| 中文摘要 | 第7-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 中英文对照缩略词 | 第14-15页 |
| 前言 | 第15-18页 |
| 第一部分 Nkx2.1在神经管畸形脑组织中表达的测序结果验证 | 第18-27页 |
| 1 实验材料 | 第18-20页 |
| 1.1 实验动物 | 第18页 |
| 1.2 实验试剂 | 第18-19页 |
| 1.3 实验器材 | 第19页 |
| 1.4 主要试剂配制 | 第19-20页 |
| 2 实验方法 | 第20-23页 |
| 2.1 小鼠神经管畸形的模型建立 | 第20页 |
| 2.2 Real-time PCR验证鼠胚脑组织中Nkx2.1 mRNA水平的表达情况 | 第20-22页 |
| 2.3 统计分析 | 第22-23页 |
| 3 实验结果 | 第23-26页 |
| 3.1 小鼠神经管畸形的模型建立 | 第23-24页 |
| 3.2 Nkx2.1在鼠胚脑组织中m RNA水平的表达情况 | 第24-26页 |
| 4 讨论 | 第26-27页 |
| 第二部分 Nkx2.1 在小鼠胚胎中的时空表达定位 | 第27-42页 |
| 1 实验材料 | 第27-32页 |
| 1.1 实验动物 | 第27页 |
| 1.2 实验试剂 | 第27-29页 |
| 1.3 主要试剂配制 | 第29-32页 |
| 2 实验方法 | 第32-37页 |
| 2.1 Nkx2.1 RNA探针的制备及纯化 | 第32-35页 |
| 2.2 全胚胎原位杂交前胚胎的处理 | 第35页 |
| 2.3 全胚胎原位杂交过程 | 第35-37页 |
| 3 实验结果 | 第37-40页 |
| 3.1 1%琼脂糖凝胶电泳进行菌落PCR鉴定 | 第37-38页 |
| 3.2 Nkx2.1探针模板测序比对结果图 | 第38页 |
| 3.3 Nkx2.1探针的完整性检测 | 第38页 |
| 3.4 全胚胎原位杂交检测Nkx2.1 在小鼠胚胎中的时空表达定位情况 | 第38-40页 |
| 4 讨论 | 第40-42页 |
| 第三部分 NKX2.1低表达对Neuro-2a细胞功能影响及机制的初步研究 | 第42-63页 |
| 1 实验材料 | 第42-45页 |
| 1.1 实验试剂 | 第42-43页 |
| 1.2 实验器材 | 第43-44页 |
| 1.3 主要试剂配制 | 第44-45页 |
| 2 实验方法 | 第45-54页 |
| 2.1 Neuro-2a细胞的培养 | 第45-47页 |
| 2.2 SiRNA-Nkx2.1细胞转染 | 第47-51页 |
| 2.3 CCK-8 法检测Neuro-2a细胞的增殖能力 | 第51页 |
| 2.4 流式细胞仪检测Neuro-2a细胞的周期变化 | 第51-52页 |
| 2.5 流式细胞仪检测Neuro-2a细胞的凋亡率 | 第52页 |
| 2.6 荧光染色检测Neuro-2a细胞活化的caspase3的情况 | 第52-53页 |
| 2.7 Real-time PCR检测Neuro-2a细胞Shh mRNA水平的表达变化 | 第53页 |
| 2.8 Western blotting检测Shh, Ptch1及Smo蛋白水平的表达变化 | 第53-54页 |
| 2.9 统计分析 | 第54页 |
| 3 实验结果 | 第54-61页 |
| 3.1 Neuro-2a细胞的形态学观察 | 第54页 |
| 3.2 SiRNA-Nkx2.1 细胞转染 | 第54-55页 |
| 3.3 NKX2.1低表达对Neuro-2a细胞增殖的影响 | 第55-56页 |
| 3.4 NKX2.1低表达对Neuro-2a细胞周期的影响 | 第56-57页 |
| 3.5 NKX2.1低表达对Neuro-2a细胞凋亡的影响 | 第57-58页 |
| 3.6 NKX2.1低表达对Neuro-2a细胞活化的Caspase3的影响 | 第58页 |
| 3.7 NKX2.1低表达对Shh mRNA水平的表达变化 | 第58-60页 |
| 3.8 NKX2.1低表达对蛋白Shh、Ptch1和Smo表达的影响 | 第60-61页 |
| 4 讨论 | 第61-63页 |
| 全文结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-68页 |
| 综述 | 第68-78页 |
| 参考文献 | 第73-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 个人简历 | 第79-80页 |
