
        3.3.8 染料浓度的优化第54-57页
        3.3.9 反应温度的优化第57页
        3.3.10 反应时间的优化第57-58页
        3.3.11 优化后的反应体系和条件第58-59页
    3.4 讨论第59-61页
4 FMDV RT-LAMP检测方法的验证第61-81页
    4.1 实验材料第61-62页
        4.1.1 样品来源第61页
        4.1.2 实验仪器设备第61页
        4.1.3 常用材料与试剂第61-62页
        4.1.4 主要试剂及配制第62页
    4.2 实验方法第62-63页
        4.2.1 核酸提取第62-63页
        4.2.2 敏感性试验第63页
        4.2.3 灵敏度试验第63页
        4.2.4 特异性试验第63页
    4.3 结果第63-78页
        4.3.1 模板质量检测结果第63-64页
        4.3.2 敏感性第64-69页
        4.3.3 灵敏度第69-78页
        4.3.4 特异性第78页
    4.4 讨论第78-81页
5 全文总结第81-83页
    5.1 主要研究内容与结果第81-82页
    5.2 主要结论第82页
    5.3 本研究的创新点第82-83页
参考文献第83-87页
个人简历、在学期间发表的学术论文及研究成果第87-88页
致谢第88页

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