摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-12页 |
第一部分 绪论 | 第12-21页 |
1 血吸虫生物学基础 | 第12-14页 |
·血吸虫的分类和种类 | 第12页 |
·血吸虫的分布 | 第12-13页 |
·血吸虫的生活史 | 第13-14页 |
·我国血吸虫病流行现状 | 第14页 |
2 日本血吸虫病疫苗的研究进展 | 第14-16页 |
·血吸虫疫苗研制的可行性 | 第15页 |
·血吸虫病疫苗研制历程 | 第15-16页 |
3 几种重要的日本血吸虫候选抗原及其免疫保护效力 | 第16-18页 |
4 本课题研究背景、内容和意义 | 第18-19页 |
·研究背景 | 第18-19页 |
·研究目的 | 第19页 |
·研究内容 | 第19页 |
·研究意义 | 第19页 |
5 技术路线 | 第19-21页 |
第二部分 SjNAMPT的克隆、表达与初步鉴定 | 第21-61页 |
第1章 SjNAMPT的生物信息学分析 | 第21-33页 |
·材料和方法 | 第21-23页 |
·SjNAMPT cDNA序列及开放阅读框(ORF)分析 | 第21-22页 |
·蛋白质理化性质分析 | 第22页 |
·蛋白质功能区域分析 | 第22页 |
·模序(Motif)搜索 | 第22页 |
·蛋白空间结构预测 | 第22页 |
·抗原决定簇预测 | 第22页 |
·同源序列比对 | 第22页 |
·分子系统发育分析 | 第22-23页 |
·结果 | 第23-33页 |
·SjNAMPT基因序列、ORF序列及编码蛋白序列 | 第23页 |
·SjNAMPT蛋白质基本理化性质分析 | 第23-25页 |
·SjNAMPT蛋白质功能分析 | 第25-28页 |
·SjNAMPT蛋白结构预测 | 第28-29页 |
·SjNAMPT蛋白同源序列比对及分子系统发育分析 | 第29-31页 |
·抗原决定簇预测 | 第31-32页 |
·亚细胞定位预测 | 第32-33页 |
第2章 SjNAMPT基因的克隆表达 | 第33-43页 |
·材料、仪器和试剂 | 第33-36页 |
·材料 | 第33页 |
·仪器 | 第33-34页 |
·试剂 | 第34页 |
·部分试剂配方 | 第34-36页 |
·方法 | 第36-40页 |
·SjNAMPT基因编码序列的克隆 | 第36-39页 |
·SjNAMPT基因的表达 | 第39-40页 |
·结果 | 第40-43页 |
·SjNAMPT基因的PCR扩增 | 第40页 |
·pET28a质粒的抽提 | 第40-41页 |
·重组质粒的测序 | 第41页 |
·重组质粒的表达 | 第41-43页 |
第3章 SjNAMPT蛋白的纯化 | 第43-47页 |
·材料、仪器和试剂 | 第43页 |
·方法 | 第43-44页 |
·重组蛋白SjNAMPT的纯化 | 第43-44页 |
·蛋白浓度测定 | 第44页 |
·结果 | 第44-47页 |
第4章 SjNAMPT基因在日本血吸虫各发育期转录特异性 | 第47-49页 |
·材料、仪器和试剂 | 第47页 |
·方法 | 第47页 |
·结果 | 第47-49页 |
第5章 SjNAMPT重组蛋白的免疫原性分析 | 第49-53页 |
·材料、仪器和试剂 | 第49页 |
·方法 | 第49-51页 |
·结果 | 第51-53页 |
第6章 SjNAMPT蛋白诊断日本血吸虫病价值研究 | 第53-56页 |
·材料、仪器和试剂 | 第53页 |
·方法 | 第53-54页 |
·结果 | 第54-56页 |
·SjNAMPT包被浓度的确定 | 第54页 |
·SjNAMPT重组蛋白的诊断效能 | 第54-56页 |
第7章 SjNAMPT重组蛋白的免疫保护性实验 | 第56-59页 |
·材料和试剂 | 第56页 |
·方法 | 第56-58页 |
·实验分组 | 第56页 |
·免疫方案 | 第56-57页 |
·采血方案 | 第57页 |
·尾蚴攻击感染 | 第57页 |
·成虫、虫卵计数 | 第57-58页 |
·结果 | 第58-59页 |
第8章 结论及讨论 | 第59-61页 |
第三部分 日本血吸虫白介素-16(SjIL-16)克隆、表达及鉴定 | 第61-83页 |
前言 | 第61页 |
第1章 SjIL-16的生物信息学分析 | 第61-71页 |
·材料和方法 | 第61-62页 |
·结果 | 第62-71页 |
·SjIL-16基因序列、ORF序列及编码蛋白序列 | 第62页 |
·SjIL-16蛋白质基本理化性质 | 第62-64页 |
·SjIL-16蛋白质结构功能域 | 第64-68页 |
·SjIL-16蛋白二级结构预测 | 第68-69页 |
·SJIL-16蛋白三级结构预测 | 第69页 |
·同源序列比对 | 第69-70页 |
·SjIL-16分子系统发育分析 | 第70-71页 |
第2章 SjIL-16重组质粒的构建、表达及纯化 | 第71-76页 |
·材料和方法 | 第71页 |
·材料 | 第71页 |
·方法 | 第71页 |
·结果 | 第71-76页 |
·SjIL-16基因的PCR扩增 | 第71-72页 |
·SjIL-16的原核表达 | 第72-73页 |
·SjIL-16蛋白的纯化 | 第73-74页 |
·SjIL-16蛋白浓度测定 | 第74-76页 |
第3章 SjIL-16基因在日本血吸虫各发育期的转录特异性 | 第76-77页 |
·材料、仪器和方法 | 第76页 |
·结果 | 第76-77页 |
第4章 SjIL-16重组蛋白的免疫原性、诊断价值和免疫保护性研究 | 第77-81页 |
·材料和方法 | 第77页 |
·结果 | 第77-81页 |
·SjIL-16蛋白的免疫原性分析 | 第77-78页 |
·SjIL-16蛋白ELISA包被浓度的确定 | 第78页 |
·SjIL-16蛋白诊断价值研究 | 第78-79页 |
·SjIL-16蛋白动物保护性实验 | 第79-81页 |
第5章 结论与讨论 | 第81-83页 |
参考文献 | 第83-87页 |
致谢 | 第87-88页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第88-89页 |
附录 日本血吸虫尼克酞胺磷酸核糖转移酶的生物信息学分析 | 第89-97页 |